Хирургическое Индукция эндолимфатического водянка по уничтожению эндолимфатического Канальные

Здравствуйте, меня зовут Крис Эдден. Я исследователь из отделения отоларингологии, хирургии головы и шеи Университета Кейс Вестерн Резерв. Сегодня я опишу метод хирургической блокады эндолимфатического протока у морской свинки, которая вызывает эндолимфатический гидропс и используется для моделирования многих видов патологий уха, связанных с болезнью Меньера.

Лимфатический гидропс представляет собой отек эндолимфатического пространства улитки и является ключевым гистологическим маркером болезни Меньера. Здесь представлен поперечный срез нормальной улитки с двумя перилимфатическими пространствами — scala vestibuli и scala tympani, а также не расширенным scala media, который сообщается с эндолимфатическим протоком. Структура, с которой мы работаем. Спустя несколько недель после хирургической процедуры scala media расширяется, как показано здесь, и мембрана Райзнера растягивается. У животных также наблюдается прогрессирующая флуктуирующая потеря слуха на оперированном ухе.

Как и в случае со многими заболеваниями внутреннего уха, хирургическое индуцирование гидропсии у морских свинок является золотым стандартом животной модели болезни Меньера у людей с момента ее первого описания Робертом Кором и Гарольдом Шнеком в 1965 году. Хотя изначально процедура выполнялась с использованием более инвазивного интрадурального доступа, в нашем центре предпочтение отдается экстрадуральному подходу, поскольку он снижает уровень заболеваемости и смертности животных. Ниже приведено описание материалов, правил ухода за животными и хирургического метода, необходимых для успешного и гуманного выполнения этой довольно сложной процедуры.

Сначала я опишу необходимые хирургические материалы. Животное — взрослая самка морской свинки линии Duncan Hartley (альбинос) из Charles River International Laboratories Incorporated. Для подготовки помещения и стерилизации рабочего места вам понадобятся стерильная хирургическая одежда, операционный микроскоп со стерильным чехлом, малая фенестрированная простыня, интраоперационная грелка и аспирационный аппарат.

Отсос №5, стерильный физиологический раствор для отсоса №40, чаша из нержавеющей стали и фиксатор головы. Для анестезии потребуются кетамин в дозе 60 mg/kg и ксилазин в дозе 12 mg/kg. Для предоперационной подготовки понадобятся смазка для глаз на нефтяной основе, электрическая бритва, Бетадин и 70% этиловый спирт. Интраоперационно потребуются 0,6 mL 0,25% маркера, одноразовый безопасный скальпель №11, три изогнутых гемостата, периостальный элеватор Лиера, хирургические щипцы WEX и отологический бор, а также алмазный бор 1,5 mm и алмазный бор 0,5 mm.

Прямая костная кюретка с острым краем, шприц объемом 10 cc, костный воск, гель-губка, рассасывающаяся нить 4-0 с иглой P 13, зажимы Адсона, иглодержатель с алмазными брусками и ножницы для швов. Для послеоперационного ухода потребуется чистая клетка с грелкой. 0,2 мл интерфлоксацина в концентрации 22,7 mg/mL.

Наберите 0,05 мл бупренорфина в концентрации 0,3 мг/мл. Сначала проведите анестезию морской свинке, введя внутримышечно кетамин в дозе 60 мг/кг и ксилазин в дозе 12 мг/кг. Данный режим обеспечивает от 60 до 90 минут анестезии без угнетения дыхания, чего обычно достаточно для выполнения данной процедуры.

После анестезии животного на глаза наносят смазку на нефтяной основе. Затем электрическим триммером выбривают шерсть на затылке от верхних отделов грудной клетки до макушки. После этого место проведения процедуры обрабатывают Betadine, а затем спиртом.

Теперь животное готово к операции. Меня зовут доктор Клифф МакГиллион. Я профессор отоларингологии, хирургии головы и шеи в клиниках Университета Кейс Вестерн Резерв в Кливленде и директор отделения отологии и нейротологии.

Сегодня я хочу рассказать вам о хирургической технике индуцирования эндолимфатического гидропса у морских свинок. Мы выполняем экстраоральный доступ, обнажаем сигмовидный синус, а затем, непосредственно кпереди и латерально от него, находим отверстие эндолимфатической системы, удаляем ткани протока и мешка, и фактически высверливаем проток под прямым визуальным контролем.

По моему мнению, наиболее важной частью процедуры является скелетизация сигмовидного синуса с последующим смещением его медиально для обеспечения прямой визуализации отверстия эндолимфатического протока. После подготовки операционного поля животное переносят в операционную и фиксируют в головном держателе. Шею сгибают для обеспечения адекватного доступа к затылочному гребню и накрывают стерильными простынями для обеспечения здоровья и безопасности животного.

