Laboratuvarda Sıcaklığı Düzenleme: Isı Uygulama
Laboratuvarda sıcaklığı düzenlemenin birçok yolu vardır. Bazen reaktiflerin ısıtılması, hücre kültürlerinin optimal büyüme için belirli sıcaklıklarda tutulması ve cerrahi prosedürler sırasında veya sonrasında hayvan vücut sıcaklığının düzenlenmesi gerekir. Bu video, bir bilim insanının maddeleri ısıtmak isteyebileceği bazı yöntem ve nedenlere ve numuneleri ile reaktifleri ısıtmak için kullanılan belirli sıcaklıklara daha yakından bakacaktır.
Öncelikle, yaygın laboratuvar prosedürlerinde sıcaklıktan genellikle Celsius veya Santigrat derece cinsinden bahsettiğimizi belirtmek önemlidir. Bilimde kullanılan diğer metrik ölçüm birimleri gibi, Celsius derecesi de sıcaklık ölçümü için Uluslararası Birimler Sistemi standartlarından biridir.
Muhtemelen zaten bildiğiniz gibi, sıcaklık ölçmek için kullanılan araç termometredir.
Isıttığınız veya soğuttuğunuz bir sıvının en doğru sıcaklık değerini elde etmek için, termometreyi yüzeyin en az 10-15 cm altına daldırın. Ardından, cihazın kabın tabanından en az 5 cm yukarıda ve kabın kenarından en az bir termometre genişliği kadar uzakta olduğuna dikkat ederek termometreyi dikkatlice kıskaçla sabitleyin veya başka bir şekilde yerinde tutun.
Sıvıyı karıştırıyorsanız, termometrenin manyetik karıştırıcı tarafından çarpılmayacağından emin olun; aksi takdirde tehlikeli bir durumla karşılaşabilirsiniz.
Sıvı sıcaklık göstergesini göz hizasında okuyun. Termometreyi okurken, gövde boyunca dokunmamaya özen gösterin. Vücut ısınız ölçümün doğruluğunu etkileyebilir.
Şimdi, birçok deneyin gerçekleştirildiği bazı yaygın sıcaklıkları gözden geçirelim.
Laboratuvarınızda yürütülen çalışmanın türüne ve laboratuvarınızda bulunan ekipman tipine bağlı olarak, odanın ortam sıcaklığı normalde yaklaşık 20-25 ˚C arasındadır. Aksi belirtilmediği sürece, bir deneyin oda sıcaklığında gerçekleştirileceği genel olarak varsayılabilir. Oda sıcaklığı, protokollerde genellikle tahmin edeceğiniz üzere RT şeklinde kısaltılır.
Bir "in vitro" prosedürle karşılaştığınızda, deney genellikle 37˚C'de yürütülmelidir. "In vitro" olarak gerçekleştirilen süreçler doku, hücre veya ekstratları içerir ve bir organizmanın içindeki koşulları taklit etmeye çalışır. Öte yandan, in vivo deneyler sağlam organizma ile gerçekleştirilir ve memelilerin vücut sıcaklığı 37 ˚C olduğu için "in vitro" hücre kültürü deneyleri tipik olarak bu sıcaklıkta yürütülür.
56°C üzerindeki sıcaklıklarda proteinler açılır; bu işleme denatürasyon denir. Bu durum, bir tespit antikorunun proteinleri daha kolay tanımlayabilmesi için protein şeklinin değiştirilmesini sağlamak da dahil olmak üzere çeşitli nedenlerle faydalı olabilir.
Su ve bazı su bazlı veya sulu çözeltiler yaklaşık 100 °C'de kaynar. Bu sıcaklık aynı zamanda, oda sıcaklığında çözünmesi zor olan reaktifleri çözmek için uygun bir sıcaklık olabilir.
Genellikle, deneysel bir protokol belirli adımların belirli bir sıcaklıkta gerçekleştirilmesi gerektiğini belirtir.
Tezgah üstünde yürütülen deneyler yaklaşık 20-25°C'de, yani oda sıcaklığında gerçekleştirilir.
