Immune Response

Bu video, GFP eksprese eden nötrofillere sahip bağışıklığı baskılanmış, transgenik bir farede bir enfeksiyon bölgesindeki nötrofil alım dinamiklerini incelemek için in vivo görüntülemeyi göstermektedir. Bir enfeksiyona neden olmak için ışıldayan bakterilerin enjekte edilmesini içerir. Bu, izlenmesi görüntüleme ile yapılan enfeksiyon bölgesine nötrofil alımına yol açar.

Bu videoda, bakteriyel lipopolisakkarit ve intravenöz immünoglobuline yanıt olarak kemik iliği kaynaklı makrofajların aktivasyonunu gösteriyoruz.

Bu video, intravenöz immünoglobulin ve bakteriyel lipopolisakkarit kullanılarak bir farenin peritoneal makrofajlarının aktivasyonunu göstermektedir. Ko-stimülasyon, peritoneal makrofajları, immün düzenleyici aktiviteye sahip anti-inflamatuar makrofajlara aktive eder.

Bu video, sitotoksik CD8+ T hücrelerinin aracılık ettiği beyin hücresi ölümünü indüklemek için ex vivo bir tekniği göstermektedir. Beyin dilimleri elde edildikten sonra, aktive edilmiş oligodendrosit yönelimli CD8 + T hücreleri, miyelin kılıfını ve oligodendrositleri hedeflemek için dilimlere aktarılır. İnkübasyon sonrası, miyelin hasarı ve nöronal ölüm, ilgilenilen bölgelerde histolojik olarak değerlendirilebilir.

Bu videoda, farelerde Bordetella pertussis enfeksiyonuna karşı aselüler boğmaca aşısının etkinliğini test etmek için bir protokol açıklıyoruz. Aşılamadan sonra, fareler enfeksiyona maruz bırakıldı ve doku homojenatları, aşının neden olduğu koruyucu bağışıklığın bir okuması olarak bakteri kolonilerini analiz etmek için kültürlendi.

Bu videoda, antijen kaplı mikro boncuklarla aktivasyonlarını takiben B lenfositlerindeki organel dinamiklerini incelemek için bir yöntem açıklıyoruz.

Bu video, in vitro olarak B hücresi aktivasyonunu göstermektedir. İşlem, B hücresi reseptörleri ile antijen etkileşimini içerir, bu da hücre iskeletinin yeniden şekillenmesine, immün sinaps oluşumuna, lizozom hareketine, antijen içselleştirmesine, işlenmesine ve ardından B hücresi aktivasyonu için MHC molekülleri üzerinde sunuma yol açar.

Bu video, inflamatuar bir bağırsak hastalığı olan kimyasal kaynaklı bir kolit murin modeli oluşturmak için bir teknik göstermektedir. Farenin yeterli bir süre boyunca bir dekstran sodyum sülfat (DSS) çözeltisi tüketmesine izin verilir. Tüketildikten sonra, DSS kolondaki mukus ve epitel tabakası bariyerine zarar vererek, bağırsak mikroplarının alttaki dokuya girmesine izin verir - burada yerleşik bağışıklık hücreleri tarafından abartılı bir bağışıklık tepkisine aracılık etmek için algılanırlar...

Bu videoda, farklı anti-c-fms antikor konsantrasyonlarının, osteoklast progenitörlerinden osteoklast oluşum süreci olan osteoklastogenez üzerindeki etkisini gösteriyoruz.

Bu video, insan akciğer dokusundan türetilmiş bağışıklık hücrelerinin Haemophilus influenzae ile inkübe edilmesiyle enfeksiyon sırasında inflamatuar mediatörlerin miktar tayinini göstermektedir. Akış sitometrisi, bakteriyel enfeksiyona yanıt olarak proinflamatuar sitokinlerin üretimi ile ilişkili olarak etiketli lenfositlerdeki sitokin floresansını ölçmek için kullanılır.

Bu videoda, opsonize bir bakteriyel biyofilme maruz kaldıktan sonra nötrofiller tarafından reaktif oksijen türlerinin oluşumunu tespit etmek için bir in vitro kemilüminesans testi gösteriyoruz.

Bu video, nötrofil-biyofilm etkileşimini incelemek için bir in vitro testi göstermektedir. Biyofilm ve izole nötrofillere gömülü patojenik bakteriler, floresan etiketler kullanılarak etiketlendi ve nötrofillerin immün yanıtı ve bakterilerin immün yanıtından kaçışı bir floresan mikroskobu kullanılarak değerlendirildi.

