Evaluatie van een Point-of-Care Testing Analyzer voor het meten van perifere bloed leukocyten
22 maart 2022
Een protocol voor het meten van perifere bloedleukocyten met behulp van een POCT-kaartgebaseerde leukocytenanalysator wordt hier gepresenteerd. Dezelfde bloedmonsters werden getest door twee geautomatiseerde hematologieanalysatoren om de consistentie en nauwkeurigheid van de resultaten te evalueren. De resultaten toonden aan dat de geëvalueerde analyzer een goede correlatie had met het referentiesysteem.
Een gedetailleerde beschrijving van de gestandaardiseerde werking van de analyzer in het protocol kan een persoon die de analyzer nog nooit heeft bediend helpen om de experimenten te voltooien die meestal belangrijk, nauwkeurig en met betrouwbare resultaten zijn. Het gebruik van de innovatieve technologie van Jove heeft voordelen zoals de beschikbaarheid van een detectiekit voor één persoon, afwezigheid van vloeibaar afval, snel zijn, vrij zijn voor routineonderhoud en gebruiksvriendelijke bediening. Men moet eerst het detectieprincipe van de analysator begrijpen en vervolgens bekend zijn met verschillende kritieke stappen in het protocol, zoals bloedafname, reagentia heffen enzovoort.
Om te beginnen start u de analyzer door de uit- of in-schakelaar aan de achterkant van de analyzer in te schakelen en ervoor te zorgen dat het indicatielampje van de analyzer brandt. Voer gebruikersnaam en wachtwoord in het inlogdialoogvenster in en klik op inloggen. Het systeem moet zelfcontrole uitvoeren en automatisch beginnen met initialiseren en de voorbeeldanalysepagina weergeven.
Start de testvoorbereiding door op het volgende monster te klikken, voer vervolgens het geslacht, de naam en andere klinische informatie correct in en selecteer de juiste referentiegroep. Klik later op ok om de informatie op te slaan. Scheur de dunne film van de bloedceldetectiemodule, druk op de knop voor het verlaten van het magazijn en plaats de bloedceldetectiemodule correct in het machinemagazijn, met de opening naar buiten gericht.
Prik de hemolytische reagens plafondfilm met de punt van een kwantitatieve pipet. Voor capillaire bloedafname desinfecteer je de linker ringvinger eenmaal met een wattenstaafje gedoopt in alcohol op één manier. Nadat de alcohol op natuurlijke wijze is uitgedroogd, gebruikt u een bloedprist om de huid van de linkerringvinger te doorboren.
Knijp de eerste druppel bloed er voorzichtig uit en veeg deze af met een wattenstaafje. Knijp voldoende bloed uit om een volledige waterdruppel te vormen en verzamel vijf microliter van het bloedmonster met behulp van de capillaire buis in de kwantitatieve pipet. Voor het mengen van reagens brengt u de kwantitatieve pipet in het hemolytische reagens en drukt u deze stevig aan om het bloedmonster uit de capillaire buis vrij te maken.
Meng het bloed in de capillaire buis en het hemolytische reagens door het 15 tot 20 keer met een constante snelheid ondersteboven te draaien totdat er geen rood bloed in de capillaire buis achterblijft. Start de monsteranalyse door het deksel te openen en de oplossing in de bloedceldetectiemodule te knijpen. Druk vervolgens op de knop Magazijn verlaten.
Nadat de bloedceldetectiemodule het magazijn is binnengekomen, drukt u op de telknop. Klik op de analyzer-interface tweemaal op de knop ok om te bevestigen dat de bloedceldetectiemodule is verwijderd. Klik op de analyzer-interface op de afdrukknop om de testresultaten af te drukken.
Om de analyzer uit te schakelen, klikt u op de afsluitknop op de analyzer-interface en selecteert u ja in het dialoogvenster dat op de interface verschijnt. Controleer of het systeem de afsluitvolgorde begint uit te voeren. Zet de uit- of inschakelaar aan de achterkant van het mainframe uit nadat de uitschakelvolgorde is voltooid.
De figuur toont de scatter plot en Spearman correlatie analyse van de geëvalueerde en referentiesystemen. Het aantal witte bloedcellen en het aantal granulocyten vertonen de sterkste correlatie. Terwijl het lymfocytenaantal de zwakste correlatie vertoont tussen het geëvalueerde en referentiesysteem.