Oda sıcaklığında çoğu reaktif ve hücre kültürü stabildir; ancak bazı reaktiflerin ışıktan korunması gerekir, bazı deneylerin steriliteyi korumak için çeker ocak altında yapılması gerekir ve bazı analizlerin, deneysel dokuların veya reaktiflerin kurumasını önlemek için nemli bir hazne içinde gerçekleştirilmesi gerekir.
Protokolünüzde "hücreleri veya belirli bir reaktifle çözdürün" ifadesi yer aldığında, yavaş ve eşit bir ısıtma için 37 °C'ye ayarlanmış bir su banyosu kullanın. Protokolünüz daha fazla ısıtma belirtmediği sürece, son buz parçası erir erimez örneğinizi su banyosundan çıkardığınızdan emin olun.
Eğer protokol "önceden ısıtılmış besiyeri" veya diğer önceden ısıtılmış reaktiflerin kullanılması gerektiğini belirtiyorsa, çözeltileri sabit, sıcak – ancak kaynar olmayan – bir sıcaklıkta tutmak için 37 °C su banyosu da kullanışlıdır.
Çözeltilerinizi çevredeki sudan kaynaklanan kontaminasyondan veya seyrelmeden korumak için, dondurulmuş hücre alikotlarını çözdürmek veya mikrolitre hacmindeki çözeltileri ısıtmak amacıyla yüzer köpük raf kullanın. Daha güvenli bir tüp tutucu tercih ediliyorsa, bu amaç için metal bir raf da kullanılabilir.
Daha büyük sıvı hacimleri için, örnekleri su banyosunda dik tutmak amacıyla plastik raflar veya metal klempler kullanılabilir.
Memeli hücre kültürlerini inkübe etmeniz istendiğinde, bu genellikle hücrelerin %5 karbondioksit atmosferine sahip ve inkübatörü yaklaşık %95 nemde tutan bir su tepsisi bulunan 37 °C'lik bir inkübatöre yerleştirilmesi anlamına gelir.
Bakteriyel hücreler de bazen 37°C'de, bir inkübatörde veya sıcak bir odada kültüre edilir. Bakteriyel hücre kültürü sayılarını hızla artırmak ve kültür süresini kısaltmak istediğinizde çalkalayan bir inkübatör kullanılabilir. Sıvı kültürleri çalkalayarak, bakterilerin tüpün dibine çökmemelerini ve böylece yeterli besin almalarını sağlarsınız.
Çok hızlı ısıtma veya kaynatma işlemleri için geleneksel olarak ısıtıcı plakalar kullanılmıştır. Artık mikrodalga fırınlar laboratuvarlarda yaygın olarak bulunduğu için, sulu çözeltileri hızlıca kaynatmak amacıyla bunlar da kullanılabilir.
Şimdi laboratuvarda bazı şeyleri ısıtmak isteyebileceğiniz nedenlerden bazılarına göz atalım.
Isı ile sabitleme, bakteriyel hücreler veya biyomakromoleküller gibi belirli biyolojik örnekleri boyama işleminden önce cam lam üzerine sabitlemenin basit ve hızlı bir yoludur. Burada, ısı ile sabitleme sayesinde elde edilen bazı kromozom yayılımlarını görebilirsiniz.
Katı bir reaktifi çözmeye çalıştığınız sıvı çözeltinin ısıtılarak karıştırılması, burada çözülmekte olan toz agar örneğinde olduğu gibi, işlemi hızlandırmaya yardımcı olabilir.
Birçok canlı hücre deneyi en az bir inkübasyon süresi gerektirir. Incucyte inkübatörü, kültür kapları inkübatörden çıkarıldığında hücrelerde meydana gelebilecek pertürbasyonlar olmadan, hücre büyümesinin gerçek zamanlı görüntülenmesine olanak tanır.
Canlı hücre görüntüleme masaüstü mikroskoplarla da gerçekleştirilebilir. Burada hücreler bir görüntüleme inkübatöründe tutulurken, deneysel bir stimülüs eklenmesi öncesindeki ve sonrasındaki aktiviteleri izlenmekte ve daha sonra analiz edilmek üzere kaydedilmektedir.
Laboratuvar sıcaklıklarının 23°C ve üzerinde düzenlenmesine ilişkin JoVE giriş videosunu izlediniz.