Bu videoda, floresan raportör probları kullanılarak makrofajlarda NLRP3 inflamatuar aktivasyonunu tespit etmek için bir yöntem gösterilmektedir. Hücreler, inflamatuar montajını ve kaspaz-1 aktivasyonunu indüklemek için potasyum iyonoforlar ve glisin ile muamele edilir. Floresan raportör probları aktive edilmiş kaspaz-1'i görselleştirir ve hücreler, çekirdek görselleştirme için bir floresan boya ile boyanır.

Bu video, immünofloresan yoluyla primer makrofajlarda NOD benzeri reseptör ailesi pyrin alanı içeren 3 (NLRP3) inflamatuar oluşumunu incelemek için bir tekniği göstermektedir. Makrofajlar ilk olarak NLRP3 protein ekspresyonunu yukarı regüle etmek için bakteriyel lipopolisakkarit (LPS) ile astarlanır. Makrofajların bir potasyum iyonoforu olan nigerisine maruz kalması, NLRP3'ün aktivasyonuna ve immünofloresan yoluyla görüntülenen inflamatuar oluşumuna yol açar.

Bu video, inflamatuar aracılı makrofaj ölümünü tespit etmek için laktat dehidrojenaz testini göstermektedir. Makrofajlar, hazırlama için lipopolisakkarite maruz bırakılır, ardından laktat dehidrojenaz testi ile belirlenen inflamatuar kaynaklı hücre ölümüne neden olmak için nigerisine maruz bırakılır.

Bu video, anti-nötrofil sitoplazmik antikorlar içeren hasta serumu kullanılarak önceden etiketlenmiş nötrofillerde nötrofil hücre dışı tuzakların veya NET'lerin indüksiyonunu ve görselleştirilmesini göstermektedir. Ayrıca, geçirimsiz bir DNA boyası ve floresan mikroskobu kullanmak, NET'lerin görüntülenmesini sağlar.

Bu video, metanol ve kloroform kullanan iki fazlı bir çözücü sistemi ile insan nötrofillerinden lipid izolasyonunu göstermektedir.

Bu videoda, patojenik bir mantar olan Cryptococcus neoformans'ın makrofajlardaki enfeksiyonunu değerlendirmek için bir sitotoksisite testi gösteriyoruz. Sitotoksisite, Cryptococcus neoformans enfeksiyonunun neden olduğu makrofaj lizizine bağlı olarak sitoplazmik laktat dehidrojenaz enziminin salınmasıyla belirlenir.

Bu videoda, salgılanan bakteri toksinlerinin etkisini değerlendirmek için geçirgen membran eki tabanlı bir enfeksiyon sistemi gösterilmektedir. Bu teknik, geçirgen bir zar kullanarak bakteriyel patojen ile konakçı hücreler arasındaki doğrudan teması ortadan kaldırarak, patojenik bakteriler tarafından salgılanan toksinlerin memeli konakçı hücreleri üzerindeki etkisinin incelenmesine izin verir.

Bu video, bakteriyel toksinlerin konakçı hücreler üzerindeki etkisini kontrollü ve izole bir şekilde araştırmak için geçirgen bir membran ekleme sistemini göstermektedir. Bu yaklaşım, doğal konakçı-patojen etkileşimini taklit eden fiziksel bir ayrımı korurken, hücrelerin toksinlere seçici olarak maruz kalmasına izin verir.

Bu video, floresan mikroskobu tabanlı görüntüleme kullanarak konak-patojen etkileşimlerinin dinamiklerini incelemek için epitel hücre kültürüne GFP etiketli bakteri yapışmasını değerlendirmek için bakteriyel uyum testini göstermektedir.

Bu video, insan epitel hücrelerinin Shigella enfeksiyonu üzerine lokal ve küresel kalsiyum iyonu tepkisini tespit etmek için bir tekniği göstermektedir. Shigella, konakçı hücreleri istila eder ve hücre içi kalsiyum seviyelerini etkileyen istila efektörlerini serbest bırakır. Lokal ve global sitozolik kalsiyumun genliği ve frekansı bir floresan indikatör kullanılarak incelenir.

Bu video, saflaştırılmamış pan-lökosit preparatlarındaki T hücreleri ile Staphylococcus aureus enterotoksin B, SEB yüklü Raji hücreleri arasındaki immün sinaps oluşumunu analiz eder. Görüntüleme akış sitometrisi kullanılarak immün sinapsta CD3 ve F-aktin zenginleşmesi gözlenir.

