Componentes principais do microscópio de luz

Microscópios ópticos são ferramentas essenciais na pesquisa biomédica. Os componentes ópticos permitem uma resolução de imagem muito maior do que a visão a olho nu. Ao combinar microscopia com processamento digital de imagens, os pesquisadores podem realçar a visibilidade da imagem e realizar medições quantitativas precisas.

Este vídeo irá guiá-lo pelos principais componentes do microscópio e suas funções. Olá, sou Victoria Sanon Frolic da Core Optical Imaging Facility do Centro de Ciências da Saúde da Universidade do Texas em San Antonio. Hoje eu mostrarei os principais componentes do seu microscópio e suas funções básicas.

Então vamos fazer uma visita guiada ao seu microscópio. Antes de usar um microscópio, é melhor familiarizar-se com seus componentes e suas funções. Este é um microscópio óptico composto invertido Nikon Eclipse TI, equipado para microscopia de luz transmitida e fluorescência epiluminiscente.

A direção ao longo do eixo do microscópio será denominada eixo Z e as direções perpendiculares como os eixos X e Y. Primeiro, examinaremos o tubo ocular, a platina porta-objetivas que contém as objetivas e a platina. Estes são os principais componentes formadores de imagem do microscópio.

As peças são a interface entre o observador e o microscópio. Ao segurar a base dos tubos oculares binoculares, você pode ajustar a distância interpupilar movendo-os mais próximos ou mais afastados. Isso permite que você visualize com conforto usando ambos os olhos.

Simultaneamente, o foco da ocular também pode agora ser ajustado independentemente para cada olho. A ampliação da ocular é indicada no cilindro. Câmeras são rotineiramente acopladas aos microscópios para aquisição de imagens.

Este microscópio específico utiliza um adaptador tipo C para conectar uma câmera CCD à porta lateral do corpo do microscópio. Um botão no microscópio é girado para posicionar um prisma, de modo a desviar os raios de luz formadores da imagem dos oculares e direcioná-los para a câmera, que está montada na porta da câmera. Os diferentes objetivos, que determinam principalmente a ampliação e a resolução, são montados em uma torreta rotativa.

Cada objetiva é marcada com especificações como a ampliação, abertura numérica, o meio de imersão necessário, como óleo, glicerina ou ar, espessura da lamínula, e outras características especiais, como o modo de iluminação, a luz saindo do ocular e das peças nasais desfocada ou projetada ao infinito. O tubo principal contém uma lente de focagem positiva que focaliza a luz de imagem para o ocular ou para a câmera. Agora que mostrei os componentes formadores de imagem do microscópio, vamos examinar os componentes que nos ajudarão a focar uma imagem e a fazer ajustes na luz transmitida.

Em seguida, examinaremos a platina, que é o suporte mecânico que segura a lâmina com a amostra. Ao girar os botões, é possível ajustar a posição da amostra nas direções x e y. Na configuração do microscópio invertido, a platina é fixa e a amostra é focalizada movendo-se as objetivas para cima e para baixo ao longo do eixo Z por meio dos botões de ajuste grosseiro e fino localizados no corpo do microscópio.

Agora examinaremos os componentes de transiluminação do microscópio óptico, que fornecem a luz para a visualização de suas amostras. Primeiramente, temos a lâmpada e sua carcaça, que fornece a luz para iluminar a amostra. Na microscopia de luz, a lâmpada é tipicamente uma lâmpada halógena de baixa voltagem com filamento de tungstênio, cuja intensidade luminosa pode ser ajustada. Uma obturadora pode ser colocada após a fonte de luz para controlar a duração da iluminação.

Logo após a fonte de luz, encontra-se o diafragma de campo, cujo ajuste controla a área ou campo do espécime a ser iluminado. Em seguida, vem o componente conhecido como condensador, cuja função principal é focalizar uma iluminação brilhante e uniforme sobre o espécime. O diafragma de condensador ou diafragma de íris, localizado na parte inferior do condensador, controla o ângulo do cone de iluminação do condensador sobre o espécime.

O ajuste deste diafragma controla o tamanho e a abertura numérica do cone de luz direcionado ao espécime, resultando em iluminação correta, contraste e profundidade de campo. O ajuste óptico adequado do diafragma do condensador resulta no preenchimento adequado do elemento da lente frontal da objetiva. Idealmente, este ajuste deve ser realizado para cada objetiva, a fim de aproveitar todo o potencial da lente. Para iluminação epi-fluorescente, a fonte de luz é tipicamente uma lâmpada de arco de xenônio ou mercúrio.

Em nosso microscópio, uma lâmpada de arco com fonte de luz baseada em mercúrio deve ser manuseada com cuidado, pois pode explodir se for manipulada incorretamente. Certifique-se de usar luvas ao instalar a lâmpada, pois impressões digitais e resíduos podem criar pontos quentes e provocar rachaduras na lâmpada. Recomenda-se fortemente não operar uma lâmpada de arco por mais tempo do que o número de horas para o qual ela é classificada.

O caminho da luz fluorescente inclui um diafragma de campo e um diafragma de abertura, semelhante ao caminho da luz de transmissão. Além desses diafragmas, a luz encontra um conjunto de filtros que selecionam a largura da faixa de luz e direcionam a iluminação até a objetiva, atingindo o espécime no caminho de iluminação epi, onde a objetiva atua tanto como condensador quanto como objetiva.

Acabamos de mostrar a você os principais componentes do seu microscópio óptico. Comecei demonstrando os componentes formadores da imagem do microscópio, ou seja, as oculares, a objetiva e a câmera CCD. Em seguida, revisamos a manipulação da platina, os botões de ajuste de foco e o condensador.

É isso aí. Obrigado por assistir e boa sorte com sua microscopia.