Bu videoda şunları inceledik: hücrelerin, hayvanların ve çözeltilerin ısıtılması için kullanılan en yaygın laboratuvar ekipmanlarından bazıları, hücreleri veya çözeltileri ısıtmak için hangi ekipmanın kullanılacağına nasıl karar verileceği ve bir deney sırasında sıcaklığın düzenlenmesi gerekebilecek bazı farklı nedenler. İzlediğiniz için teşekkürler ve termometrenizi dikkatli kullanmayı unutmayın!
Pek çok deneysel analiz oda sıcaklığında (RT; ~20-25°C) gerçekleştirilse de, deneylerin veya deneylerin belirli bölümlerinin bir tür sıcaklık düzenlem…
Laboratuvarda sıcaklığı düzenlemenin birçok yolu vardır. Bazen reaktiflerin ısıtılması, hücre kültürlerinin optimal büyüme için belirli sıcaklıklarda tutulması ve cerrahi prosedürler sırasında veya sonrasında hayvan vücut sıcaklığının düzenlenmesi gerekir. Bu video, bir bilim insanının maddeleri ısıtmak isteyebileceği bazı yöntem ve nedenlere ve numuneleri ile reaktifleri ısıtmak için kullanılan belirli sıcaklıklara daha yakından bakacaktır.
Öncelikle, yaygın laboratuvar prosedürlerinde sıcaklıktan genellikle Celsius veya Santigrat derece cinsinden bahsettiğimizi belirtmek önemlidir. Bilimde kullanılan diğer metrik ölçüm birimleri gibi, Celsius derecesi de sıcaklık ölçümü için Uluslararası Birimler Sistemi standartlarından biridir.
Muhtemelen zaten bildiğiniz gibi, sıcaklık ölçmek için kullanılan araç termometredir.
Isıttığınız veya soğuttuğunuz bir sıvının en doğru sıcaklık değerini elde etmek için, termometreyi yüzeyin en az 10-15 cm altına daldırın. Ardından, cihazın kabın tabanından en az 5 cm yukarıda ve kabın kenarından en az bir termometre genişliği kadar uzakta olduğuna dikkat ederek termometreyi dikkatlice kıskaçla sabitleyin veya başka bir şekilde yerinde tutun.
Sıvıyı karıştırıyorsanız, termometrenin manyetik karıştırıcı tarafından çarpılmayacağından emin olun; aksi takdirde tehlikeli bir durumla karşılaşabilirsiniz.
Sıvı sıcaklık göstergesini göz hizasında okuyun. Termometreyi okurken, gövde boyunca dokunmamaya özen gösterin. Vücut ısınız ölçümün doğruluğunu etkileyebilir.
Şimdi, birçok deneyin gerçekleştirildiği bazı yaygın sıcaklıkları gözden geçirelim.
Laboratuvarınızda yürütülen çalışmanın türüne ve laboratuvarınızda bulunan ekipman tipine bağlı olarak, odanın ortam sıcaklığı normalde yaklaşık 20-25 ˚C arasındadır. Aksi belirtilmediği sürece, bir deneyin oda sıcaklığında gerçekleştirileceği genel olarak varsayılabilir. Oda sıcaklığı, protokollerde genellikle tahmin edeceğiniz üzere RT şeklinde kısaltılır.
Bir "in vitro" prosedürle karşılaştığınızda, deney genellikle 37˚C'de yürütülmelidir. "In vitro" olarak gerçekleştirilen süreçler doku, hücre veya ekstratları içerir ve bir organizmanın içindeki koşulları taklit etmeye çalışır. Öte yandan, in vivo deneyler sağlam organizma ile gerçekleştirilir ve memelilerin vücut sıcaklığı 37 ˚C olduğu için "in vitro" hücre kültürü deneyleri tipik olarak bu sıcaklıkta yürütülür.
56°C üzerindeki sıcaklıklarda proteinler açılır; bu işleme denatürasyon denir. Bu durum, bir tespit antikorunun proteinleri daha kolay tanımlayabilmesi için protein şeklinin değiştirilmesini sağlamak da dahil olmak üzere çeşitli nedenlerle faydalı olabilir.
Su ve bazı su bazlı veya sulu çözeltiler yaklaşık 100 °C'de kaynar. Bu sıcaklık aynı zamanda, oda sıcaklığında çözünmesi zor olan reaktifleri çözmek için uygun bir sıcaklık olabilir.
