Kuyruk Süspansiyon Testi

Kuyruk süspansiyon testi, çeşitli deneysel manipülasyonların antidepresan etkinliğini öngörmek için kullanılan yaygın bir davranışsal testtir. Bu video, bu testin prosedürlerini göstermektedir. Kuyruk süspansiyon testi fareler için valide edilmiştir ve daha büyük kemirgenler için önerilmemektedir.

Kuyruk süspansiyon testinde fareler kuyruklarından asılırlar. Fare altı dakika boyunca asılı kalır. Bu süre zarfında deneğin davranışları kaydedilir.

Altı dakikalık test süresinin sonunda, bant deneğin kuyruğundan çıkarılır. Test tamamlandıktan sonra, görsel kayıtlar bir bilgisayara veya video monitörüne aktarılır. Analiz için, bir gözlemci farenin tüm altı dakikalık oturum boyunca mücadele ederek geçirdiği süreyi ölçer.

Antidepresan özelliklere sahip bileşikler, farelerin mücadele ederek geçirdiği süreyi artırır. Bu durum, hareketsizlik sürelerinin kısalmasıyla kendini gösterir. Örneğin, klinik olarak yardımcı antidepresan ilaç olarak kullanılan duygu durum dengeleyici lityumun, kuyruk asma testinde hareketsizlik süresini azalttığını rapor etmiş bulunmaktayız.

Merhaba, ben Baltimore'daki Maryland Üniversitesi Tıp Fakültesi Psikiyatri Bölümü'nde, Dr. Todd Gould'un laboratuvarından Sean. Merhaba, ben de aynı laboratuvardan Chantel. Bu videoda, kuyruk asma testinin nasıl uygulanacağını ve nasıl puanlanacağını göstereceğiz.

Kuyruk Askılama testi, antidepresan tedavilerin potansiyel etkinliğini değerlendirmek için kullanılır. Öyleyse laboratuvarımıza gidelim ve deneyi nasıl gerçekleştireceğinizi gösterelim. Zorunlu olmasa da, biz özel olarak tasarlanmış bir kuyruk askılama kutusu kullanıyoruz.

Bu test için kuyruk askı kutumuz, her biri tek bir fareye ayrılmış dört bölmeye ayrılmıştır. Bölmeler, farelerin test sırasında birbirlerini görmelerini engeller.

Bununla birlikte, fareleri asmak için bir raf veya başka bir yapı kullanmak mümkündür. Kuyruk asma testi kutusunun boyutları, farelerin kenarlara ulaşmasını ve tutunmasını önleyecek şekilde seçilir. Deneye başlamadan önce, yeterli miktarda bant parçası kesin ve kuyruğa yapıştırmak için kullanılacak bölümü işaretleyin.

Laboratuvarımızda, 17 santimetrelik bant parçaları kullanacağız. Bu bant parçasının ucundan iki santimetrelik bir kısım işaretlenmeli ve bu kısım kuyruğa yapıştırmak için kullanılacaktır. Kuyruğu, bu iki santimetrelik bölümün ortasına yerleştiriyoruz.

Kuyruk süspansiyon testi kutusunu ve video kamerasını konumlandırın. Hayvanlar yerleştirilmeden önce, önceki deneklerden kalan kokuları nötralize etmek için kutu, sterilize edici bir solüsyonla iyice temizlenmelidir. Laboratuvarımızda, renkleri dışında her yönüyle özdeş olan iki farklı kuyruk süspansiyon kutusu kullanıyoruz.

Albino fareler için, koyu gri bir kutu video kayıtları için iyi bir kontrast sağlar. Daha koyu renkli fare soyları için beyaz bir kutu uygundur. Beyaz gürültü makinesini çalıştırın.

Aralıklı sesleri maskelemelidir. Fareleri alışmaları için prosedür odasına getirin. Oda koşulları sabit tutulmalı; gürültüden, ışık seviyesi değişimlerinden ve diğer olası rahatsızlıklardan arındırılmış olmalıdır.

Bu süre genellikle en az bir saattir. Alıştırma süresi sona erdikten sonra, belirli fare suşlarının kuyruklarına tırmanmasını önlemek amacıyla teste geçilebilir. Kuyruk süspansiyon testi sırasında, kuyrukların üzerine yerleştirdiğimiz plastik silindirler kullanıyoruz.

Bu silindirler, test sırasında kuyruklarının tabanında durur. Laboratuvarımızda dört santimetre uzunluğunda, bir santimetre çapında ve 1,5 gram ağırlığında plastik silindirler kullanıyoruz. Tırmanmayı önlemek için plastik silindirler kullanılıyorsa, bunlar bant uygulanmadan önce kuyrukların üzerine yerleştirilmelidir.

