27 сентября 2017 г.
Здесь мы описываем методы для лечения новорожденных капсаицин побудить атопический дерматит у крыс и воздействия испаряется формальдегида для расследования последствий вдыхания формальдегида на атопический дерматит.
Общая цель данной процедуры заключается в индукции симптомов, напоминающих атопический дерматит, путем обработки новорожденных капсаицином, а также в измерении влияния формальдегида на эти симптомы. Данный метод может помочь ответить на ключевой вопрос, касающийся патофизиологии атопического дерматита в области дерматологии.
Главными преимуществами данного метода являются индукция симптомов, сходных с атопическим дерматитом, и создание важной системы воздействия с использованием инкрементов. Для приготовления раствора капсаицина с концентрацией 5 mg/mL добавьте 1 mL Tween 80, 1 mL 100% этанола и 50 mg капсаицина в коническую пробирку объемом 15 mL. Затем добавьте в коническую пробирку 8 mL физиологического раствора.
Закройте пробирку крышкой и тщательно встряхните ее до полного исчезновения разделения слоев. Критически важно ввести капсаицин в интервале от 12 до 48 часов после рождения. Введите раствор капсаицина в подкожную ткань по срединной линии на затылке новорожденной крысы линии Sprague Dawley.
Чтобы предотвратить остановку дыхания после инъекции капсаицина, поместите новорожденных крысят в кислородную камеру до восстановления нормального дыхания. При необходимости осторожно надавите на грудную клетку новорожденных для стимуляции дыхания. Начните с подготовки пластиковых камер, оснащенных зеркалом для обеспечения полного обзора и отверстиями для дыхания крыс.
Поместите крыс в пластиковую камеру и накройте верхнюю часть камеры тяжелым предметом, чтобы предотвратить открытие крышки. Затем установите цифровую видеокамеру для одновременной записи видов крыс через зеркало и спереди. После этого записывайте спонтанное поведение крыс в течение одного часа.
Просмотрите видеозаписи и подсчитайте количество случаев чесания, подобных тем, что демонстрируют крыса справа и крыса в центре. Для оценки поражений определите степень и тяжесть дерматита в ушных раковинах и на других участках тела анестезированной крысы.
Определите размер единицы площади поражения кожи как 0,25 квадратных сантиметра. Степень тяжести поражений кожи определите по данной таблице. Подготовьте коробку из акрилового стекла с двумя коннекторами на противоположных сторонах.
Для циркуляции газа формальдегида выпускное отверстие должно быть расположено выше впускного отверстия для газа. Подсоедините трубки к обоим разъемам. Проведите трубку от выпускного отверстия к вытяжному шкафу или за пределы здания для вывода газа.
Подключите вторую трубку подачи к медицинскому регулятору кислорода. Поместите обычную клетку для крыс внутрь коробки из акрилового стекла. Поместите в клетку крыс в возрасте одной недели, затем максимально герметично закройте коробку из акрилового стекла, чтобы предотвратить утечку газа.
Оберните камеру пищевой пленкой и закройте ее резиновой крышкой для обеспечения герметичности. Добавьте 0,5% раствор формальдегида в увлажнитель, подключенный к медицинскому регулятору кислорода. Помните, что работа с формальдегидом может быть крайне опасной.
При выполнении данной процедуры необходимо всегда соблюдать меры предосторожности, включая использование масок и перчаток. Затем включите регулятор и установите скорость потока на 5 л/мин. Воздействуйте на крыс парами формальдегида в течение двух часов.
Здесь представлены репрезентативные фотографии воспаления кожи у крыс, подвергнутых воздействию капсаицина. Здесь показано хронологическое развитие дерматита у крыс, подвергнутых воздействию капсаицина. На данном изображении показано хронологическое развитие поведения, связанного с расчесыванием, у крыс, подвергнутых воздействию капсаицина.
На данном изображении представлены типичные рецидивирующие поражения кожи у 16-недельных крыс, подвергнутых воздействию капсаицина. У животных, получавших капсаицин, наблюдается значительное повышение уровня IgE в сыворотке крови. Также у животных, подвергнутых воздействию капсаицина, отмечается значительное повышение экспрессии мРНК IL-4.
Здесь показано значительное повышение экспрессии мРНК IL-13 у животных, получавших капсаицин. На этих репрезентативных фотографиях представлен атопический дерматит после пятой недели лечения с использованием 1,2 ppm и 0,8 ppm формальдегида по сравнению с контрольной группой, получавшей чистый воздух.
Воздействие формальдегида в концентрации 1,2 ppm, но не 0,8 ppm, значительно усилило зуд в модели атопического дерматита, обработанной капсаицином. Аналогичные результаты наблюдались при оценке дерматита. Повышение уровней IgE в сыворотке крови наблюдалось у крыс с моделью AD, обработанных капсаицином и подвергнутых воздействию формальдегида в концентрации 1,2 ppm.
После выполнения данной процедуры для поиска ответов на дополнительные вопросы, касающиеся влияния конкретных веществ на атопический дерматит, могут быть использованы другие материалы, такие как гликолевый раствор. Эти разработки позволили исследователям в области дерматологии изучить роль факторов окружающей среды в патогенезе атопического дерматита.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
В данной статье описываются методы индукции симптомов, напоминающих атопический дерматит, у крыс посредством неонатального введения капсаицина, а также изучения эффектов вдыхания формальдегида. Исследование направлено на более глубокое понимание патофизиологии атопического дерматита.
Экологические триггеры при атопическом дерматите остаются критически важным неизвестным фактором в трансляционной дерматологии, что влияет на прогностическую уверенность при разработке методов терапии. Данная модель на крысах позволяет систематически оценивать воздействие факторов окружающей среды, таких как формальдегид, на прогрессирование заболевания и ответ биомаркеров. Этот подход способствует снижению механистических рисков и служит основой для принятия решений на ранних этапах формирования портфеля разработок в области дерматологии.
Данная модель связывает этап предварительного поиска и доклиническую валидацию, позволяя проводить контролируемую проверку гипотез о влиянии факторов окружающей среды на прогрессирование атопического дерматита.