Genellikle, deneysel bir protokol belirli adımların belirli bir sıcaklıkta gerçekleştirilmesi gerektiğini belirtir.
Tezgah üstünde yürütülen deneyler yaklaşık 20-25°C'de, yani oda sıcaklığında gerçekleştirilir.
Oda sıcaklığında çoğu reaktif ve hücre kültürü stabildir; ancak bazı reaktiflerin ışıktan korunması gerekir, bazı deneylerin steriliteyi korumak için çeker ocak altında yapılması gerekir ve bazı analizlerin, deneysel dokuların veya reaktiflerin kurumasını önlemek için nemli bir hazne içinde gerçekleştirilmesi gerekir.
Protokolünüzde "hücreleri veya belirli bir reaktifle çözdürün" ifadesi yer aldığında, yavaş ve eşit bir ısıtma için 37 °C'ye ayarlanmış bir su banyosu kullanın. Protokolünüz daha fazla ısıtma belirtmediği sürece, son buz parçası erir erimez örneğinizi su banyosundan çıkardığınızdan emin olun.
Eğer protokol "önceden ısıtılmış besiyeri" veya diğer önceden ısıtılmış reaktiflerin kullanılması gerektiğini belirtiyorsa, çözeltileri sabit, sıcak – ancak kaynar olmayan – bir sıcaklıkta tutmak için 37 °C su banyosu da kullanışlıdır.
Çözeltilerinizi çevredeki sudan kaynaklanan kontaminasyondan veya seyrelmeden korumak için, dondurulmuş hücre alikotlarını çözdürmek veya mikrolitre hacmindeki çözeltileri ısıtmak amacıyla yüzer köpük raf kullanın. Daha güvenli bir tüp tutucu tercih ediliyorsa, bu amaç için metal bir raf da kullanılabilir.
Daha büyük sıvı hacimleri için, örnekleri su banyosunda dik tutmak amacıyla plastik raflar veya metal klempler kullanılabilir.
Memeli hücre kültürlerini inkübe etmeniz istendiğinde, bu genellikle hücrelerin %5 karbondioksit atmosferine sahip ve inkübatörü yaklaşık %95 nemde tutan bir su tepsisi bulunan 37 °C'lik bir inkübatöre yerleştirilmesi anlamına gelir.
Bakteriyel hücreler de bazen 37°C'de, bir inkübatörde veya sıcak bir odada kültüre edilir. Bakteriyel hücre kültürü sayılarını hızla artırmak ve kültür süresini kısaltmak istediğinizde çalkalayan bir inkübatör kullanılabilir. Sıvı kültürleri çalkalayarak, bakterilerin tüpün dibine çökmemelerini ve böylece yeterli besin almalarını sağlarsınız.
Çok hızlı ısıtma veya kaynatma işlemleri için geleneksel olarak ısıtıcı plakalar kullanılmıştır. Artık mikrodalga fırınlar laboratuvarlarda yaygın olarak bulunduğu için, sulu çözeltileri hızlıca kaynatmak amacıyla bunlar da kullanılabilir.
Şimdi laboratuvarda bazı şeyleri ısıtmak isteyebileceğiniz nedenlerden bazılarına göz atalım.
Isı ile sabitleme, bakteriyel hücreler veya biyomakromoleküller gibi belirli biyolojik örnekleri boyama işleminden önce cam lam üzerine sabitlemenin basit ve hızlı bir yoludur. Burada, ısı ile sabitleme sayesinde elde edilen bazı kromozom yayılımlarını görebilirsiniz.
Katı bir reaktifi çözmeye çalıştığınız sıvı çözeltinin ısıtılarak karıştırılması, burada çözülmekte olan toz agar örneğinde olduğu gibi, işlemi hızlandırmaya yardımcı olabilir.
Birçok canlı hücre deneyi en az bir inkübasyon süresi gerektirir. Incucyte inkübatörü, kültür kapları inkübatörden çıkarıldığında hücrelerde meydana gelebilecek pertürbasyonlar olmadan, hücre büyümesinin gerçek zamanlı görüntülenmesine olanak tanır.
