18 kwietnia 2025
Tutaj prezentujemy protokół do stworzenia mysiego modelu kardiomiopatii cukrzycowej oraz mysie urządzenie do mocowania elektroakupunktury do stosowania elektroakupunktury u myszy, które może łagodniej utrwalać myszy podczas leczenia.
Zakresem naszych badań jest elektroakupunktura w leczeniu kardiomiopatii cukrzycowej. Przedstawiamy poziomowe urządzenie do mocowania elektroakupunktury dla myszy. Nasze urządzenie do elektroakupunktury u myszy jest łatwiejsze do zamocowania u myszy, bezpieczniejsze i nie krzyżuje się potajemnie z myszami podczas leczenia elektroakupunkturą w porównaniu z innymi technologiami. Nasze laboratorium będzie nadal koncentrować się na elektroakupunkturze w leczeniu chorób metabolicznych, takich jak otyłość, cukrzyca, kardiomiopatia cukrzycowa i tak dalej.
[Narrator] Na początek sprawdź integralność pustej rurki z tworzywa sztucznego w zmontowanym urządzeniu do mocowania elektropunkturowego. Zamontuj zaczepy zamykające. Przesuń zaczepy zamykające wzdłuż korpusu rury, gdy wsuwają się w rowki, upewniając się, że długość mocowania można dostosować do rozmiaru myszy. Teraz włącz instrument do terapii elektroakupunkturą i upewnij się, że jest sprawny. Naciśnij każdy przycisk raz, aby sprawdzić jego działanie. Umieść przyrząd do terapii elektroakupunkturą obok pustych plastikowych rurek do przeprowadzania zabiegów elektroakupunktury na myszach. Następnie prawą ręką chwyć mysz za ogon i wyjmij ją z klatki. Umieść mysz na powierzchni klatki i delikatnie pociągnij jej ogon na zewnątrz. Unieruchom mysz lewą ręką i odwróć ją, aby odsłonić brzuch. Wstrzyknąć mysz dootrzewnowo prawą ręką za pomocą jednomililitrowej strzykawki z odpowiednią ilością 1% roztworu streptozotocyny. Aby wykonać akupunkturę, najpierw wybierz punkty akupunkturowe zgodnie z teorią akupunkturów Biao Ben, w tym obustronne PC6 i ST36. Teraz chwyć mysz, uszczypnij jej ogon i umieść ją na powierzchni klatki. Ustaw wylot akrylowej pustej plastikowej rurki pod kątem 30 stopni do płaszczyzny poziomej, upewniając się, że mały otwór pośrodku jest skierowany w stronę ziemi, a wylot rurki jest wyrównany z głową myszy. Powoli obracaj głowę myszy do tuby, wykonując dobrowolne ruchy i lekkie naciśnięcie. Delikatnie poklep pośladki myszy, aby zachęcić ją do całkowitego wejścia do tuby. Wyreguluj zaczepy zamykające, a następnie wyjmij ogon myszy z rowka. Dokręć nakrętkę i użyj zaczepów zamykających na górnym i dolnym końcu, aby ograniczyć ruch myszy. Użyj pęsety, aby delikatnie wyciągnąć cztery kończyny myszy przez małe otwory po obu stronach rurki. Po odsłonięciu kończyn delikatnie przymocuj je na zewnątrz korpusu rurki. Zlokalizuj punkty akupunkturowe PC6 i ST36, dotykając kończyn myszy środkowym palcem prawej ręki. Następnie delikatnie nakłuj skórę myszy sterylną końcówką igły. Szybko wprowadzić igłę ukośnie na głębokość około trzech milimetrów. Następnie zdejmij prawą rękę. Teraz włącz maszynę do terapii elektroakupunkturą i dostosuj ją do przerywanej fali o częstotliwości jednego herca. Przymocuj klips pod napięciem urządzenia do terapii elektroakupunkturowej do uchwytu igły, upewniając się, że na igłę przypada jeden klips. Następnie wyreguluj prąd, z klipsem przymocowanym do jednego miliampera. Po 15 minutach obserwuj stan myszy podczas wstępnego leczenia elektroakupunkturą. Tkanka mięśnia sercowego w grupie kontrolnej wykazywała nienaruszoną strukturę z regularnie ułożonymi kardiomiocytami i nie zaobserwowano widocznych zmian chorobowych. W grupie modelowej komórki mięśnia sercowego były ułożone nieregularnie, przy czym niektóre komórki wykazywały uszkodzenie i rozpad wraz ze znacznym naciekiem komórek zapalnych w przestrzeni śródmiąższowej. W grupie przed leczeniem struktura tkanki mięśnia sercowego była wyraźna, z niewielką liczbą uszkodzonych i rozdrobnionych komórek, ale bez innych istotnych zmian. Wskaźniki czynnościowe serca z echokardiografii wykazały, że średnica rozkurczowa końca lewej komory i średnica skurczowa końca lewej komory były istotnie zwiększone w grupie modelowej, podczas gdy frakcja wyrzutowa lewej komory i skrócenie frakcyjne lewej komory były istotnie zmniejszone. W grupie przed leczeniem średnica rozkurczowa końca lewej komory i średnica skurczowa końca lewej komory były znacznie zmniejszone, podczas gdy frakcja wyrzutowa lewej komory i frakcyjne skrócenie lewej komory były znacznie zwiększone w porównaniu z grupą modelową. Poziom glukozy we krwi był znacznie podwyższony w grupie modelowej w porównaniu z grupą kontrolną w 36. dniu. Po leczeniu elektroakupunkturą poziom glukozy we krwi w grupie przed leczeniem był znacznie obniżony do 49 dnia w porównaniu z grupą modelową.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Niniejsze badanie przedstawia protokół ustanowienia mysiego modelu kardiomiopatii cukrzycowej oraz wprowadza nowatorskie urządzenie do fiksacji podczas elektroakupunktury zaprojektowane dla myszy. Urządzenie to zwiększa bezpieczeństwo i łatwość obsługi podczas zabiegów elektroakupunktury.
Niezawodna stabilizacja i ilościowe monitorowanie są kluczowe dla przedklinicznej oceny interwencji z zastosowaniem elektroakupunktury w modelach chorób metabolicznych. Opisane urządzenie do unieruchamiania myszy umożliwia standaryzowane i powtarzalne przygotowanie do zabiegów elektroakupunktury w modelach kardiomiopatii cukrzycowej, co wspiera rzetelną ocenę punktów końcowych w zakresie funkcji serca i parametrów metabolicznych. Możliwość ta zwiększa pewność prognostyczną w badaniach wczesnych hipotez terapeutycznych i dostarcza danych dla badań translacyjnych nad interwencjami niefarmakologicznymi.
Niniejsze urządzenie do fiksacji oraz powiązany z nim schemat pracy stanowią element wczesnej fazy odkryć i kontinuum badań przedklinicznych w zakresie chorób metabolicznych i układu sercowo-naczyniowego.