Effecten van blootstelling van Formaldehyde aan een Rat Model van atopische Dermatitis veroorzaakt door neonatale capsaïcine behandeling

Het algemene doel van deze procedure is om atopische dermatitis-achtige symptomen op te wekken door middel van neonatale behandeling met capsaïcine, en om het effect van formaldehyde op deze atopische dermatitis-achtige symptomen te meten. Deze methode kan helpen bij het beantwoorden van een kernvraag met betrekking tot de pathofysiologie van atopische dermatitis binnen het dermatologische veld.

Het belangrijkste voordeel van deze techniek is de inductie van symptomen die lijken op atopische dermatitis en het opzetten van een belangrijk blootstellingssysteem met stijgende concentraties. Om een capsaïcine-oplossing van 5 mg/mL te bereiden, voegt u 1 mL Tween 80, 1 mL 100% ethanol en 50 mg capsaïcine toe aan een conische buis van 15 mL. Voeg vervolgens 8 mL normale zoutoplossing toe aan de conische buis.

Sluit de buis af en schud deze krachtig totdat er geen gescheiden lagen meer zichtbaar zijn. Het is cruciaal om de capsaïcine tussen 12 en 48 uur na de geboorte toe te dienen. Injecteer de capsaïcine-oplossing in het subcutane weefsel op de middellijn en de achterzijde van de nek van een pasgeboren Sprague Dawley-rat.

Plaats de neonaten in een zuurstofkamer tot de ademhaling weer normaal is, om ademstilstand als gevolg van de capsaïcine-injectie te voorkomen. Druk indien nodig op de borst van de neonaten om de ademhaling te stimuleren. Begin met het voorbereiden van plastic kamers die zijn uitgerust met een spiegel voor een volledig zichtveld en gaten zodat de ratten kunnen ademen.

Plaats de ratten in de plastic kamer en bedek het plafond van de kamer met een zwaar object om te voorkomen dat het deksel opent. Stel vervolgens een digitale videocamera in om gelijktijdig zowel de weerspiegelingen in de spiegel als de vooraanzichten van de ratten vast te leggen. Registreer daarna gedurende één uur het spontane gedrag van de ratten.

Speel de videoclips af en tel het aantal krabgedragingen, zoals die vertoond worden door de rat rechts en de rat in het midden. Om de laesies te scoren, moet de omvang en ernst van de dermatitis in de oren en andere delen van een geanestheseerde rat worden vastgesteld.

Definieer de eenheidsgrootte voor de omvang van huidlaesies als 0,25 vierkante centimeter. En de ernst van huidlaesies aan de hand van deze tabel. Bereid een bak van acrylglas voor met twee connectoren aan tegenovergestelde zijden.

Voor de circulatie van formaldegas dient de afvoeropening hoger te worden geplaatst dan de gasinlaatopening. Sluit slangen aan op beide connectoren. Leid de afvoerslang naar de afzuigkap of naar buiten het gebouw om het gas te emitteren.

Sluit de andere inlaatbuis aan op een medische zuurstofregelaar. Plaats een conventionele rattenkooi in de acrylglazen box. Plaats één week oude ratten in de kooi en sluit de acrylglazen box vervolgens zo dicht mogelijk af om gaslekkage te voorkomen.

Breng vershoudfolie aan om de kamer te omwikkelen en sluit de kamer af met een rubberen deksel voor een luchtdichte afsluiting. Voeg een 0,5% formaldehydelopping toe aan de bevochtigerfles die is aangesloten op de medische zuurstofregelaar. Vergeet niet dat werken met formaldehyde extreem gevaarlijk kan zijn.

En voorzorgsmaatregelen, zoals het dragen van maskers en handschoenen, moeten altijd worden genomen bij het uitvoeren van deze procedure. Zet vervolgens de regelaar aan en stel de stroomsnelheid in op vijf liter per minuut. Stel de ratten gedurende een periode van twee uur bloot aan formaldehydegas.

Hier worden representatieve foto's getoond van huidontsteking bij de met capsaïcine behandelde rat. De chronologische ontwikkeling van dermatitis bij de met capsaïcine behandelde ratten wordt hier getoond. Deze afbeelding laat de chronologische ontwikkeling van krabgedrag bij de met capsaïcine behandelde ratten zien.

Dit is een representatieve afbeelding van recidiverende huidlaesies bij 16 weken oude, met capsaïcine behandelde ratten. De serum-IgE-spiegels zijn significant verhoogd bij de met capsaïcine behandelde dieren. Ook een significante verhoging van de IL-4 mRNA-expressie wordt waargenomen bij de met capsaïcine behandelde dieren.

Hier wordt een significante verhoging van de IL-13 mRNA-expressie in met capsaïcine behandelde dieren getoond. Deze representatieve foto's tonen atopische dermatitis na de vijfde behandelsweek met 1,2 parts per million en 0,8 parts per million formaldehyde, vergeleken met een controlegroep die met lucht werd behandeld.

Blootstelling aan 1,2 parts per million formaldehyde, maar niet aan 0,8 parts per million formaldehyde, verergerde de pruritus in het met capsaïcine behandelde model voor atopische dermatitis significant. Vergelijkbare resultaten werden waargenomen bij de meting van de dermatitis. Verhoogde serum IgE-spiegels werden waargenomen in het met capsaïcine behandelde AD-ratmodel dat was blootgesteld aan 1,2 parts per million formaldehyde.

Door deze procedure te volgen kunnen andere materialen, zoals een glycoloplossing, worden gebruikt om aanvullende vragen te beantwoorden over de effecten van bepaalde stoffen op atopische dermatitis. Na deze ontwikkelingen baande deze techniek de weg voor onderzoekers in het veld van de dermatologie om de rol van omgevingsfactoren in de pathogenese van atopische dermatitis te onderzoeken.