Een introductie tot werken in de laminaire flowkast

Afzuigkappen en werkkasten vormen een veelvoorkomende klasse instrumenten die dienen als beschermende omhulling voor diverse soorten laboratoriumexperimenten.

Naast het afschermen van experimentele monsters tegen de omgeving, beschermen deze kappen ook de onderzoeker tegen gevaarlijke of infectieuze monsters.

De term “de kap” kan verwijzen naar laminaire flow-banken, zuurkasten, weefselkweekkasten of biologische veiligheidskasten. Kies altijd de juiste variant voor uw experimenten.

De meeste zuivkasten werken volgens het basisprincipe van laminaire stroming, wat een gestroomlijnde en ononderbroken luchtstroom in parallelle lagen is.

In tegenstelling tot turbulente stroming maakt laminaire stroming het mogelijk dat lucht rond objecten in de kast stroomt, waardoor de steriliteit van de werkomgeving behouden blijft en schadelijke chemische dampen kunnen worden ingedamd.

Zuivkasten kunnen worden ontworpen met een horizontale of verticale laminaire stroming.

Bij kasten met horizontale stroming wordt de inlaatstroom gefilterd, waarna de lucht horizontaal van de achterkant van de unit naar de voorkant stroomt.

Bij kasten met verticale stroming wordt de inlaat gefilterd, waarna de lucht verticaal van de gebruiker af wordt gezogen en de uitlaatstroom bij het verlaten van de kast opnieuw wordt gefilterd. Deze units behouden doorgaans de steriliteit van de werkomgeving.

Alle afzuigkappen hebben dezelfde basiscomponenten. Een hoofdonderdeel is het schuifvenster. Dit is een schuivende beschermende glazen barrière die dient als schild tegen spatten en dampen. Het kan horizontaal of, bij sommige units, verticaal georiënteerd zijn.

Het werkoppervlak in de kap is over het algemeen gemaakt van een niet-poreus materiaal, zoals roestvrij staal.

Alle units hebben ook een luchtinlaat, waardoor lucht de unit binnenkomt, en een uitlaat. De locatie van de inlaat en de uitlaat varieert, afhankelijk van het exacte type en model van de kap.

Naast het schuifvenster bevindt zich vaak een paneel met bedieningselementen om de luchtinlaat, de kapverlichting en andere functies aan te passen. Sommige modellen zijn uitgerust met een UV-lamp, die kan worden gebruikt om de unit te desinfecteren wanneer deze niet in gebruik is.

Laat de UV-lamp nooit aanstaan terwijl er iemand in het lab is of de kap gebruikt! Dit kan leiden tot netvliesbeschadiging, huidverbrandingen en een verhoogd kankerrisico.

Nadat u het juiste type zuurkast voor uw experiment heeft gekozen, dient u ervoor te zorgen dat u de juiste persoonlijke beschermingsmiddelen, oftewel PBM, gebruikt. Trek naar behoefte handschoenen, een veiligheidsbril en een masker aan.

Indien een aseptische omgeving vereist is voor het experiment, zoals in een weefselkweekkast, begin dan met het besproeien van het oppervlak van de kast met 70% ethanol. Dit desinfecteert het oppervlak en verdampt snel zonder residu achter te laten.

Zorg er daarnaast voor dat u elk object met 70% ethanol bespuit wanneer u het in de kast plaatst, om een schone omgeving te behouden.

Houd bij het plaatsen van objecten in de kast rekening met de luchtstroom. Blokkeer de luchtstroom aan de achterzijde niet en houd een vrije ruimte van 6 inches aan de voorzijde van de kast vrij.

Zorg ervoor dat u tijdens het experiment de juiste hoogte van de schuif gebruikt om een optimale laminaire luchtstroom te handhaven. De meeste kasten zijn uitgerust met een alarm dat afgaat als de hoogte van de schuif niet optimaal is.

Vergeet niet de schuif altijd te sluiten wanneer de kast niet in gebruik is, om kostbare laboratoriumenergie en institutionele middelen te besparen.

Nu we hebben gezien hoe we in een zuurkast of laminaire kap moeten werken, bespreken we enkele verschillende typen kappen en de vele procedures die in elk type kap kunnen worden uitgevoerd.

Eén specifiek type kap is de zuurkast. Zoals de naam al suggererent, moet dit type apparaat worden gebruikt voor procedures die toxische dampen produceren of waarbij chemische reagentia worden gebruikt die toxische dampen afgeven. Zuurkasten beschermen de gebruiker, maar niet de experimentele omgeving; biologische monsters zijn in deze units dus NIET beschermd en steriliteit wordt NIET behouden.

Een zuurkast moet worden gebruikt voor fixatie, evenals voor weefselbewerking en histologische technieken. Deze procedures maken doorgaans gebruik van toxische en corrosieve chemicaliën.

Een ander type kap is de laminaire flow bench. Dit apparaat beschermt het experiment, maar niet noodzakelijkerwijs de gebruiker. Deze units kunnen een horizontale of verticale luchtstroom hebben en kunnen worden gebruikt voor BSL1-experimenten zonder bekend biologisch risico, zoals celkweek zonder risico op blootstelling aan pathogenen.

Vaak worden dissecties uitgevoerd in een laminaire flow bench wanneer de veiligheid van de gebruiker geen zorg is, maar de steriliteit van de weefselmonsters wel belangrijk is.

Biosafety cabinets of weefselkweekkappen beschermen zowel de gebruiker als het experiment. Zoals u wellicht al hebt geraad, wordt weefselkweek doorgaans uitgevoerd in de weefselkweekkap. Deze units handhaven de steriliteit van de experimentele werkruimte; alle lucht wordt gefilterd via high efficiency particulate air-filters, of HEPA-filters, zowel bij het binnenkomen als bij het verlaten van de kast.

Veel biomedische onderzoekslaboratoria hebben weefselkweekkappen die zijn uitgerust met een vacuümaspiratiesysteem voor het aspireren van weefselkweekmedia.

Er zijn verschillende typen biosafety cabinets en weefselkweekkappen; controleer de BSL-classificatie van uw kap voordat u aan een nieuw experiment begint.

U heeft zojuist de introductie van JoVE over het werken in de zuurkast/laminaire flowkast bekeken.

In deze video hebben we gesproken over het principe achter de werking van een kast, oftewel de laminaire stroming, de componenten van een typische kast, hoe u met het instrument moet werken en de verschillende typen kasten.

Bedankt voor het kijken, en vergeet niet het schuifvenster te sluiten!