Een Bland-Altman plot werd verkregen om de consistentie analyse te visualiseren. De witte bloedcelresultaten die door het geëvalueerde systeem worden gedetecteerd, komen overeen met het referentiesysteem. De gemiddelde waarden van de verschillen in de leukocytenindexen liggen boven nul, wat aangeeft dat de testresultaten van het geëvalueerde systeem iets hoger zijn dan die van het referentiesysteem.
Tijdens het experiment moeten we ons best doen om ervoor te zorgen dat het bloed dat we hebben verzameld precies 5 microliter is en dat de zijkant in de kamer volledig wordt opgelost door het hemolytische reagens.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Overzicht
Dit artikel presenteert een protocol voor het meten van leukocyten in perifeer bloed met behulp van een POCT kaartgebaseerde leukocytenanalyser. De nauwkeurigheid en consistentie van deze analyser werden geëvalueerd ten opzichte van twee geautomatiseerde hematologieanalysers.
Belangrijkste studiecomponenten
Wetenschapsgebied
- Hematologie
- Klinische diagnostiek
- Point-of-care-testen
Achtergrond
- Leukocytenanalyse is cruciaal voor het diagnosticeren van diverse medische aandoeningen.
- Geautomatiseerde analyzers bieden snelle en nauwkeurige resultaten.
- POCT-apparaten verbeteren de toegankelijkheid en het gemak van testen.
- Inzicht in de werking van deze apparaten is essentieel voor betrouwbare resultaten.
Doel van de studie
- Om de prestaties van een nieuwe leukocytenanalyzer te evalueren.
- Om resultaten te vergelijken met gevestigde geautomatiseerde hematologieanalyzers.
- Om een gedetailleerd protocol te bieden voor het effectief gebruiken van de analyzer.
Gebruikte methoden
- Gestandaardiseerde bediening van de leukocytenanalyzer.
- Afname en preparatie van bloedmonsters.
- Het testen van monsters op zowel de nieuwe analyzer als de referentieanalyzers.
- Statistische analyse om de correlatie en nauwkeurigheid te beoordelen.
Belangrijkste resultaten
- De nieuwe analyzer vertoonde een goede correlatie met referentiesystemen.
- De resultaten waren consistent over verschillende testmethoden heen.
- De operationele efficiëntie werd benadrukt als een belangrijk voordeel.
- Gebruiksvriendelijke kenmerken vergemakkelijkten het gebruik.
Conclusies
- De POCT-leukocytenanalyzer is een betrouwbaar instrument voor bloedanalyse.
- Het biedt aanzienlijke voordelen op het gebied van snelheid en gebruiksgemak.
- Verdere validatie in klinische settings wordt aanbevolen.
Veelgestelde vragen
Industriële Relevantie voor Directie
Point-of-care leukocytenanalysatoren vullen kritieke hiaten in de diagnostiek van de eerstelijnsgezondheidszorg door snelle en nauwkeurige differentiatie van witte bloedcellen mogelijk te maken zonder dat daarvoor gecentraliseerde laboratoriuminfrastructuur nodig is. Deze mogelijkheid ondersteunt vroege triage bij infecties en antimicrobial stewardship in omgevingen met beperkte middelen, wat een directe impact heeft op workflows voor de validatie van preklinische biomarkers, waarbij correlatieve hematologische veranderingen informatie verschaffen over de relevantie van ziektemodellen. De aangetoonde correlatie met referentie-hematologieanalysatoren vestigt het voorspellend vertrouwen voor translationele toepassingen in ontstekingsmodellen.
Strategische Toepassingen in Biopharma R&D
Vroege ontdekking & doelwitvalidatie
- Wetenschappelijke waarde: Maakt het mogelijk om leukocyten-gemedieerde inflammatoire pathways in ziektemodellen te onderzoeken door middel van kwantificeerbare verschuivingen in populaties van neutrofielen, lymfocyten en intermediaire cellen.
- Operationele waarde: Biedt reproduceerbare hematologische read-outs voor targetvalidatiestudies waarbij infiltratie van immuuncellen dient als een farmacodynamische biomarker.
