24 сентября 2008 г.
Лабиринте Морриса вода хорошо принята инструмент, используемый для документа участии гиппокампа в поведенческой задачи.
В водном лабиринте Морриса животные помещаются в бассейны с водой, где они должны доплыть до платформы для выхода. Во время обучения платформу можно расположить примерно на одном дюйме выше уровня воды. Животное должно научиться доплывать до платформы и оставаться на ней, чтобы его могли достать из бассейна.
После того как животное пройдет обучение, уровень воды поднимают, а саму воду делают непрозрачной, добавляя молоко или нетоксичную краску. Таким образом платформа становится скрытой. Теперь животное должно полагаться на память, чтобы найти платформу для спасения.
Здравствуйте, меня зовут Джозеф Нуньес. Я преподаватель программы нейробиологии в Университете штата Мичиган. Сегодня я продемонстрирую метод водного лабиринта Морриса.
Я покажу вам, как подготовить водный лабиринт, как обучать животных и как проводить их тестирование. Итак, приступим. Основным компонентом установки водного лабиринта должен быть круглый бассейн диаметром около шести футов и глубиной около трех футов.
Если вы записываете выполнение задачи на видеокамеру, убедитесь, что все стороны лабиринта попадают в поле зрения камеры. Заполните водный лабиринт водопроводной водой, температура которой должна быть близка к 26 °C. Это может занять несколько часов, поэтому процедуру следует выполнить заранее.
Периодически проверяйте температуру воды, чтобы она составляла 26 °C ± 1 °C. Поместите платформу для спасения в центр бассейна. Во время обучения она может выступать над водой примерно на один дюйм.
Это обучает крысу. Существует платформа, которая является способом выбраться из воды. Теперь мы готовы начать обучение животных в водном лабиринте.
Водный лабиринт имеет четыре начальные позиции: северную, южную, восточную или западную. Поместите животное в одну из этих позиций. Опустите животное в воду, поддерживая его рукой, и осторожно погрузите в воду, начиная с хвоста.
Сначала избегайте стресса у животного, не погружайте его голову в воду насильно. Позвольте животному плавать в течение не более 60 секунд. Вначале животное может плавать вдоль краев бассейна в поисках выхода.
В конце концов животное достигнет платформы и заберется на нее. Как только грызун достигнет платформы, остановите таймер и зафиксируйте время. Если животное не найдет платформу в течение 60 секунд, зафиксируйте время окончания попытки.
В течение одной минуты. Не поднимайте животное. Если животное не может добраться до платформы, приучите его к тому, что оно должно доплыть до платформы.
Осторожно направьте животное на платформу рукой. Дайте животному посидеть в течение 15 секунд. Если оно упадет или спрыгнет, аккуратно верните его обратно.
Это приучит животное к тому, что для спасения из бассейна оно должно оставаться на платформе. Повторите ту же процедуру еще дважды, каждый раз начиная с другого местоположения. По завершении всех трех проб промокните животное полотенцем.
Повторите процесс обучения из трех пробных заходов для всех животных. Сохраняйте одинаковые направления для всех особей и фиксируйте время их прохождения. Теперь, когда животные обучены, они готовы к прохождению теста в водном лабиринте.
Чтобы начать экспериментальные испытания водного лабиринта, закончите заполнение резервуара так, чтобы платформа находилась примерно на одном дюйме ниже поверхности воды. Используйте обезжиренное сухое молоко или нетоксичную белую темперу, чтобы сделать воду непрозрачной.
Освещение и температура воды должны быть такими же, как в процессе обучения. Каждое животное проходит 12 испытаний, по три из каждого начального направления. Продолжительность каждого испытания составляет 60 секунд.
Перед началом работы определите последовательность начальных направлений. Не используйте одно и то же начальное направление дважды подряд, а также не повторяйте одну и ту же последовательность для любого из направлений.
Следите за животным до тех пор, пока оно не достигнет платформы, и зафиксируйте затраченное время. Если животное не достигнет платформы в течение 60 секунд, оператор должен направить его к платформе, как это делалось во время обучения. В любом случае дайте животному посидеть в течение 10 секунд, затем обсушите его.
Продолжайте работу с каждым животным до завершения всех 12 испытаний, при этом лаборант должен возвращаться на то же определенное место. Перед каждым испытанием тщательно очищайте бассейн, убеждайтесь, что платформа находится на своем месте, и проверяйте постоянство температуры воды. Для обнаружения и анализа поведения во время тестовых испытаний можно использовать интеллектуальную систему программного обеспечения для видеотрекинга. На этом всё.
Я продемонстрирую вам, как проводить обучение и тестирование животных. Это очень хорошо зарекомендовавшая себя поведенческая парадигма. Желаю удачи в проведении экспериментов.
Просмотрите полный транскрипт и получите доступ к тысячам научных видео
Водный лабиринт Морриса представляет собой широко используемую экспериментальную установку для оценки пространственного обучения и памяти у грызунов, в частности, с акцентом на функции гиппокампа. В ходе данного теста животные должны найти скрытую платформу для выхода из бассейна с непрозрачной водой, полагаясь на свою память для успешного выполнения задания.
Водный лабиринт Морриса представляет собой надежную количественную платформу для оценки пространственного обучения и памяти в доклинических моделях на грызунах, что напрямую способствует валидации мишеней и снижению механистических рисков при разработке препаратов для лечения заболеваний ЦНС. Стандартизированные результаты позволяют с высокой степенью уверенности делать прогнозы при принятии решений по портфелю препаратов на ранних стадиях, обеспечивая трансляционную преемственность от этапа поиска до доклинических исследований. Данная парадигма является основополагающей для оценки когнитивных конечных точек и функциональных исходов, имеющих значение для разработки средств терапии нейродегенеративных и нейропсихиатрических заболеваний.
Водный лабиринт Морриса находится на стыке этапов раннего поиска, идентификации ведущих соединений и доклинической валидации программ по изучению ЦНС.