Мышь глаз Энуклеация для удаленного высокой пропускной Фенотипирование

В данном видео будут продемонстрированы глаз мыши и процесс энуклеации, то есть извлечение глазного яблока из глазницы. Глазное яблоко ограничено краем нижнего века. Здесь находится медиальный, или носовой, угол глаза.

Сзади расположен височный или латеральный кант. Сверху — край верхнего века. Перед вами хирургический препарат.

Игла указывает на прозрачную роговицу. Видно, как немного выступает хрусталик за пределами радужки. Радужка здесь коричневого цвета, она закрывает хрусталик.

Самым важным хирургическим ориентиром является эта белая линия, или лимб; прокол будет выполняться сразу за ним. Задняя половина глазного яблока находится за лимбом, и сейчас мы указываем на место прикрепления мышцы. Здесь видно мышцу, прилегающую к глазному яблоку, а также соединительную ткань, заполняющую орбиту и включающую железу Ариева.

И наконец, перед нами белая длинная полоска зрительного нерва, полученная в результате тупой диссекции. С помощью изогнутого перевязочного пинцета, модифицированного острым кончиком, начните с разведения век. Это позволяет вытолкнуть глаз и отодвинуть его.

Осторожно введите пинцет в глазницу за глазное яблоко, аккуратно сожмите его за яблоком, не сдавливая само яблоко, и потяните вперед. Вам следует захватить соединительную ткань, а не глазное яблоко. Если повернуть глазное яблоко в сторону, можно увидеть ткани глазницы вместе с белым зрительным нервом.

Это повторное вскрытие, чтобы еще раз продемонстрировать следующее: введите инструмент в области внутреннего угла глаза, заведите пинцет за глазное яблоко, захватите соединительную ткань и потяните ее вперед, не оказывая давления на само глазное яблоко. Снова видно, что соединительная ткань находится в длинной белой полосе зрительного нерва. Чтобы создать колотую рану, зафиксируйте глазное яблоко за место прикрепления мышцы и введите иглу за лимбом, непосредственно рядом с точкой фиксации глаза для его стабилизации.

Это позволит фиксатору проникнуть в глаз. Если сделать прокол далеко от места удержания глаза, глазное яблоко будет очень нестабильным, и будет сложно создать рану такой длины, если не сжать глаз или не приложить излишнее давление. Вы также можете захватить всю соединительную ткань непосредственно за самим глазным яблоком.

Некоторые фиксаторы не требуют нанесения проколов. Как правило, глаз помещают в сцинтилляционную пробирку объемом 5 cc с добавлением не менее 3 ccs фиксатора, чтобы глаз был полностью погружен. Для животных, фиксированных методом перфузии, необходима тщательная диссекция.

Мы используем изогнутый пинцет Калибри и изогнутые ножницы Вескотта. Захватите нижнее веко пинцетом Калибри. Введите ножницы вдоль орбитальной кости и начните рассекать соединительную ткань.

Мы используем изгиб в направлении от глазного яблока и избегаем его при определении размера. Подойдет любой участок глаза вдоль всего края нижнего века от одного кантала до другого. В определенный момент большая часть соединительной ткани будет удалена, и вы сможете просунуть ножницы за глазное яблоко и отодвинуть его.

Вот еще один пример: введите ножницы в орбиту, прижимая их к кости орбиты, а не к глазному яблоку, и перерезайте соединительную ткань. Это позволит освободить глазное яблоко, которое зафиксировано подобно баскетбольному мячу в корзине. Используйте пинцет, чтобы отодвинуть веки, и делайте осторожные короткие разрезы вокруг глазного яблока.

Здесь мы захватываем соединительную ткань или место прикрепления мышцы с помощью пинцета Collibra и завершаем отделение глазного яблока от орбитальной соединительной ткани. После надлежажной фиксации глазных яблок, если требуется их транспортировка, мы запечатываем пробирку с фиксатором парафильмом.

Упаковка должна соответствовать правилам вашего университета и государственным нормам. Обычно мы помещаем образцы в контейнер с небольшим количеством ваты для поглощения возможной жидкости; этот контейнер должен быть очень плотно запечатан. Затем данный транспортный контейнер помещается в пакет с пузырчатой пленкой.

Это помещается в специальную лабораторную упаковку для транспортировки жидкостей вместе с сопроводительной документацией.