Bepaling van de procoagulerende activiteit van extracellulaire blaasjes (EV) met behulp van EV-geactiveerde stollingstijd (EV-ACT)
4 augustus 2023
Dit protocol onderzoekt het gebruik van extracellulair vesikel (EV)-rijk plasma als indicator van het stollingsvermogen van EV. EV-rijk plasma wordt verkregen door een proces van differentiële centrifugatie en daaropvolgende recalcificatie.
Onze primaire focus ligt op stollingsstoornissen bij patiënten die een hersentrauma hebben opgelopen. In deze studie proberen we veranderingen in de stollingsfunctie te volgen met extracellulaire vesicale activiteit stollingstijd. Onze teams besteden aandacht aan het onderzoek naar hersenletsel.
En bij hersenletsel zijn ze een ernstige aandoening die we de hypergecoaguleerde toestand noemen. Het is erg moeilijk te meten. En we vinden in het bloed van de patiënt een aantal microblaasjes die we extracellulaire blaasjes noemen, waaronder het apoptoselichaam, het microblaasje en het exosoom.
En ze verschillen in het progecoaguleerde vermogen. We moeten dus een methode vinden om het vermogen te meten. En met deze methode kunnen we snel acuut het verschil van de extracellulaire blaasjes vinden.
Dat is heel belangrijk. Afhankelijk van deze maatregel kunnen we veel dingen doen. We moeten ervoor zorgen dat het bij de TPI-muizen en de klinische patiënt, vooral in de perifere circulatie, enige embolisatie kost.
Dat is zeer, zeer ernstig in de klinische. Ons protocol bood een aanzienlijk voordeel ten opzichte van andere technieken vanwege de eenvoud, kosteneffectiviteit en snelheid. Het maakt het mogelijk om een bloedstollingstest aan het bed uit te voeren, waardoor uitgebreide laboratoriumverwerking niet meer nodig is.
Ons onderzoek heeft een nieuwe methode ontwikkeld die de hypergecoaguleerde toestanden van het perifere bloed kan meten. Het kan niet alleen worden gebruikt bij de TPI, we kunnen ook worden gebruikt bij andere ziekten zoals sepsis, pre-eclampsie, tumor en hematologische aandoeningen. In de toekomst zijn we van plan om de mogelijkheid te onderzoeken bij het scannen op klinische hyper, een aandoening die het risico op bloedstolsels verhoogt.
Bekijk het volledige transcript en krijg toegang tot duizenden wetenschappelijke video's
Overzicht
Deze studie onderzoekt stollingsstoornissen bij patiënten met hersentrauma door de stollingsfunctie te monitoren via de activiteit van extracellulaire blaasjes (EV's). Het onderzoek richt zich op de hypercoagulatietoestand, die moeilijk te meten is, en heeft als doel een methode te ontwikkelen voor het beoordelen van het pro-coagulatieve vermogen van EV's in bloedmonsters.
Belangrijkste onderdelen van de studie
Wetenschappelijk vakgebied
- Neurowetenschappen
- Stollingsstoornissen
- Extracellulaire vesicles
Achtergrond
- Stollingsstoornissen komen veel voor bij patiënten met hersentrauma.
- Extracellulaire blaasjes (EV's) spelen een rol bij stollingsprocessen.
- Het meten van de hypercoagulabele toestand is complex.
- Verschillende typen EV's hebben uiteenlopende pro-coagulante eigenschappen.
Doel van de studie
- Om veranderingen in de stollingsfunctie gerelateerd aan EV-activiteit te monitoren.
- Om een methode te ontwikkelen voor het meten van het stollingsvermogen van EV's.
- Om het begrip van stolling bij hersenletselgevallen te vergroten.
Gebruikte methoden
- Verzamelen van EV-rijk plasma via differentiële centrifugatie.
- Herkalken van plasmaproeven voor analyse.
- Beoordeling van de stollingsfunctie aan de hand van EV-activiteit.
- Monitoring van microvesikels, inclusief apoptose-lichaampjes en exosomen.
Belangrijkste Resultaten
- Verschillen in de pro-coagulerende vermogens van diverse EV's zijn geïdentificeerd.
- Een snelle methode om de coagulatiestatus te beoordelen is ontwikkeld.
- Het belang van EV's bij het begrijpen van coagulatiestoornissen is aangetoond.
- Inzichten zijn verschaft in de relatie tussen hersenletsel en coagulatie.
Conclusies
- De studie biedt een nieuwe benadering om de stolling bij patiënten met hersentrauma te meten.
