Técnica de fixação interna mini-invasiva para estudo de contratura de flexão de joelho induzida por imobilização em ratos

Esta técnica simples e eficaz do modelo de separação músculo-gap combina as formas de método de mini-invasão é a melhor fixação interna em nosso modelo de contração articular do joelho de rato. A principal vantagem dessa técnica é que seu processo é reprodutível e a alternativa minimamente invasiva para induzir a contratura da articulação do joelho em animais. Demonstrando o procedimento estarão Shihai Jiang e Fei Zhang, estudante de pós-graduação do meu laboratório.

Depois de confirmar a falta de resposta ao dedo do pé- beliscar, raspe o corpo inferior do rato anestesiado, incluindo os dois membros traseiros. Desinfete a pele exposta com tintura de iodo povidone duas vezes e 75% de etanol três vezes. Aplique pomada nos olhos do animal e coloque o rato lateralmente sob uma cortina cirúrgica com um membro traseiro e quadril expostos.

Desinfete a área cirúrgica com iodo povidone adicional. Na extremidade distal do aquecedor maior do fêmur, desenhe uma linha ao longo da superfície corporal projeção da lacuna muscular entre a grande lateralidade e o bíceps femoral para marcar a direção da incisão da pele. Em seguida, faça uma incisão de 1,5 centímetros na epiderme ao longo da linha.

Use fórceps teciduais para dissecar sem rodeios a lacuna muscular entre a grande lateralidade e o bíceps femoral até que aproximadamente um centímetro do eixo femoral seja exposto. Use um retrátil para facilitar uma separação contínua da lacuna muscular. Faça uma incisão de um centímetro na epiderme ao longo da projeção da superfície corporal da lacuna muscular entre o tibiali anterior e o comprimento fíbuloso na extremidade inferior distal.

Disseca sem rodeios a lacuna muscular até que aproximadamente um centímetro da tíbia seja exposto. Use o retrátil e fórceps lisos para separar os tecidos moles. Segurando uma broca perpendicular ao osso, faça um buraco de um milímetro de diâmetro no eixo femoral a 1.500 rotações por minuto aproximadamente oito milímetros abaixo da borda inferior do maior trochanter.

Pressione rapidamente a ferida para parar o sangramento e perfurar um buraco de 0,9 milímetros de diâmetro na tíbia aproximadamente quatro milímetros abaixo da borda da fusão tibiofibular. Use um grampo hemostático do tipo mosquito reto para formar um curso submuscular do orifício da tíbia até o orifício do fêmur, passando abaixo do gastrocnemius na extremidade da tíbia e acima do glúteo medius abaixo do bíceps femoral na extremidade do fêmur. Em seguida, use um parafuso de aço m1.4 por oito milímetros para fixar uma extremidade de uma placa de plástico no fêmur proximal.

Use um parafuso de aço m1.2 por seis milímetros para fixar outra extremidade da placa de plástico na tíbia distal. Quando a placa estiver presa, use suturas absorvíveis 4-0 para fechar a miofascia, fáscia profunda e tecido subcutâneo. Feche a pele com suturas de seda.

A imagem de raio-X revela uma colocação correta dos parafusos de aço no fêmur ou na tíbia. A análise de reconstrução tridimensional após a tomografia microcomputada de alta resolução demonstra a colocação lateral dos parafusos aproximadamente oito milímetros abaixo da borda inferior do trochanter maior no fêmur proximal e cerca de quatro milímetros abaixo da borda da fusão tibiofibular na tíbia distal. Os déficits artrogênicos na faixa de movimento aumentam durante a imobilização de forma dependente do tempo.

Como demonstrado pelos maiores déficits artrógenos médios medidos para a articulação imobilizada do joelho em comparação com a articulação do joelho de controle aos 56 dias de imobilização. No primeiro dia da imobilização, não é observada adesão pela coloração elástica da cápsula articular posterior-superior do joelho no espaço articular entre a cápsula articular posterior-superior no fêmur na articulação imobilizada ou na articulação do joelho lateral contralateral. Por 28 dias de imobilização, porém, os depósitos de tecido fibroadipose e a adesão se desenvolvem no espaço articular do joelho imobilizado.

Após 56 dias de imobilização, os tecidos fibrosos são parcialmente substituídos pela deposição, enquanto esse tipo de adesão não é observada na articulação do joelho contralateral. Este método é modificado do utilizado pelo professor Trudel e colegas da Universidade de Ottawa. É fundamental identificar e separar as lacunas musculares durante a cirurgia.

Seguindo diferentes técnicas de imobilização, outros processos experimentais, como a cultura da cápsula articular do joelho, podem ser realizados para estudar os mecanismos moleculares subjacentes.