Canlı hücre görüntüleme masaüstü mikroskoplarla da gerçekleştirilebilir. Burada hücreler bir görüntüleme inkübatöründe tutulurken, deneysel bir stimülüs eklenmesi öncesindeki ve sonrasındaki aktiviteleri izlenmekte ve daha sonra analiz edilmek üzere kaydedilmektedir.
Laboratuvar sıcaklıklarının 23°C ve üzerinde düzenlenmesine ilişkin JoVE giriş videosunu izlediniz.
Bu videoda şunları inceledik: hücrelerin, hayvanların ve çözeltilerin ısıtılması için kullanılan en yaygın laboratuvar ekipmanlarından bazıları, hücreleri veya çözeltileri ısıtmak için hangi ekipmanın kullanılacağına nasıl karar verileceği ve bir deney sırasında sıcaklığın düzenlenmesi gerekebilecek bazı farklı nedenler. İzlediğiniz için teşekkürler ve termometrenizi dikkatli kullanmayı unutmayın!
Laboratuvarda sıcaklığı düzenlemenin birçok yolu vardır. Bazen reaktiflerin ısıtılması, hücre kültürlerinin optimal büyüme için belirli sıcaklıklarda tutulması ve cerrahi prosedürler sırasında veya sonrasında hayvan vücut sıcaklığının düzenlenmesi gerekir. Bu video, bir bilim insanının maddeleri ısıtmak isteyebileceği bazı yöntem ve nedenlere ve numuneleri ile reaktifleri ısıtmak için kullanılan belirli sıcaklıklara daha yakından bakacaktır.
Öncelikle, yaygın laboratuvar prosedürlerinde sıcaklıktan genellikle Celsius veya Santigrat derece cinsinden bahsettiğimizi belirtmek önemlidir. Bilimde kullanılan diğer metrik ölçüm birimleri gibi, Celsius derecesi de sıcaklık ölçümü için Uluslararası Birimler Sistemi standartlarından biridir.
Muhtemelen zaten bildiğiniz gibi, sıcaklık ölçmek için kullanılan araç termometredir.
Isıttığınız veya soğuttuğunuz bir sıvının en doğru sıcaklık değerini elde etmek için, termometreyi yüzeyin en az 10-15 cm altına daldırın. Ardından, cihazın kabın tabanından en az 5 cm yukarıda ve kabın kenarından en az bir termometre genişliği kadar uzakta olduğuna dikkat ederek termometreyi dikkatlice kıskaçla sabitleyin veya başka bir şekilde yerinde tutun.
Sıvıyı karıştırıyorsanız, termometrenin manyetik karıştırıcı tarafından çarpılmayacağından emin olun; aksi takdirde tehlikeli bir durumla karşılaşabilirsiniz.
Sıvı sıcaklık göstergesini göz hizasında okuyun. Termometreyi okurken, gövde boyunca dokunmamaya özen gösterin. Vücut ısınız ölçümün doğruluğunu etkileyebilir.
Şimdi, birçok deneyin gerçekleştirildiği bazı yaygın sıcaklıkları gözden geçirelim.
Laboratuvarınızda yürütülen çalışmanın türüne ve laboratuvarınızda bulunan ekipman tipine bağlı olarak, odanın ortam sıcaklığı normalde yaklaşık 20-25 ˚C arasındadır. Aksi belirtilmediği sürece, bir deneyin oda sıcaklığında gerçekleştirileceği genel olarak varsayılabilir. Oda sıcaklığı, protokollerde genellikle tahmin edeceğiniz üzere RT şeklinde kısaltılır.
Bir "in vitro" prosedürle karşılaştığınızda, deney genellikle 37˚C'de yürütülmelidir. "In vitro" olarak gerçekleştirilen süreçler doku, hücre veya ekstratları içerir ve bir organizmanın içindeki koşulları taklit etmeye çalışır. Öte yandan, in vivo deneyler sağlam organizma ile gerçekleştirilir ve memelilerin vücut sıcaklığı 37 ˚C olduğu için "in vitro" hücre kültürü deneyleri tipik olarak bu sıcaklıkta yürütülür.
56°C üzerindeki sıcaklıklarda proteinler açılır; bu işleme denatürasyon denir. Bu durum, bir tespit antikorunun proteinleri daha kolay tanımlayabilmesi için protein şeklinin değiştirilmesini sağlamak da dahil olmak üzere çeşitli nedenlerle faydalı olabilir.