Kuyruğun en uç kısmına, kuyruğun iki ila üç milimetresi dışarıda kalacak şekilde bant uyguluyoruz. Bandı, farelerin kendi kafeslerindeyken kuyruklarına yapıştırın. Bandın işaretli ucunu kullanın ve bandın kuyruğa ve ardından kendi üzerine yapıştığından emin olun.

Bant uygulandıktan sonra, farklı hayvanlara takılan bantların birbirine karışmasını önlemek için her bir fareyi kafes duvarlarına sabitleyin. Bu işlemi hızlıca tamamlayın. Aksi takdirde, fareler gereksiz strese maruz kalacaktır.

Kayıt, hayvanlar askıya alınmadan önce başlatılmalıdır. Hayvanları, bandın boş ucunu süspansiyon çubuğuna, tedavi grupları arasında dengelenmiş bir sırayla ve kamera görüşünü engellemeyecek şekilde yerleştirerek askıya alın. Fareler tek tek askıya alındığı için, her hayvanın test için başlangıç zamanı biraz farklıdır.

Her bir fare için puanlamaya tam olarak askılama süresinin başlangıcında başladığınızdan emin olun. Kamera görüşünün engellenmemesi önemlidir. Tüm kuyruk askılama oturumu puanlanacağı için, kamera görüşünün engellenmesi veri kaybına yol açabilir.

Tüm bant uçlarının, aynı miktarda bollukla askı çubuğuna dik olduğundan emin olun. Her denek için zamanlayıcıyı başlatın. Kuyruk askılama testi altı dakikadır.

Altı dakikalık test süresi dolduğunda, her kuyruğun ucundaki bandı çıkarın ve fareleri kendi kafeslerine geri koyun. Testin sonunda, denek bilgileri video ile kaydedilmelidir. Fareler koloni odasına döndürüldükten sonra, test kutusu iyice temizlenmeli ve bir sterilizasyon solüsyonu ile silinmelidir.

Testleri tamamladığımıza göre, davranışların puanlanmasını tartışacağız. Kuyruk asım testi puanlanırken genellikle değerlendirilen tek değişken, hayvanların hareketsiz kaldığı süredir. Hareketsizlik süresini elde etmek için, farelerin hareketli olduğu süreyi ölçeceğiz ve bunu altı dakikalık test süresinden çıkaracağız. Testin tüm altı dakikasını puanlayacağız.

Gözlemcinin, her fare için harcanan süre boyunca yalnızca tek bir hayvana odaklanabilmesi için öncelikle değerlendirilmeyen fareler kapatılır. Hareketlilik, bir oyun koluyla kontrol edilen ekran üzerindeki bir kronometre ile ölçülür. Burada gördüğünüz üzere, aynı anda kontrol edilen iki ayrı ekran kronometresi bulunmaktadır.

İlk kronometre 360 saniyeden geriye doğru sayarak test süresini gözlemciye bildirir. İkinci kronometre ise deneklerin hareketli kaldığı süreyi ölçer. Fark edileceği üzere, ikinci kronometre birinci kronometre ile kapatılmıştır ve gözlemci tarafından yalnızca milisaniye ondalıkları görülebilmektedir.

Bu sayede gözlemci, kronometrenin sayıp saymadığını görebilecek ancak puanlama tamamlanana kadar toplam mobilite süresini göremeyecektir. Bunu, gözlemci yanlılığının sonuçları etkilemesini önlemek için yapıyoruz. Fareler, özellikle oturumun başında, kaçışla ilgili davranışlar sergilerler.

Bu davranışlar arasında, cihazın duvarlarına ve askı çubuğuna ulaşmaya çalışmak, vücudun şiddetli şekilde sallanması ve koşmaya benzer ekstremite hareketleri yer almaktadır. Bu hareketler açıkça mobilite teşkil etmektedir. Ancak, test ilerledikçe hareketler daha hafif hale gelir.

Laboratuvarımızda, arka bacaklarda herhangi bir hareket olmaksızın yalnızca ön bacaklarla sınırlı kalan küçük hareketleri mobilite olarak saymıyoruz. Buna ek olarak, önceki mobilite atakları sırasında kazanılan ivmeden kaynaklanan sarkaç benzeri sallanmalar mobilite olarak değerlendirilmemektedir. Şimdi, gerçek bir kuyruk asma testi seansının puanlamasını görelim.

Genellikle hareket süresi değil, hareketsizlik süresi rapor edilir. Hareketsizlik süresi, toplam hareket süresinin 360 saniyelik test süresinden çıkarılmasıyla hesaplanabilir. Puanlama. Kuyruk askılama testi eğitim ve pratik gerektirir.

Laboratuvar içi bir standart oluşturmak ve yeni gözlemcileri yüksek bir güvenilirlik düzeyine ulaşana kadar eğitmek önemlidir. Bu makalede, kuyruk süspansiyon testinin nasıl gerçekleştirildiğini ve skorlandığını açıklıyoruz. Gelecekteki deneylerinizde başarılar dileriz.