Uzaktan Ekstremite İskemik Önkoşullanma: Kemirgenler Bir Nöroprotektiftir Tekniği

Bu prosedürün genel amacı, uzak dokuları sonraki strese karşı koşullandıran arka bacakta iskemi sağlamaktır. Örneğin, ışık yaralanmasına karşı retina. Bu, önce manuel Ingle anne manometresinin kalibre edilmesiyle gerçekleştirilir.

Daha sonra, hayvan uyuşturulur ve bir ısıtma yastığına yerleştirilir. Daha sonra hayvanın arka bacağı uzatılır ve manşet yerine yerleştirilir. Son olarak, uzak iskemi, manşetin pompa ile şişirilmesi, manşetin söndürülmesi ve işlemin ikinci kez tekrarlanmasıyla gerçekleştirilir.

Sonuç olarak, ışık yaralanmasından önce uygulandığında, retina fonksiyonunda ve apoptoz geçiren fotoreseptör sayısında bir iyileşme göstermek için uzak iskemi kullanılır. Bu yöntem, gerçek zamanlı cilt sıcaklığı takibi yapmak için uzaktan iskemik ön koşullandırma ile kendini korumanın nasıl indüklendiği gibi sinirbilim alanındaki temel soruları yanıtlayabilir. Sıcaklık kayıt yazılımını açın, sıcaklık ayarını 30 ila 35 santigrat derece arasında ayarlayın ve 250 ila 550 gramlık bir sıçan için iki numara yenidoğan kol manşeti kullanarak örnekleme sıklığını her 100 milisaniyede bir ayarlayın, gerekirse bir adaptör kullanarak manşeti fome manometresine bağlayın.

Ardından, hava tahliye valfini gevşeterek veya manşet borusunu adaptörden çıkararak manşeti söndürün. Boruda basınç kalmadığından ve manometre iğnesinin oval dikdörtgenin içinde sıfırda durduğundan emin olun. Ardından boru, manometre ve öksürük arasındaki basıncı kontrol etmek için.

Manometre 100 miligram cıva okuyana kadar manşeti şişirmek için şişirme ampulünün yumuşak pompalarını kullanın. Basıncın sabit kaldığından emin olduktan sonra, hava karardıktan sonra hava tahliye valfini yavaşça açarak manşeti söndürün ve hayvanı metin protokolüne göre uyarlayın. Yeterli kas olduğunu doğrulamak için üst arka uzuvu sıkıştırarak iyi bir kas tonusuna sahip olduğunu onaylayın.

Hayvanı metin protokolüne göre sakinleştirdikten sonra, bacağı uzatarak ve ayağın alt tarafındaki cildi sıkıştırarak anestezi derinliğini kontrol edin. Sonra suni gözyaşı uygulayın. Fareyi, alt ekstremitelerin ayak pedleri yukarı bakacak şekilde yüzüstü pozisyonda bir ısıtma yastığı veya sirkülasyonlu su ısıtıcı borusu üzerine yerleştirin.

Deri sıcaklık probunu uygulamak için, iskemiye uğrayacak sıçanın bacağını uzatın ve cilt probunu, sıcaklık probu ile cilt arasındaki teması en üst düzeye çıkaracak şekilde konumlandırarak ayak pedine sıkıca yerleştirin. Ardından probu yapıştırmak için kağıt bant kullanın. Sıcaklık kayıt yazılımındaki sıcaklığı bir ila iki dakika boyunca takip ederek cilt probu yerleşimini kontrol edin.

Cilt sıcaklığının 30 ila 34 santigrat derece arasında olduğundan ve sabit kaldığından emin olun. Aksi takdirde, uzak iskemi gerçekleştirmek için probu ayarlayın. Sönük bir manşetle başlayın ve hava basınç valfinin kapalı olduğundan emin olun.

Bacağınızı uzatın ve manşeti üst arka bacakta gevşek bir şekilde sarın. Bacağınızı uzatmak için işaret parmağınızı ve başparmağınızı kullanın ve gevşemiş manşeti yerinde tutmak için alt rakamları kullanın. Şimdi, manşet basıncını 160 milimetre cıvaya yükseltin.

Doğru basınca ulaşıldığında, zamanlayıcı ve ayak sıcaklığı kayıtlarını başlatın. Beş dakikalık sabit basınçtan sonra ayak sıcaklığı iki santigrat derece düşmeli, istenen manşet basıncını korumak ve iskemi boyunca manşetin hayvanın dizinin üzerindeki konumunu korumak için şişirme ampulünü kısa aralıklarla tekrar tekrar pompalamalıdır. Beş dakika boyunca sürekli olarak uzak iskemi verin.

Ardından, uzak iskemiyi tekrarlamadan önce hava basınç valfini beş dakikalık bir reperfüzyon için serbest bırakın. Prosedür tamamlandığında, hava basınç valfini gevşeterek manşet basıncını söndürün. İskemi protokolü boyunca sıcaklık değişimini kontrol edin.

Ardından manşeti serbest bırakın. Hayvanı bir ısıtma yastığına yerleştirin ve ambulatuvar olana kadar izlemeye devam edin. Hayvan yürürken, onu yuvaya geri koyun.

Son olarak hafif yaralanma gerçekleştirin ve tünel tahlilini gerçekleştirin. Metin protokolüne göre, burada açıkça görüldüğü gibi, diz üzerine yerleştirilen ve 160 milimetre cıvanın üzerine çıkarılan bir kan basıncı manşonu, arka bacaklara giden kan akışını durdurur. Kan akışının olmaması, ayak sıcaklığında, hayvanın çekirdek sıcaklığından daha düşük bir azalmaya neden oldu ve bu, RIP için gerekli koşulla tutarlı olarak manşet söndürüldükten sonra yükseldi.

Bu şekilde, normal loş yükseltilmiş bir sıçandan alınan karanlığa uyarlanmış elektroretinogram veya ERG, ışık yaralanmasından bir hafta sonra parlak bir flaşa büyük bir fotoreseptör ve iç retinal yanıt gösterdi. ERG kayıtları, fotoreseptörlerin kaybını yansıtan, kontrollere göre genlikte ciddi bir azalma gösterdi, ancak iskemi fotoreseptörleri ışık hasarından korumadan hemen önce iki ila beş dakikalık bir reperfüzyon protokolü kullanarak arka uzuvyu iskemi ile ön koşullandırdı. Bu panel, R-I-P-E-R-G genliklerinin, A dalgasında hafif bir azalma ile tek başına hafif yaralanmadan daha büyük olduğunu göstermektedir.

Son olarak, dizin altına yerleştirilen bir manşet, fotoreseptörleri burada görülen azaltılmış ERG genliklerinde yansıtıldığı gibi ışık yaralanmalarından korumaz. Endojen nöroproteksiyon mekanizmaları nelerdir ve CNS hasarı ve dejenerasyonundan kaynaklanan fonksiyonu iyileştirmek için uzaktan iskemi nasıl uygulanabilir gibi ek soruları yanıtlamak için uzaktan iskemik ön koşullandırma gibi yöntemler uygulanabilir.