Screening & Assayontwikkeling
- Wetenschappelijke waarde: Genereert gestandaardiseerde data voor leukocyten-differentiatie, essentieel voor het screenen van de assay-gereedheid van immunomodulerende verbindingen in systemen met volbloed.
- Operationele waarde: Elimineert vloeibaar afval en complexe monstervoorbereiding, waardoor compatibiliteit met high-throughput screening wordt mogelijk gemaakt met minimale technische expertise.
Translationeel & Preklinisch Onderzoek
- Wetenschappelijke waarde: Ondersteunt de validatie van ziekterelevante systemen door perifere leukocyten-dynamiek te correleren met weefselspecifieke inflammatoire eindpunten in preklinische modellen.
- Operationele waarde: Faciliteert longitudinale monitoring in preklinische studies door minimale vereisten aan bloedvolume (capillair monster van 5 µL) en een snelle generatie van resultaten.
Integratie van Pipeline & Workflow
De analyzer fungeert als een instrument voor continuïteit van ontdekking naar preklinische fase, waarbij leukocytenprofilering wordt gepositioneerd tussen het vroege testen van doelwit-hypotheses en de fasen van lead-optimalisatie waarin immuunmodulatie een belangrijk werkingsmechanisme vormt.
- Discovery Biology: Ondersteunt mechanistische risicovermindering door immuuncelresponsen op pathwaymodulatoren te kwantificeren, waardoor het aantal fout-positieven in targetvalidatiecascades wordt verminderd.
- Screening: Levert kwantitatieve, gecorreleerde leukocytengegevens (WBC, granulocyten, lymfocyten) die vergelijking van compoundeffecten tussen behandelgroepen mogelijk maken.
- Analytics: Biedt met Spearman-correlatie gevalideerde metingen (rs = 0,972 voor WBC/granulocyten, rs = 0,851 voor lymfocyten), wat een betrouwbare intersystemische vergelijkbaarheid garandeert voor datagestuurde besluitvorming.
- Translationeel onderzoek: Verbindt leukocytenprofilering in de ontdekkingsfase met preklinische continuïteit door consistentie met referentiehematologiesystemen, bevestigd via Bland-Altman.
- Enterprise Reuse: Vormt een inzetbare capaciteit voor meerdere therapeutische gebieden waar immuunmonitoring vereist is, waardoor redundante validatie-inspanningen worden verminderd.
Operationele & Bedrijfsimpact
- Wetenschappelijke waarde: Voorspellende zekerheid over het leukocyten-gemedieerde werkingsmechanisme, vermindering van mechanistische ambiguïteit bij het screenen van immunomodulatoren.
- Operationele waarde: Standaardisatie door onderhoudsvrije werking, reproduceerbaarheid via overeenstemmingsgrenzen van 95%, en schaalbaarheid door detectiekits voor één persoon.
- Strategische waarde: Betere go/no-go-beslissingen in immunomodulator-programma's, kapitaalefficiëntie door het vermijden van afhankelijkheden van kernlaboratoria, en verminderd biologisch risico in een laat stadium door vroege immuunprofilering.
- Impact op portfolio: Risico-gecorrigeerde prioritering van verbindingen op basis van leukocytenresponsprofielen, waardoor beslissingen over verdere ontwikkeling kunnen worden genomen op basis van transleerbare hematologische biomarkers.
Overwegingen voor implementatie
- Basiskenmerken van de hematologie zijn vereist voor een accurate interpretatie van de leukocytendifferentiatie (neutrofielen, lymfocyten, intermediaire cellen).
- Training in capillaire bloedafname en vaardigheid met kwantitatieve pipetten zijn noodzakelijk voor een nauwkeurig monstervolume van 5 µL.
- Standaardisatie tussen teams bij de selectie van de referentiegroep (leeftijds- en genderspecifieke normen) is vereist voor een consistente longitudinale monitoring.
- Validatie van de adaptatie is noodzakelijk bij uitbreiding van menselijk volbloed naar preklinische modelsystemen (bijv. muis, niet-menselijke primaten).
- Praktische beperking: Een lagere correlatie voor lymfocyten (rs = 0,851) maakt orthogonale validatie noodzakelijk voor immunotherapieën die gericht zijn op lymfocyten.
