12 lipca 2024
Opisujemy mysi model pooperacyjnej niedrożności jelit generowany przez manipulację jelitową. Funkcję pasażu pokarmowego, zmiany patologiczne i aktywację komórek odpornościowych oceniano 24 godziny po zabiegu.
Przedmiotem naszego badania jest odporność jelitowa. Staramy się zilustrować patofizjologię i mechanizm powstawania POI w celu opracowania nowych terapii. Jednym z wyzwań jest ustanowienie spójnych i powtarzalnych modeli eksperymentalnych POI u myszy.
Obejmuje to kontrolowanie zmiennych, takich jak techniki chirurgiczne i ocena protokołów opieki nad zwierzętami w celu zminimalizowania zmienności między grupami eksperymentalnymi. Kolejnym wyzwaniem jest zilustrowanie mechanizmów patofizjologicznych leżących u podstaw POI u myszy. Nasz protokół ma na celu ustanowienie powtarzalnego modelu z minimalną zmiennością do badania patofizjologii POI i oceny nowych strategii przeciwzapalnych.
Naszym celem jest wypełnienie luki między wynikami przedklinicznymi w modelach mysich a tym, że mają one znaczenie kliniczne u ludzi, zwiększając w ten sposób potencjał wyników eksperymentalnych do przełożenia się na skuteczne metody leczenia POI. Aby rozpocząć, umieść znieczuloną mysz na platformie chirurgicznej. Użyj elektrycznej golarki do włosów, aby usunąć włosy z brzucha.
Następnie użyj wacika zwilżonego solą fizjologiczną, aby zetrzeć wszystkie luźne włosy na brzuchu. Całkowicie wyprostuj kończyny, aby odsłonić brzuch i ustaw głowę myszy tak, aby utrzymać czyste drogi oddechowe. Następnie za pomocą wacika nasączonego 75% alkoholem należy dwukrotnie zdezynfekować skórę pola operacyjnego.
Następnie użyj suchej, sterylnej gazy medycznej, aby usunąć nadmiar alkoholu z brzucha. Następnie wykonaj nacięcie przez skórę. Za pomocą pęsety unieś mięsień prosty brzucha na środku brzucha i wykonaj małe nacięcie wzdłuż linii środkowej.
Upewnij się, że górny brzeg nacięcia znajduje się od sześciu do ośmiu milimetrów od wyrostka mieczykowatego mostka, a dolny brzeg znajduje się od sześciu do ośmiu milimetrów od zewnętrznych narządów płciowych. Następnie umieść gazę wstępnie zwilżoną solą fizjologiczną po obu stronach nacięcia brzucha. Przymocuj gazę za pomocą kleszczy hemostatycznych na górnej i dolnej krawędzi nacięcia, aby ją odsłonić.
Po prawidłowym zamocowaniu gazy delikatnie dociśnij do obu stron ściany brzucha dwoma wacikami zwilżonymi solą fizjologiczną. Następnie wyciśnij niewielką ilość rurki jelitowej przez nacięcie i umieść ją na gazie, aby ją odsłonić. Zlokalizuj jelito ślepe.
I wyjmij jelito wacikami zwilżonymi solą fizjologiczną do dwóch centymetrów przed żołądkiem, aby uniknąć dotykania trzustki. Przedłuż jelito od bliższego końca więzadła trzustkowo-dwudniowego do dystalnego końca okolicy krętniczo-kątniczej. Następnie wywieraj stały nacisk wzdłuż całego jelita cienkiego od bliższego do dystalnego przez pięć minut, aż pojawią się małe krwawiące plamki.
Następnie użyj wstępnie zwilżonych bawełnianych wacików, aby ostrożnie umieścić całe jelito cienkie z powrotem w jamie brzusznej. Następnie delikatnie masuj brzuch po gazie i ścianie brzucha przez trzy do pięciu sekund, aby zapewnić normalne ułożenie jelit i zapobiec niedrożności lub skrętowi pooperacyjnemu. Następnie wstrzyknij 100 mikrolitrów soli fizjologicznej do jamy brzusznej, aby zastąpić utracone płyny i nasmarować tkankę brzuszną.
Następnie zdejmij gazę i wykonaj dwuwarstwowe zamknięcie w miejscu nacięcia brzucha. Po zszyciu delikatnie przetrzyj obszar w pobliżu nacięcia brzucha suchą, sterylną gazą medyczną, aby był suchy i czysty z krwi, płynu tkankowego lub zwykłej soli fizjologicznej. Nałóż niewielką ilość medycznego kleju do nacięć na nacięcie i wokół niego, aby uniknąć pękania po operacji.
Po wyschnięciu kleju umieść mysz na podgrzewanym kocu w temperaturze 37.5 stopni Celsjusza i monitoruj mysz, aż w pełni się zregeneruje.
Niniejsze badanie przedstawia mysi model pozabiegowego porażenia jelit (POI) wywołanego poprzez manipulację jelitami. Badania koncentrują się na zrozumieniu odporności jelit oraz patofizjologii POI w celu opracowania nowych metod terapeutycznych.
Powtarzalne mysie modele poreoperacyjnego porażenia jelit (POI) są niezbędne do minimalizacji ryzyka we wczesnej fazie odkrywania przeciwzapalnych i prokinetycznych środków terapeutycznych ukierunkowanych na dysfunkcje przewodu pokarmowego po operacji. Model ten umożliwia analizę mechanistyczną szlaków neuronalnych, nabłonkowych i immunologicznych zaangażowanych w POI, co zwiększa pewność prognostyczną w kontekście badań translacyjnych. Spójne wyniki eksperymentalne ułatwiają selekcję portfela badań oraz priorytetyzację potencjalnych interwencji wspomagających regenerację przewodu pokarmowego.
Ten mysi model POI integruje się z kontinuum od odkrycia do badań przedklinicznych, wspierając walidację celu, identyfikację związku wiodącego oraz badania translacyjne nad lekami stosowanymi w gastroenterologii.