Su ve bazı su bazlı veya sulu çözeltiler yaklaşık 100 °C'de kaynar. Bu sıcaklık aynı zamanda, oda sıcaklığında çözünmesi zor olan reaktifleri çözmek için uygun bir sıcaklık olabilir.
Genellikle, deneysel bir protokol belirli adımların belirli bir sıcaklıkta gerçekleştirilmesi gerektiğini belirtir.
Tezgah üstünde yürütülen deneyler yaklaşık 20-25°C'de, yani oda sıcaklığında gerçekleştirilir.
Oda sıcaklığında çoğu reaktif ve hücre kültürü stabildir; ancak bazı reaktiflerin ışıktan korunması gerekir, bazı deneylerin steriliteyi korumak için çeker ocak altında yapılması gerekir ve bazı analizlerin, deneysel dokuların veya reaktiflerin kurumasını önlemek için nemli bir hazne içinde gerçekleştirilmesi gerekir.
Protokolünüzde "hücreleri veya belirli bir reaktifle çözdürün" ifadesi yer aldığında, yavaş ve eşit bir ısıtma için 37 °C'ye ayarlanmış bir su banyosu kullanın. Protokolünüz daha fazla ısıtma belirtmediği sürece, son buz parçası erir erimez örneğinizi su banyosundan çıkardığınızdan emin olun.
Eğer protokol "önceden ısıtılmış besiyeri" veya diğer önceden ısıtılmış reaktiflerin kullanılması gerektiğini belirtiyorsa, çözeltileri sabit, sıcak – ancak kaynar olmayan – bir sıcaklıkta tutmak için 37 °C su banyosu da kullanışlıdır.
Çözeltilerinizi çevredeki sudan kaynaklanan kontaminasyondan veya seyrelmeden korumak için, dondurulmuş hücre alikotlarını çözdürmek veya mikrolitre hacmindeki çözeltileri ısıtmak amacıyla yüzer köpük raf kullanın. Daha güvenli bir tüp tutucu tercih ediliyorsa, bu amaç için metal bir raf da kullanılabilir.
Daha büyük sıvı hacimleri için, örnekleri su banyosunda dik tutmak amacıyla plastik raflar veya metal klempler kullanılabilir.
Memeli hücre kültürlerini inkübe etmeniz istendiğinde, bu genellikle hücrelerin %5 karbondioksit atmosferine sahip ve inkübatörü yaklaşık %95 nemde tutan bir su tepsisi bulunan 37 °C'lik bir inkübatöre yerleştirilmesi anlamına gelir.
Bakteriyel hücreler de bazen 37°C'de, bir inkübatörde veya sıcak bir odada kültüre edilir. Bakteriyel hücre kültürü sayılarını hızla artırmak ve kültür süresini kısaltmak istediğinizde çalkalayan bir inkübatör kullanılabilir. Sıvı kültürleri çalkalayarak, bakterilerin tüpün dibine çökmemelerini ve böylece yeterli besin almalarını sağlarsınız.
Çok hızlı ısıtma veya kaynatma işlemleri için geleneksel olarak ısıtıcı plakalar kullanılmıştır. Artık mikrodalga fırınlar laboratuvarlarda yaygın olarak bulunduğu için, sulu çözeltileri hızlıca kaynatmak amacıyla bunlar da kullanılabilir.
Şimdi laboratuvarda bazı şeyleri ısıtmak isteyebileceğiniz nedenlerden bazılarına göz atalım.
Isı ile sabitleme, bakteriyel hücreler veya biyomakromoleküller gibi belirli biyolojik örnekleri boyama işleminden önce cam lam üzerine sabitlemenin basit ve hızlı bir yoludur. Burada, ısı ile sabitleme sayesinde elde edilen bazı kromozom yayılımlarını görebilirsiniz.
Katı bir reaktifi çözmeye çalıştığınız sıvı çözeltinin ısıtılarak karıştırılması, burada çözülmekte olan toz agar örneğinde olduğu gibi, işlemi hızlandırmaya yardımcı olabilir.
