Síntese e Purificação de Iodoaziridines Envolvendo Quantitative Seleção do Optimal fase estacionária para cromatografia

O objetivo geral deste procedimento é preparar e purificar um iodo final. Isso é feito primeiro gerando diito metil lítio por desprotonação de diito metano em baixa temperatura e reagindo com um imune. O segundo passo é aquecer rapidamente a mistura de reação para promover a ciclização do intermediário de iodeto de dipara o produto desejado de iotouridina.

Em seguida, a estabilidade do produto de ioto uridina a várias fases estacionárias usadas para cromatografia é avaliada para determinar a mais apropriada para purificação. A etapa final é purificar o iodo e realizar a análise de RMN de prótons. Em última análise, esta tela de fases estacionárias para cromatografia é usada para mostrar que o Illumina básico modificado para a atividade quatro é o mais apropriado para a purificação da ODO odina.

Tivemos a ideia desse método pela primeira vez quando descobrimos que os novos produtos de iodo IDO eram instáveis à cromatografia de sílica gel e precisávamos de uma purificação alternativa. A partir daqui, projetamos um procedimento para avaliar a estabilidade do IO odine para organizar fases estacionárias para cromatografia, que também pode ser aplicado a outros compostos potencialmente sensíveis. Demonstrando este procedimento estará Tom e Dom são ambos estudantes de doutorado em meu grupo de pesquisa.

Primeiro a secar na chama, um balão de fundo redondo de 100 mililitros contendo uma barra de agitação e equipado com um septo sob uma corrente de argona. Depois de permitir que o frasco esfrie a temperatura ambiente, adicione 5,7 mililitros de tetraedro anidro e 2,7 mililitros de éter etílico anidro via seringa e 315 microlitros de hexa etil dilano recém-destilado por meio de uma microseringa. Coloque o frasco em um fazedor de tamanho adequado que permita que ele seja bem submerso.

Depois que a agitação for iniciada, adicione gelo seco e acetona ao fazedor para resfriar a solução a 78 graus Celsius negativos. Em seguida, cubra o fazedor com papel alumínio para minimizar a exposição do vaso de reação. Para acender em seguida, adicione 0,6 mililitros de lítio 2,5 molar e butílico em hexanos gota a gota via seringa por dois a três minutos.

Depois de deixar a mistura mexer a menos 78 graus Celsius por 30 minutos. Para formar a solução de hexa etil silano de lítio, adicione um mililitro de hidro ferran de terah anidro a um frasco de fundo redondo de 10 mililitros seco por meio de uma seringa. Em seguida, adicione 135 microlitros de di-ITOM metano por meio de uma microseringa e gire suavemente o frasco para garantir que a solução esteja bem misturada.

Em seguida, adicione a solução de metano di ITOM gota a gota por dois minutos à solução de hexa etil dilano de lítio a 78 graus Celsius negativos, deixando a solução agitar por 20 minutos. Pesar 135 miligramas de amina noutro balão de fundo redondo de 10 ml seco com chama e dissolver-se em dois mililitros de tetrahidroferran anidro. Após os 20 minutos de tempo de desprotonação, adicione a solução imune gota a gota à solução de metil lítio de diito Mais de cinco minutos a 78 graus Celsius negativos.

Imediatamente após a conclusão da edição gota a gota, levante o recipiente de reação para fora do banho de gelo seco. Recupere o balão com papel alumínio e transfira-o para um banho de água gelada a zero graus Celsius. Agite a solução por 15 minutos a zero graus Celsius.

Em seguida, extinguir a reação adicionando 30 mililitros de solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. Transfira a mistura para um funil de decantação e adicione 30 mililitros de diclorometano. Agitar a mistura, ventilar o funil e retirar a camada orgânica inferior.

Depois de repetir a extração duas vezes, adicione sulfato de sódio às camadas orgânicas combinadas para remover qualquer água presente na solução. Em seguida, filtrar o sulfato de sódio por filtração a vácuo, utilizando um funil de vidro com tampão de algodão, recolhendo o filtrado num balão de fundo redondo de 250 ml, retirar o solvente sob pressão reduzida num evaporador rotativo. Para fornecer uma amostra impura do produto de uridina ITO desejado.

Adicionar 1 3 5 TRIMETH oxibenzeno como padrão interno ao dino bruto e dissolver a amostra de dilotão bruto em diclorometano. Garantir que isso seja totalmente dissolvido. Retirar uma alíquota desta mistura e retirar o solvente sob pressão reduzida.

Quando terminar, analise a amostra por espectroscopia de RMN de prótons. Após a análise de RMN, abra o espectro de RMN de prótons registrado usando um software de processamento de RMN padrão, como mast nova. Clique com o botão direito do mouse no espectro e escolha integração.