Соблюдайте те же правила стерильности, которые потребовались бы при работе с пациентом-человеком; для поддержания температуры тела животного на адекватном уровне в ходе процедуры перед первым разрезом под операционную поверхность необходимо поместить грелку. Вокруг места хирургического вмешательства вводят маркер. Хирургическая процедура начинается с выполнения срединного дорсального разреза кожи скальпа вдоль затылочной области; для обеспечения достаточного обзора раздвиньте кожу, зафиксировав по обе стороны от разреза гемостаты. Электрокоагуляция не потребуется, так как морские свинки обладают эффективным механизмом гемостаза.

Затем вдоль мышц шеи делают горизонтальный разрез. Для обнажения костного затылка правильно выполненный разрез может сразу открыть линию височно-затылочного шва, как показано здесь. Пересечение большого затылочного нерва, который обычно расположен под мышцами, может вызвать подергивание животного.

Несмотря на достаточное обезболивание при рассечении мышц, важно прощупать кость под лезвием. В противном случае разрез может оказаться слишком глубоким, что создает риск пересечения спинного мозга после прохождения через мышцы шеи. Третий гемостат используется для захвата верхней части разреза и удерживается хирургическим ассистентом.

Для обнажения затылочной кости используют тупую диссекцию. Помните, что необходимо постоянно оставаться с правой стороны от наружного затылочного гребня, при этом левое ухо служит контролем. В данной модели затем используют периостальный элеватор типа «lumper» для дальнейшего обнажения черепа, а также наружного затылочного гребня и линии височно-затылочного шва. Сверление алмазным бором диаметром 1.5 millimeter начинают непосредственно ниже линии шва.

Цель состоит в том, чтобы обнажить заднюю черепную ямку и сигмовидный синус. Все сверление должно выполняться строго по линии височно-затылочного шва или ниже неё. Постоянно используйте засасывающий наконечник размера пять для удаления крови.

Также попросите ассистента поддерживать увлажнение операционного поля стерильным физиологическим раствором, который должен непрерывно капать из шприца объемом 10 cc. Сверление вызовет некоторое кровотечение из костного мозга, но алмазный бор можно использовать для остановки кровотечения на глубине примерно один миллиметр.

Появится слабая голубая линия. Это сигмовидный синус. Просто оставайтесь в этом положении.

Сделайте латеральный разрез в области сигмовидного синуса. Здесь можно обнаружить окончание эндолимфатического протока. Важно определить границы сигмовидного синуса, не повреждая его.

Когда лежащая сверху кость станет достаточно тонкой, сверление прекращают, а отсасыватель заменяют на наконечник номер 40. Также используют большее увеличение. С помощью прямого зонда осторожно удаляют перекрывающую кость.

Сигмовидный синус осторожно ретрагируют медиально, открывая оперкулум, который может быть плохо виден из-за скопления крови. После скелетизации сигмовидный синус снова осторожно ретрагируют медиально, обнажая оперкулум. Затем с помощью малого режущего бора 0.5 мм просверливают бороздку, разрушая эндолимфатический мешок, что в итоге приводит к эндолимфатическому протоку.

Канал виден как темный овал на фоне белизны окружающей кости. В канале просверливают отверстие глубиной около 1 mm, после чего его заполняют костным воском. Костный воск забивают в канал с помощью гель-губки.

Эта окклюзия эндолимфатического протока вызовет эндолимфатическую гидропсию. Для сшивания мышц используется шовный материал PolySorb 4.0. Затем следует бесшовный переход к технике подкожного наложения швов для закрытия разреза кожи. При таком способе закрытия нет необходимости в последующем удалении швов, а также исключается риск того, что животное расчешет место операции или вытянет шов или скобу.

В послеоперационном периоде морскую свинку помещают в инкубатор для поддержания температуры тела, проводя осмотры каждые 30 минут до полного пробуждения животного. Оценивают частоту дыхания и цвет кожных покровов. В данном центре для предотвращения осложнений используют антибиотик широкого спектра действия и бупренорфин для купирования болевого синдрома.

Как и при любом хирургическом вмешательстве, существуют риски для субъекта. Поэтому сейчас я разберу некоторые возможные интраоперационные осложнения и способы их предотвращения. При угнетении дыхания хирург должен постоянно следить за дыханием животного на случай, если оно прекратится или замедлится.

Прекратите операцию и визуально проверьте наличие движений грудной клетки. Если животное находится в состоянии апноэ, убедитесь, что рот и дыхательные пути не перекрыты. При повреждении сигмовидного синуса используйте гемостатическую губку и компрессию с помощью наконечника аспиратора до полной остановки кровотечения.

При проникновении через твердую мозговую оболочку используйте гелевую пену для покрытия; при повреждении вестибулярного аппарата не сверлите более чем на один миллиметр латеральнее сигмовидного синуса, иначе может быть поврежден задний полукружный канал, что приведет к аннулированию всех данных для данной конкретной морской свинки. Хирургическое перекрытие эндолимфатического протока у морской свинки является технически сложной операцией, но при наличии подходящих инструментов, инструкций и знания соответствующей анатомии ее можно выполнить гуманно по отношению к животному и эффективно в качестве модели болезни Меньера у человека.