Birçok canlı hücre deneyi en az bir inkübasyon süresi gerektirir. Incucyte inkübatörü, kültür kapları inkübatörden çıkarıldığında hücrelerde meydana gelebilecek pertürbasyonlar olmadan, hücre büyümesinin gerçek zamanlı görüntülenmesine olanak tanır.
Canlı hücre görüntüleme masaüstü mikroskoplarla da gerçekleştirilebilir. Burada hücreler bir görüntüleme inkübatöründe tutulurken, deneysel bir stimülüs eklenmesi öncesindeki ve sonrasındaki aktiviteleri izlenmekte ve daha sonra analiz edilmek üzere kaydedilmektedir.
Laboratuvar sıcaklıklarının 23°C ve üzerinde düzenlenmesine ilişkin JoVE giriş videosunu izlediniz.
Bu videoda şunları inceledik: hücrelerin, hayvanların ve çözeltilerin ısıtılması için kullanılan en yaygın laboratuvar ekipmanlarından bazıları, hücreleri veya çözeltileri ısıtmak için hangi ekipmanın kullanılacağına nasıl karar verileceği ve bir deney sırasında sıcaklığın düzenlenmesi gerekebilecek bazı farklı nedenler. İzlediğiniz için teşekkürler ve termometrenizi dikkatli kullanmayı unutmayın!
View the full transcript and gain access to JoVE Science Education videos
Q1: Why do scientists need to regulate temperature in laboratory experiments?
Temperature regulation is essential because cells require specific conditions for optimal growth, proteins need controlled heating for structural modification, and reagents must be heated to dissolve or activate. For example, mammalian cell cultures are maintained at 37°C to mimic body temperature, while temperatures above 56°C denature proteins for identification purposes. Different experimental procedures demand different thermal conditions to ensure accurate results.
Q2: What is the proper technique for measuring temperature in a stirring liquid?
Immerse the thermometer at least 10-15 centimeters below the liquid surface, positioning it at least 5 centimeters above the container bottom and one thermometer width from the side. Secure it carefully to avoid contact with the stir bar. Read the temperature indicator at eye level without touching the thermometer shaft, as body heat can compromise accuracy.
Q3: What temperature range is considered room temperature in laboratory protocols?
Room temperature, abbreviated as RT in protocols, typically ranges from 20-25°C and represents the ambient temperature of most laboratory environments. Unless a protocol specifies otherwise, experiments are assumed to be performed at room temperature. At this temperature, most reagents and cell cultures remain stable, though some require protection from light or specific environmental conditions.
Q4: How should you thaw frozen cells or pre-warm reagents in the laboratory?
Use a 37°C water bath for slow, even warming of thawed cells or pre-warmed reagents. Remove samples immediately after the last ice fragment melts to prevent overheating. For contamination prevention, use foam floating racks or metal racks to hold tubes, keeping solutions separate from surrounding water while maintaining consistent warm temperatures.
Q5: What equipment is used to culture mammalian cells at optimal temperature?
A 37°C incubator with 5% carbon dioxide atmosphere and a water tray maintaining approximately 95% humidity is standard for mammalian cell culture. This environment mimics physiological conditions. For bacterial cultures, a 37°C incubator or warm room suffices, while shaking incubators rapidly expand bacterial populations by ensuring adequate nutrient distribution and preventing cell sedimentation.
Q6: What is heat fixation and why is it used in sample preparation?
Heat fixation is a quick method to affix biological samples like bacterial cells or biomacromolecules to glass slides before staining. This technique enables preparation of chromosomal spreads and other microscopic specimens. It provides a simple, rapid alternative to chemical fixation while preserving sample integrity for subsequent histological sample preparation for light microscopy.
Q7: How does heating help dissolve difficult reagents in laboratory solutions?
Heated stirring accelerates dissolution of solid reagents that resist dissolving at room temperature, such as powdered agar. Heat increases molecular motion and solubility. Water and aqueous solutions boil at approximately 100°C, making this an effective temperature for dissolving stubborn reagents. This technique speeds up solution preparation while maintaining reagent integrity.
Bu videodaki bölümler
0:00
Overview
0:41
Using the Thermometer: A Brief Overview
2:15
Important Laboratory Temperatures (Above 23 °C)
4:01
Keeping Things Warm
6:39
Applications
7:49
Summary