Probe-based Confocale Laser Endomicroscopy van de urinewegen: De Techniek

Het doel van het volgende experiment is om in vivo microscopie te demonstreren met behulp van probe-gebaseerde confocale laser-endomicroscopie bij een patiënt die een transurethrale resectie van een blaastumor ondergaat. Dit wordt bereikt door eerst witlichtcystoscopie te gebruiken om het gehele urotheel van de blaas te visualiseren en eventuele abnormale of verdachte mucosale laesies op te merken. Als tweede stap wordt een contrastmiddel intra-vesicaal toegediend, wat het fluorescentiecontrast levert dat nodig is voor visualisatie met de confocale laser-endomicroscoop; in de derde stap wordt in vivo microscopie van elk gebied van belang uitgevoerd en worden de cellulaire microarchitecturale en vasculaire kenmerken van het weefsel genoteerd.

Uiteindelijk kunnen de bevindingen van de in vivo microscopie worden vergeleken met de histopathologische analyse van de biopten uit de regio's van belang. De procedure zal worden gedemonstreerd door Dr. Joseph Leal, de urologisch chirurg die de toepassing van de probe-based confocale laser-endomicroscopie voor de urinewegen in de operatiekamer heeft ontwikkeld. Nadat de proefpersoon in de steunpositie (lithotomiepositie) is geplaatst, begint u met het inbrengen van een rigide cystoscoop via de urethra, waarbij standaard witlichtcystoscopie wordt gebruikt om de regio's van de blaas onder wit licht te inspecteren.

Markeer de gebieden van interesse voor confocale laser-endomicroscopie met een resectielus. Andere macroscopische optische beeldvormingsmodaliteiten, zoals fluorescente cystoscopie en narrow band imaging, kunnen in deze stap worden gebruikt om aanvullende verdachte gebieden te identificeren; voer nu een steriele urinewegkatheter in de blaas in met behulp van een spuit van 60 milliliter voor de katheterpunt. Installeer het verdunde contrastmiddel via zwaartekracht.

Klem vervolgens de urinekatheter af om het contrastmiddel tijdelijk in de blaas te houden. Laat het middel na vijf minuten uit de blaas lopen. Giet daarna 240 tot 300 milliliter normale zoutoplossing in de spuit van 60 milliliter om eventueel resterend contrast uit de blaas te spoelen voor de intraveneuze injectie van fluoresceïne.

Trek één milliliter fluoresceïne op in een spuit. Bevestig de spuit aan het intraveneuze toegangspunt en injecteer 0,5 tot één milliliter fluoresceïne intraveneus als een bolus, waarbij de lijn wordt doorgespoeld met normale zoutoplossing. Nadat het contrastmiddel is geïnjecteerd, haal je een steriele confocale laser-endomicroscopie-beeldvormingsprobe uit de verpakking en sluit je deze aan op de laserscaneenheid.

Verwarm vervolgens de beeldgevingsonde en kalibreer deze volgens de instructies van de fabrikant, en voer daarna de rigide cystoscoop met een nulgradenlens opnieuw in de blaas in. Schuif nu de confocale endomicroscopie-beeldgevingsonde door het werkkanaal van de cystoscoop, zodanig dat de punt zich net voorbij de cystoscoop bevindt onder wit licht. Lokaliseer de eerder gemarkeerde gebieden van belang terwijl de beeldgevingsonde het interessegebied scant.

Sla de beelden op voor toekomstige analyse. Gebruik vervolgens de hand van de operator om de confocale endomicroscopie-beeldvorming te manipuleren. Zend de probe direct en met snel contact naar de regio's van belang voor optische sectie van deze regio's van belang.

Verhoog en verlaag voorzichtig de druk op de beeldvormingssonde terwijl direct contact wordt gehandhaafd om tumoren te bereiken die zich in de binnenkant van de blaas bevinden. Gebruik een standaard AL-elleboog en brug om de afbuiging van de beeldvormingssonde te vergemakkelijken voor direct contact met het interessegebied. Indien gewenst kunnen cold-cut biopten worden genomen uit de overeenkomstige interessegebieden die met confocale laserendoscopie zijn gescand.

Verwijder na voltooiing van de beeldvorming de confocale endomicroscopie-beeldvormingssonde uit het werkkanaal. Bij het uitvoeren van deze procedure is het belangrijk om te onthouden dat overtollig fluoresceïne uit de blaas moet worden gespoeld vóór de beeldvorming en dat er een contact van 90 graden tussen de sonde en het slijmvliesoppervlak moet worden gehandhaafd. Deze eerste afbeelding is afkomstig van een representatieve witlichtcystoscopie met een intravasculair gekleurde papillaire tumor.

Let op de beeldgevingsprobe van 2,6 millimeter die onderaan de afbeelding zichtbaar is. Deze twee afbeeldingen zijn representatieve confocale laser-endomicroscopiebeelden die zijn verkregen van twee verschillende blaasentumoren met behulp van respectievelijk intravesicale en intraveneuze fluoresceïne. Aangezien de beeldgevingsprobes uitwisselbaar zijn tussen de verschillende typen cystoscopen, kan confocale laser-endomicroscopie worden gecombineerd met andere opkomende beeldgevingsmodaliteiten, wat de diagnostische nauwkeurigheid van elke afzonderlijke technologie kan verbeteren, waaronder fluorescente cystoscopie zoals hier getoond en narrow band imaging zoals hier getoond.

Zo kan deze methode inzicht bieden in blaas珍惜kanker. Het kan worden toegepast op andere systemen, zoals urotheelcarcinomen van de bovenste urinewegen, die mogelijk moeilijk te diagnosticeren zijn via een biopsie.