Em seguida, escolha manual para fornecer a ferramenta de integração. Clique e arraste para cobrir a largura dos picos em 6,08 PP m e 4,87 PP M para integrar os sinais do padrão interno e do sinal aine CHI, respectivamente. Clique com o botão direito do mouse na integral para o pico em 6,08 PP m, selecione editar integral e altere o valor normalizado para 3,0.

Em seguida, use o valor integral atualizado para o sinal de iodo CHI para determinar o rendimento do iodo I OTO. Uma vez concluída a análise de RMN, misturar 25 gramas das seguintes fases estacionárias com 50 mililitros de hexano acetato de 5% etilo em seis frascos cónicos separados de 250 mililitros contendo barras de agitação em balão cónico. Preparar uma solução de 50 mililitros, um heano de acetato de etilo a 5% para ser utilizado como controlo.

Em seguida, mexa as pastas em uma placa de agitação magnética. Adicionar duas alíquotas de mililitros da solução-padrão interna I OTO Azarin a cada um dos balões cónicos à temperatura ambiente definida. Em seguida, mexa as misturas de pasta por 30 minutos.

Após 30 minutos, filtrar cada uma das misturas de chorume sob vácuo com uma ampola centrada, recolhendo cada filtrado num balão de fundo redondo de 250 ml. Lave o resíduo no funil centralizado duas vezes com 30 mililitros de di clorometano. Remova o solvente das amostras resultantes usando um evaporador rotativo.

Em seguida, analise as amostras por espectroscopia de RMN de prótons para calcular a quantidade de iodo recuperada em cada caso. Conforme descrito anteriormente, registre os rendimentos no caderno de laboratório. Comparar os rendimentos de I OTO Aine obtidos em cada fase estacionária ensaiada com os obtidos anteriormente para determinar a amostra que apresenta o rendimento mais elevado.

Em seguida, repita a síntese descrita anteriormente para gerar a mistura bruta de iodo IO para gerar a atividade básica do Illumina. Quatro, adicione 100 gramas de atividade básica de Illumina, um a um frasco de fundo redondo de 500 mililitros e, em seguida, adicione 10 mililitros de água ao frasco. Depois de colocar uma rolha de vidro no balão, agite-o vigorosamente até que não haja grumos, indicando uma distribuição uniforme da água por todo o Illumina.

Uma vez que o Illumina tenha arrefecido à temperatura ambiente, purificar o iodo IO bruto por cromatografia em coluna utilizando a actividade básica quatro do Illumina. Como fase estacionária, eluir com hexano graduado para taxano de acetato de 5% YL. Combinar o produto que contém as fracções num balão de fundo redondo e remover o solvente utilizando um evaporador rotativo para obter o iodo puro.

Antes da purificação, um rendimento de 59% de iodo I oto a foi calculado por RMN de prótons. No entanto, este iodo foi difícil de purificar e sofreu uma decomposição significativa na purificação de sílica em Illumina básico. A atividade quatro proporcionou o produto com rendimento de 48%.

A análise de RMN de prótons deu uma série de rendimentos para as fases estacionárias em relação ao padrão interno, a atividade básica do Illumina quatro proporcionou o maior rendimento de 53%, que é o mais próximo do rendimento de RMN. Portanto, a atividade básica Illumina quatro foi escolhida para o final. Toal iota era purificação redimida por IR.

Uma ampla seleção de AINEs ITO pode ser acessada em alto rendimento. Tanto o álcool al quanto as aminas aromáticas e toais são compatíveis com a reação, incluindo turt e ortoterapia histericamente exigentes. Para exemplos, a reação é proposta para ocorrer por desprotonação, seguida de edição nucleofílica.

Dar ao amino gem o iodeto de diodeto intermediário o aquecimento subsequente induz uma ciclização seletiva estéreo altamente DIA, favorecendo o iodo cis. Devido a interações estéricas sutis no estado de transição de ciclização durante a otimização da reação, o controle de temperatura e o tempo foram essenciais para o resultado da reação. Extinguir a reação sem aquecimento proporcionou o iodo IO final e o iodeto de amge di.

No entanto, os produtos sofrem degradação nas condições de reação, o que é evitado pelo aquecimento da reação e redução dos tempos de reação. Depois de assistir a este vídeo, você deve ter uma boa compreensão de como sintetizar o produto IO iridium e avaliar sua estabilidade em uma ampla gama de fases estacionárias para purificação por cromatografia. Não se esqueça de que trabalhar com lítio mbu pode ser extremamente perigoso e precauções como trabalhar sob uma atmosfera de nozes e têmpera segura o acesso.

O reagente deve sempre ser tomado durante a execução deste procedimento.