Farelerde Korku Yastıkları Trace

Aşağıdaki deneyin genel amacı, iz küre koşullandırması kullanarak farelerde hipokampal bağımlı öğrenmeyi ve hafızayı değerlendirmektir. Bu, önce hayvanın işitsel bir tonu caydırıcı bir uyaranla ilişkilendirmesi için eğitilmesiyle elde edilir. Ertesi gün, hayvan yeni bir bağlama yerleştirilir ve tona tepki olarak donma davranışı kaydedilir.

Üçüncü gün, hayvan orijinal bağlamına geri döndürülür ve donma davranışı kaydedilir. Sonuçlar, şok tonu eşleştirmesi ile eğitilen farelerin, şoku almayanlara göre daha fazla donma davranışı sergilediğini göstermektedir. Bu yöntem, hipokampal bağımlı öğrenme ve hafıza ve fareler hakkında bilgi sağlamak için kullanılabilir ve özellikle transgenik ve nakavt hayvanların çalışmasında kullanıldığında yararlıdır.

Aşağıdaki prosedür, daha büyük bir ses azaltma odasının içine yerleştirilmiş bir korku koşullandırma odasında gerçekleştirilir. Haznenin kapısı kapalı konumda, ışıkların istenen aydınlatma seviyesine ulaşması için, doğru yerleştirilmişse, ışık seviyesi gösterge ışığı kapalı olmalıdır. Her bölmenin içinde tutarlı bir arka plan gürültüsü seviyesini doğrulamak için bir ses ölçer kullanın.

Ardından, egzersiz sırasında kullanılan tonu kalibre edin. Şok seviyesini kalibre etmek için harici bir kalibrasyon cihazı kullanın. Bir ucu bir çubuğa ve diğerini üç veya dört çubuğun üzerine yerleştirin.

Şoku uygulamak için şok jeneratörünü kullanın ve doğru seviyeye ulaşılana kadar kalibre edin. Her korku koşullandırma odası için bu adımı tekrarlayın. Cihaz hazırlandıktan sonra, aşırı kullanımı azaltmak için denekleri test odasından ayrı bir bekleme odasına aktarın.

Testten önce, testten en az 30 dakika önce veya bir gün önce kuyrukları etiketleyin. Başlamaya hazır olduğunuzda, test faresini korku koşullandırma odasına taşımak için temiz, etiketli bir kafese aktarın. Fareyi hazneye yerleştirin, kapıyı kapatın ve yazılım programını başlatın.

Eğitimin ilk gününde, farelerin odayı üç dakika boyunca keşfetmesine izin verilir. Yazılım daha sonra 22. bir ton ve ardından hafif bir ayak şokuyla sona eren 22. bir iz aralığı sunar. Caydırıcı uyaranları aldıklarını doğrulamak için deneği gözlemleyin.

202. denemeler arası aralık, beş koşullandırma denemesini ayırır. Denemelerden sonra, hayvanı çıkarmadan önce bir dakika boyunca test odasında kalmasına izin verin, hayvanı transfer kafesine geri koyun ve bekletme odasına geri dönün. Ev kafeslerinde ayrı ayrı test edilecek başka fareler varsa, tüm fareler testi tamamlayana kadar fareyi barındırın.

Bir sonraki hayvana hazırlık olarak test odasını %30 izopropanol ile temizleyin. Tüm fareler eğitilene kadar bu adımları tekrarlayın. Tüm fareleri koloni odalarına geri koyun.

Kohorttaki son fare ertesi gün test edildikten sonra hayvanlar test edilir. İz korku hafızası için. Bu günde, bağlamlarını değiştirmek için transfer kafeslerinin yataklarını parçalanmış kağıtla değiştirin.

Odanın bağlamı da değişti. Dokusunu ve görünümünü değiştirmek için zemine şeffaf bir akrilik ekin altına bir köpük tabaka yerleştirin. Test alanının içine akrilik bir bölücü yerleştirin.

Vanilya özünü zeminin altındaki bir peynir altı suyu teknesine koyarak kokuyu değiştirin. Bu gün yerleştirin, hazneyi her fare arasında% 30 izopropanol yerine% 70 etanol ile temizleyin. Hazır olduğunuzda, fareyi test odasına yerleştirin ve programı başlatın.

Oturum, iki dakikalık bir başlangıç periyodu ile başlar ve ardından üç adet 22. ton sunumu yapılır. Her ton sunumu arasında 222. denemeler arası aralık vardır. Seans bittikten sonra, fareleri ev kafeslerine geri koyun ve ertesi gün teste hazırlanmak için tüm hayvanlar test edilene kadar devam edin.

Birinci gün kullanılanla aynı bağlamı geri yükleyin. Hazneyi %30 izopropanol ile temizleyin. Bağlamsal koşullandırma üçüncü günde yapılır.

İlk günkü aynı transfer kafeslerini kullanarak, test faresini bekleme odasından alın. Fareyi test odasına yerleştirin ve ardından bağlamsal belleği test etmek için programı başlatın. Sekiz dakika boyunca donma davranışını kaydetmek için bir program çalıştırın.

Bu süreden sonra, fareyi ev kafesine geri koyun ve daha önce gösterildiği gibi teste devam edin, temsili sonuçlar, eğitim seansı boyunca şok tonu eşleşmesini alan hayvanlarda donma davranışında bir artış olduğunu göstermektedir. Yeni bir bağlamda, caydırıcı şok uyaranını alan fareler, temel ton izlemesi ve denemeler arası aralık sırasında şoku almayan farelere kıyasla daha fazla donmaya sahipti. Orijinal bağlama geri dönüldüğünde, caydırıcı şok uyaranını alan hayvanlar, sekiz dakikalık süre boyunca sürekli olarak daha yüksek donma davranışı gösterdi.

Bu videoyu izledikten sonra, hipokampal bağımlı öğrenmeyi, hafızayı ve fareleri anlamak için iz korkusu koşullandırmasının nasıl kullanılacağını iyi anlamış olmalısınız.