- Extracellulaire blaasjes zijn cruciale indicatoren voor het stollingsvermogen.
- Verder onderzoek is nodig om de klinische implicaties van deze bevindingen te verkennen.
Veelgestelde vragen
Relevantie voor de Industrie
Het kwantificeren van de procoagulante activiteit van extracellulaire blaasjes (EV's) vult een kritiek gat in de vroege detectie en risicobeoordeling van hypercoagulabele toestanden in diverse ziektecontexten. De EV-geactiveerde stollingstijd-assay (EV-ACT) maakt een snelle evaluatie aan het bed van de EV-gestuurde coagulatie mogelijk, wat bijdraagt aan mechanistische risicoreductie en targetvalidatie in translationeel onderzoek. Deze mogelijkheid vergroot het voorspellende vertrouwen op cruciale beslismomenten in de ontdekkingsfase en de preklinische pijplijn.
Strategische Toepassingen in Biopharma R&D
Vroege ontdekking & target-validatie
- Maakt onderzoek mogelijk naar EV-gemedieerde stollingsroutes die relevant zijn voor ziektemechanismen.
- Ondersteunt biologische risicoreductie door de functionele procoagulante activiteit van EV's te kwantificeren.
- Faciliteert targetvalidatie voor interventies die de afgifte of activiteit van EV's moduleren.
Screening & Assayontwikkeling
- Biedt een gestandaardiseerde, kwantitatieve analyse voor het beoordelen van de procoagulante functie van EV's in plasmaproeven.
- Levert reproduceerbare visco-elasticiteitsmetingen in realtime die geschikt zijn voor de optimalisatie van de analyse.
- Maakt snelle screening van monsters uit diverse ziektemodellen mogelijk om het risico op hypercoagulabiliteit te bepalen.
Translationeel & Preklinisch Onderzoek
- Sluit aan bij ziekterelateerde modellen door EV-gestuurde hypercoagulabiliteit te detecteren in monsters van pre-eclampsie, trauma en kanker.
- Ondersteunt de continuïteit van mechanistische ontdekking naar preklinische validatie van coagulatiebiomarkers.
- Informeert risico-gecorrigeerde beslissingen voor de verdere ontwikkeling van kandidaat-therapeutica die zich richten op EV-routes.
Integratie van Pipeline & Workflow
De EV-ACT-assay integreert in het continuüm van ontdekking naar preklinisch onderzoek door functionele beoordeling van EV's mogelijk te maken in zowel gezonde als zieke toestanden.
- Discovery Biology: Kwantificeert EV-gemedieerde procoagulante activiteit om mechanistische hypothesen te verduidelijken.
- Screening: Biedt een snelle, reproduceerbare uitlezing voor het evalueren van de hypercoagulabiliteit van monsters.
- Analytics: Genereert kwantitatieve stollings Tijden voor vergelijking tussen condities en statistische analyse.
- Translationeel onderzoek: Slaat een brug tussen ontdekkingsbevindingen en preklinische modellen met ziekterelateerde EV-metingen.
- Enterprise Reuse: Biedt een schaalbaar, gestandaardiseerd platform voor doorlopende EV-functionele studies over verschillende indicaties heen.
Operationele impact en impact op de organisatie
- Wetenschappelijke waarde: Verhoogt het voorspellende vertrouwen in EV-gerelateerde stollingsmechanismen en doelvalidatie.
- Operationele waarde: Biedt een snelle, gestandaardiseerde en reproduceerbare testmogelijkheid aan het bed van de patiënt.
- Strategische waarde: Verbetert go/no-go-beslissingen door vroeg in de ontwikkeling bruikbare gegevens over het stollingsrisico te verschaffen.
- Impact op de portfolio: Maakt een risico-gecorrigeerde prioritering mogelijk van programma's die gericht zijn op EV-gemedieerde pathologieën.
Overwegingen bij de implementatie
- Vereist expertise in de biologie van stolling en technieken voor de isolatie van EV's.
- Toegang tot visco-elasticiteitsanalyzers en gestandaardiseerde protocollen voor plasmapreparatie is noodzakelijk.
- Afstemming tussen teams over assayparameters en standaarden voor data-interpretatie is vereist.
- Aanpassing voor verschillende ziektemodellen of monstertypes kan noodzakelijk zijn.
- Betrouwbare resultaten zijn afhankelijk van de kwaliteit van de EV-verrijkings- en verwijderingsprocedures.