Bu video, bir ko-kültürde makrofaj fagositozunun mezenkimal kök hücre (MSC) regülasyonunu incelemek için yapılan bir testi göstermektedir. MSC'nin makrofajlarla birlikte kültürlenmesi üzerine, pH'a duyarlı bir florofora konjuge edilmiş opsonize olmayan zimozan partikülleri, makrofajlar tarafından fagosite edilmek üzere eklenir. Fagositozdaki artışla birlikte, floresan yoğunluğu artar ve fagositik aktivitenin MSC aracılı regülasyonunun belirlenmesine izin verir.

Bu videoda, Neisseria meningitidis'in menenjit enfeksiyonu oluşturmak için bir fare modeline intrasternal iletimini gösteriyoruz.

Bu videoda, kendiliğinden reaktif CD4+CD8+ çift pozitif immatür timositlerin apoptozunu modüle eden küçük moleküllü kinaz inhibitörlerini tanımlamak için bir yöntem açıklıyoruz. Apoptoz, çift pozitif timositlerde, anti-CD3- ve anti-CD28 kaplı manyetik boncuklarla aktive edilerek indüklenir; Bunu, inhibitörlerin apoptotik belirteç ekspresyonunu modüle edip etmediğini tespit etmek için küçük moleküllü bir inhibitör tedavisi ve akış sitometrisi analizi takip eder.

Bu videoda, yetişkin erkek Drosophila sineklerine pozitif anlamlı, tek sarmallı bir RNA virüsünün nano enjeksiyonunu gerçekleştirmek ve ardından enfeksiyon nedeniyle başlatılan antiviral yanıtları incelemek için bir prosedürü açıklıyoruz. Polimeraz zincir reaksiyonu analizi, enfekte sineklerde RNA interferansı ve JAK/STAT sinyali dahil olmak üzere bağışıklık yanıt yollarının aktivasyonunu gösteren spesifik genlerin yukarı regülasyonunu tanımlar.

Bu video, inflamatuar bir bağırsak hastalığı olan DSS'nin neden olduğu kolitin bir fare modelinde kolon hasarını değerlendirmek için hematoksilen ve eozin (H&E) boyama yöntemini göstermektedir. Kolonu DSS ile tedavi edilen bir fareden izole ettikten ve dokunun bölümlerini elde ettikten sonra, bölümlerin H&E boyaması, inflamasyonun aracılı doku hasarını tanımlamaya yardımcı olur.

Bu videoda, fare bağırsak dokusu parçaları ile spesifik bağırsak bakterileri arasındaki etkileşimleri incelemek için bir ex vivo bağırsak organ kültürü sistemi kurma metodolojisini açıklıyoruz. Cihaz, ilki bağırsak dokusu lümenini birbirine bağlayan ve içine spesifik bakteri süspansiyonunu sağlayan ve ikincisi ex vivo doku canlılığını korumak için cihazın kuyularına sürekli olarak ortam sağlayan iki çift giriş-çıkış portundan oluşur.

Bu video, antimikrobiyal tedavinin Pseudomonas aeruginosa (Pa) agregatları üzerindeki etkisini incelemek için bir in vitro tekniği göstermektedir. Floresan etiketli Pa hücreleri, enfeksiyon sırasındaki büyüme modelini taklit ederek agregalar halinde büyütülür. Agregalara öldürücü olmayan bir antibiyotik kolistin konsantrasyonu ile meydan okunduktan sonra, bakteri-antibiyotik etkileşiminin gerçek zamanlı değerlendirmesi floresan mikroskobu ile gerçekleştirilir.

Bu video, koloni oluşturan birim testi ile makrofajların Listeria monocytogenes enfeksiyonunu belirlemek için bir in vitro miktar tayin tekniğini göstermektedir. Agar plakasındaki bakteri kolonileri, konak savunma mekanizmasından kaçan ve makrofajlar içinde hayatta kalan hücre içi bakteri popülasyonunu temsil eder.

Bu videoda, hücre içi patojenik bir bakteri olan hücre içi ve hücre dışı Listeria monocytogenes'i, kültür makrofajlarının in vitro olarak enfeksiyonunu takiben akış sitometrisi kullanarak ölçüyoruz.

Bu video, bakteri süspansiyonunun sinek vücut boşluğuna nano enjeksiyonunu ve bunun sonucunda bakteri çoğalması ve enfeksiyonu ile sonuçlandığını göstermektedir. Sineğin bağışıklık tepkisi bazı bakterileri temizlerken, diğerleri bağışıklık boşluğundan kaçar ve konakçı içinde hayatta kalır ve bir enfeksiyona neden olur.

Bu video, patojenik bir bakteriyi doğrudan vücut boşluğuna sokarak Drosophila'yı enfekte etme tekniğini göstermektedir. Bu yöntem, epitel bariyerlerini ve diğer pasif savunma mekanizmalarını atlayarak sistemik enfeksiyonun indüksiyonuna izin verir. Enfeksiyon üzerine, ortaya çıkan bağışıklık tepkisi, sinek ölümlerinin izlenmesi ve aşağı akış tahlillerinin yapılması ile değerlendirilir.

