Poliimid-temelli Mikroelektrod kullanarak Serbestçe Hareketli Fare Yüksek yoğunluklu EEG Kayıtlar

Merhaba, ben Kore Bilim ve Teknoloji Enstitüsü Nörobilim Merkezi'ndeki Gen Choice Laboratuvarı'ndan Mina Lee. Bugün, poli tabanlı mikro elektrot dizisi kullanılarak kütle modelinde yüksek yoğunluklu EG koşulunu göstereceğiz. Prosedür; cihazların kurulumunu, hayvanların cerrahiye hazırlanmasını ve stereotaksik cerrahinin gerçekleştirilmesini içermektedir.

Ameliyattan sonra EEG kaydı gerçekleştireceğiz ve ardından verileri analiz edeceğiz. Başlayalım. Ameliyata başlamadan önce, stereotaktik cihazları ve gerekli tüm malzemeleri hazırlayın.

Ortam temiz olmalıdır. Fareyi cerrahi işlem için hazırlayın. Bugünkü cerrahi işlemi, 17 haftalık basic six black six J 1 29 s four S-V-J-A-E hibrit bir fare üzerinde göstereceğim.

25 gramdan daha ağır olan fareler de kullanılabilir. Fareye, kilogram başına 120 miligram ketamin ve kilogram başına 6 miligram ksilonleyn içeren bir kokteylin IP enjeksiyonu ile anestezi uygulayın. Ameliyata başlamak için farenin yeterince derin anestezize olduğundan emin olmak adına, kuyruğunu hafifçe çimbikleyin.

Cerahiye başlamak için, hayvanı stereotaksik aparata monte edin. Hava barlarını fare kanalına tek tek yerleştirin ve sıkıştırın. Başının üzerine bir miktar metanol sürün ve ardından başının tüy yapısını düzeltin.

Enjeksiyon yapın, iki göz arasından iki kulak arasına kadar anterior posterior insizyon gerçekleştirin ve kafatasını açın. İnsizyonun geniş kalmasını sağlamak için fare derisini mikro klemplerle tutun. Kafatasında kalan tüm doku veya membranları sterilize edilmiş kesim swapları ile temizleyin.

İşaretleme kalemini başının üzerine yerleştirin. BMA lambda noktalarını işaretleyin. Ardından işaretleme kalemini kaldırın ve noktaları eski bir ince uçlu kalemle işaretleyin.

Tam üzerine. Noktaya. Film elektrodu başın üzerine getirin ve kafatasına bir damla T suyu damlatın.

BMA'yı, poly best mikro elektrot dizisinin Ontario'sunun beşinci katmanının ortasına yerleştirin. Filmi, yumuşak pamuklu sulu kulak çubuklarıyla medialden laterale doğru dikkatlice silin. Tamamen kuruması için birkaç dakika bekleyin.

Bu, daha iyi yapışmaya yardımcı olur. Artan boşluğa yağ bazlı bir kalemle üç adet işaret koyun. Bu işaretler, delme işlemini gerçekleştireceğiniz yerlerdir.

Delikleri açarken iç kısma temas etmemeye çok dikkat edin. Üç steril hat yönlendirme vidasını kafatasına yerleştirin ve sıkıca oturtana kadar itin. Yoğun kıvamda bir sıvı dental çimento hazırlayın ve film elektrot vidalarını ve kafatasının geri kalanını kaplayın.

Başka bir karışım hazırlayın ve bunu elektrodu tamamen kaplamak için kullanın. Sabitlemek için vidaları tekrar açın. Unutmayın, bu kısım film elektrodun altında kalmamalıdır.

Konnektör düzleminin arkasına bant yapıştırılmış çift işaret yerleştirin. Güçlü bir yapıştırıcı kullanarak kafatasının ortasına destek olarak sert bir çubuk yerleştirin. Bugünkü deneyde, bu çubuk adımı için bir kesme pamuğunun ucunu kullanıyorum; konnektör konumunu, kesme noktasının ucuna temas edene kadar geriye doğru yönlendiriyorum.

Kafatası ile konnektör arasındaki mesafe beş milimetreden fazla olmalıdır. Güçlü bir yapıştırıcı ekleyerek konnektör düzlemini pamuklu çubuğun ucuna yapıştırın. Açık kalan geri kalan alanı akrilik kemik çimentosu ile kapatın.

Çimento kürlendikten sonra, klempleri çıkarın ve deriyi karıştırın. Fareyi parusdan çıkarın ve boş kalan alanı kapatın. Akrilik diş çimentosu ile çimento ve dikiş bölgesinin çevresine antibiyotikli sodyum ate uygulayın.

Fareyi kendi kafesine yerleştirin ve iyileşme için beş günlük bir süre tanıyın. Fareyi EEG'ye bağlayın ve alışma süreci için bir saatten fazla süre verin. Bir saat sonra EEG kaydını gerçekleştirin; poli tabanlı bir mikro elektrot dizisi ile bir fare modelinde yüksek yoğunluklu EEG alımı gerçekleştirdik.

Bu prosedür uygulanırken, film elektrotun sadece yedi mikrometre kalınlığında olması nedeniyle ona nazik davranılması gerektiği unutulmamalıdır. Elektrodu yeniden düzenlerken bir damla musluk suyu gereklidir. Bu adım atlanırsa, elektrot kolayca dönebilir; ayrıca yüksek viskoziteli akrilik diş malzemelerinin filmin altına sızmadığından emin olun.

Kayıttan sonra, farelerdeki beyin aktivitelerini net bir şekilde görselleştirmek için birkaç beyin grafiği çizmek amacıyla meth lab kullanarak çevrimdışı analiz gerçekleştiriyoruz. Bu, GBL enjeksiyonu sonrası temsilci çok kanallı EEG sinyalleridir. Sol panelde, sağ paneldeki GBL enjeksiyonu sonrası temsilci çok kanallı e sinyallerini görebilirsiniz.

Ortalama güç zaman gecikmesi, ortalama pik gücü ve nöbet başlangıcının ortalama olasılık haritası gibi beyin topografya haritaları sunulmuştur. Hepsi bu kadar. İzlediğiniz için teşekkürler.