İndirimli Itraconazole Konsantrasyon ve Süreleri Tedavisi Başarılı mısınız Batrachochytrium dendrobatidis Amfibi Enfeksiyon

Bu prosedürün genel amacı, amfibi Kitt mantarı, Bera key tridium, dendro, he veya BD ile enfekte olmuş amfibileri triazolde antifungal kemoterapi kullanarak tedavi etmektir. Bu, ilk olarak Behçet otu kültürlerinin büyütülmesi ve hayvanların mantar patojeni ile aşılanmasıyla gerçekleştirilir. İkinci adım, BD enfeksiyonunu sağlamak için deri sürüntüleri üzerinde DNA ekstraksiyonu ve QPCR kullanarak hayvanları test etmektir.

Daha sonra, enfekte hayvanlar, altı gün boyunca günde beş dakika boyunca% 0.0025 ekonazol çözeltisi ile yıkanarak tedavi edilir. Son adım, hayvanın başarılı bir şekilde tedavi edilmesini sağlamak için tedavinin tamamlanmasından sonra en az dört hafta boyunca deri takasları üzerinde QPCR analizi yaparak tedavi edilen hayvanların enfeksiyon durumunu izlemektir, bu prosedür, antifungal itrakonazolün azaltılmış konsantrasyonunun ve daha kısa tedavi süresinin BD ile enfekte olmuş hayvanların tedavisi için etkili olduğunu göstermektedir. Bu tedavi rejimini, 11 gün boyunca% 0.01'lik bir itrakonazol çözeltisi olan önerilen tedavi dozuna göre kullanmanın ana avantajı, önerilen dozun dörtte birinin azaltılmış bir konsantrasyonunun ve altı güne düşürülmüş bir tedavi süresinin Behçet hastalığı enfeksiyonunu iyileştirmede hala etkili olmasıdır, ancak aynı zamanda önerilen tedavi dozunu kullanmanın olumsuz yan etkilerini en aza indirir.

BD'yi metin protokolünde belirtildiği gibi triton suyunda inkübe ettikten ve Zo spor hareketini kontrol ettikten sonra, her plakayı beş mililitre yaşlı musluk suyu ile doldurun ve ZO sporlarının ortama girmesine izin vermek için 10 dakika bekleyin. Ardından, Zo Spor süspansiyonunu portatif bir kaba dökün. ZO spor konsantrasyonunu bir hemo sitometre ile tahmin edin ve burada gösterilen Latoria vei Alpina gibi bir hayvanı aşılamak için karışımı, yaş musluk suyu ile üç mililitrede bir kez 10 ila altı konsantrasyona seyreltin.

50 mililitrelik bir kabın üzerinde tutun ve üç mililitre aşı karışımını havalandırmasının üzerine dökün. Daha sonra hayvanı, aşıdan gelen akışla birlikte kabın içine yerleştirin. Kabın üzerine bir kapak yerleştirin ve enfeksiyonu sağlamak için hayvanı 24 saat boyunca aşılama kabında bırakın.

BD patojeni ile kontaminasyonu önlemek için. Eski eldivenleri çıkarın ve atmadan önce otoklavlanacak şekilde yerleştirin. Giydikten sonra, bir sonraki hayvanı aşılamak için yeni bir çift eldiven devam eder.

24 saatlik aşılamadan sonra, hayvanları iki hafta boyunca dezenfekte edilmiş terrarialarına geri koyun. Solüsyonu iki hafta sonra %10 çamaşır suyuna getirerek tüm sıvı atıkları atmadan önce dezenfekte etmeyi unutmayın. Hayvanları steril bir pamuklu çubukla sürünerek başarılı BD enfeksiyonunu test edin.

Swabı vuruşlar sırasında ve vuruşlar arasında hafifçe döndürün. Toplam 45 vuruş için her iki tarafta, her uylukta ve dört uzuvun her birinde venter üzerinde beş kez sürün. Swabları eksi 20 santigrat derecede 1,5 mililitrelik mikro tüplerde saklayın.

Ticari olarak temin edilebilen bir DNA izolasyon kiti kullanarak sürüntülerden genomik DNA'yı çıkarın ve metin protokolünde belirtildiği gibi QPCR gerçekleştirin. Metin protokolünde tarif edildiği gibi üç itrakonazol dozunun her biri için bir tane olmak üzere üç tedavi banyosu hazırlayın. Sonraki yer, bireysel amfibiler dezenfekte edildi.

50 mililitre, 35 mililitre arıtma çözeltisi içeren kaplar olabilir. Hayvanlar arasında eldiven değiştirmeyi unutmayın, hayvanların beş dakika boyunca tamamen kaplandığından emin olmak için kabı ara sıra hafifçe döndürün. Beş dakika sonra hayvanları dezenfekte edilmiş alanlarına geri koyun.

Beş dakikalık tedaviyi beş gün daha günlük olarak tekrarlayın. Tedavi bittikten bir hafta sonra ve enfeksiyonun temizlendiğinden emin olmak için dört hafta boyunca haftada bir kez hayvanları Behçet hastalığı enfeksiyonu açısından tekrar test edin. Tedavi tamamlandıktan sonra bile, hayvanlara hala bir kontaminasyon riski varmış gibi davranılması gerektiğini unutmayın.

Hayvanların, enfeksiyondan sonra en az bir ay boyunca bölgeden ayrı tutulmaları gerekir. Tedavi başarısız olursa tekrarlanmalıdır. Farklı türler ve farklı yaşam evreleri enfeksiyona ve tedavi rejimlerine farklı yanıtlar verir ve bu nedenle tedavi geniş çapta uygulanmadan önce denenmelidir.

BD biyolojik bir tehlike olduğundan, teria ve tedavi kaplarını% 10'luk bir ağartma solüsyonunda yıkayarak bireysel terivaları haftalık olarak dezenfekte edin. En az 30 saniye banyo yapın, ağartıcıyı iki durulama ve su ile yıkayın ve kurbağaların hayatta kalmasını tekrar kullanmadan önce kapların 24 saat kurumasını bekleyin. Burada 11 günlük Behçet hastalığı tedavisinden sonraki veya altı günlük Behçet hastalığı tedavisi gösterilmektedir.

Siyah oklar tedavinin son gününü gösterir. Düz çizgiler kontrol gruplarının hayatta kaldığını gösterir. Düz siyah çizgiler Behçet hastalığı pozitif olan ancak Behçet hastalığı tedavisi almayan hayvanlar içindir.

Ve düz gri çizgiler Behçet hastalığı negatif olan ve Behçet hastalığı tedavisi almayan hayvanlar içindir. Kırık çizgiler, belirtilen ekonazol konsantrasyonunu alan tedavi gruplarının hayatta kaldığını göstermektedir. Altı gün boyunca kuzen nebülizörde% 0.0025 ile tedavi edilen tüm hayvanlar, tedavi bittikten dört hafta sonra BH negatifti ve bu nedenle bu tedavinin başarılı olduğu kabul edildi.

Ek olarak, bu ekonazol tedavisi dozu, Behçet hastalığı pozitif kontrollerle karşılaştırıldığında mortalite açısından önemli ölçüde farklılık göstermedi. 11 gün boyunca% 0.01 ve% 0.005 ekonazol tedavileri, Behçet pozitif kontrollere kıyasla mortalitede önemli bir artışa neden oldu. Mantar patojeni BD'nin eldiven giyme ve değiştirme, otoklavlama, tüm katı atıklar ve dezenfekte etme gibi biyolojik bir tehlike olduğunu unutmayın.

Bu prosedür izlenirken tüm sıvı atıklar gerçekleştirilmelidir.