Bu videoda, E. coli'yi Drosophila melanogaster'in göğüs kafesine enjekte ettikten sonra E. coli bakteri yükünü ölçmek için bir teknik gösteriyoruz.

Bu videoda, Drosophila S2* hücreleri üzerinde Drosophila C virüsünün doku kültürü enfektif viral dozunu belirlemek için sitopatik etki testini gösteriyoruz. Kültürlenmiş hücreleri enfekte etmek için bir dizi viral konsantrasyon kullanılır. Yapısal değişiklikler sergileyen hücrelerin oranı belirlenir ve bu veriler doku kültürü enfektif dozunu hesaplamak için kullanılır.

Bu video, bir murin modelinde oküler yüzey iltihabını ve meibomian bezi disfonksiyonunu indüklemek için bir yöntem göstermektedir. Farenin bağışıklık sisteminin bir immünojen kullanılarak uyarılması ve daha sonra aynı immünojen ile yeniden uyarılması, nötrofil tarafından üretilen aggNET'ler yoluyla meibomian bezi salgısının tıkanmasına neden olan oküler yüzey iltihabını teşvik eder ve kuru göz hastalığına yol açar.

Bu video, bimoleküler floresan tamamlama raportör proteinleri kullanılarak insan makrofajlarındaki kaspaz proteinlerinin aktivasyonunu göstermektedir. Kaspaz-1'in pro alanları, inflamatuar kompleksler için işe alınan Venüs proteinlerinin floresan olmayan fragmanları ile kaynaştırılır. İnflamatuarların yakınlığı, Venüs parçalarının yeniden katlanmasını ve floresansını indükleyerek makrofajlarda kaspaz aktivasyonunu doğrular.

Bu video, tütün ürünü preparatlarının, TPP'lerin, akış sitometrisi kullanılarak insan periferik kan mononükleer hücrelerinden sitokin üretimi üzerindeki etkisini göstermektedir. Hücrelerin TPP ile tedavisi, lipopolisakkarit stimülasyonundan sonra tahmin edilen proinflamatuar sitokinlerin üretimini aşağı regüle eder, ardından immün boyama ve akış sitometrisi analizi yapılır.

Bu videoda, poli-L-Lizin kaplı çok kuyulu bir plakada S. aureus tarafından in vitro biyofilmin hazırlanmasını gösteriyoruz. Biyofilm biçimli plaka, sonraki deneyler için kullanılabilir.

Bu video, tiplenemeyen Haemophilus influenzae (NTHi) yoluyla lenfositleri uyarmak ve bağışıklık tepkisini değerlendirmek için in vitro bir tekniği göstermektedir. İzole edilmiş periferik kan mononükleer hücrelerinin (PBMC'ler) NTHi ile inkübe edilmesi, bakteri hücrelerinin T lenfositlerini uyarmasına neden olarak sitokin üretimine yol açar. Sitokinlerin sekresyonunu inhibe ettikten sonra, uyarılmış T lenfositlerinde biriken hücre içi sitokinleri tespit etmek için immünofloresan boyama yapılır.

Bu video, fare kolon dokusunun immünohistokimyasal boyanması yoluyla kimyasal kaynaklı kolitin değerlendirmesini göstermektedir. Lekeli bir doku bölümünde, hasarlı dokuda çok sayıda bağışıklığa duyarlı hücrenin varlığı, kolit sırasında bağışıklık hücrelerinin infiltrasyonunu temsil eder.

Bu videoda, yanıcı bir tütün ürünü hazırlığı olan tamamen dumanla şartlandırılmış bir ortamın, efektör periferik kan mononükleer hücreleri tarafından K562 hücresinin öldürülmesi üzerindeki etkisini inceliyoruz.

Bu video, bir fare modelinde cilt iltihabını indükleyerek bir test antijenini değerlendirmek için in vivo bir tekniği göstermektedir. Test antijeni - bir yağ / aseton çözeltisi içinde bir hapten - fare kulağının derisine topikal olarak uygulanır ve cildin iltihabı yeterli bir süre sonra değerlendirilir.

Bu videoda, bir fare modelinde kesin bir yara oluşturmak için bir punch biyopsi prosedürü gösterilmektedir. Eksizyon, cildin deri altı tabakasını açığa çıkarır ve lokalize patojen enfeksiyonuna karşı bağışıklık tepkilerini incelemek için uygun bir alan sağlar.