27 Ekim 2015
Kapillaroskopi, mikrosirkülasyondaki kılcal damarları doğrudan görselleştirmek için non-invaziv, verimli, nispeten ucuz ve öğrenmesi kolay bir metodolojidir. Bununla birlikte, bugüne kadar yalnızca bir yayın, kapillaroskopi verilerinin miktarını belirlemek için mevcut olan karmaşık bir yazılım programının güvenilirliğini açıklamaktadır. Burada, standartlaştırılmış bir algoritma kullanarak kılcal damarları ölçmek için basit ve güvenilir bir protokol sunuyoruz.
Bu prosedürün genel amacı, tırnak kütikülünün hemen altındaki deri bölgesinde milimetre kare başına düşen kılcal damar sayısını ölçmektir. Bu, önce kütikülün altındaki tırnak yatağının tek renkli bir resmini çekerek gerçekleştirilir. İkinci adım, görüntüyü bir bilgisayar görüntüleme programına aktarmaktır.
Daha sonra, görüntüler manipüle edilir Kılcal damarları daha iyi görselleştirmek için son adım, bir milimetre kare içindeki tüm kılcal damarları tanımlamak ve saymaktır. Sonuç olarak, görüntü manipülasyonu, bir bireyin kılcal damarlarının miktarını ve morfolojisini göstermek için kullanılır. Bu yöntem, hipertansiyon, diyabet ve diğer hastalıkların mikro dolaşımı nasıl etkileyebileceği gibi kardiyovasküler alandaki temel soruları yanıtlamaya yardımcı olabilir.
Tek renkli bir dijital kamera kullanarak, daha önce açıklandığı gibi kılcal görüntüler elde edin. Ardından, kılcal görüntüleri elde etmek için kullanılan aynı kamera ve büyütme görüntüleme koşullarını kullanarak milimetre işaretli bir alay konusu olanın kalibrasyon görüntülerini alın. Alay görüntüsünü bilgisayar görüntüleme programına aktarın ve cetvelin fotoğrafındaki bir milimetrelik bir çizgideki piksel sayısını ölçün.
Bu sayıyı not edin ve bir milimetreye bir milimetrelik bir bölgedeki piksel sayısını hesaplayın. Ardından, kılcal görüntülerden birini açın, kılcal damarları koyulaştırın ve en uygun histogramı kullanarak görüntüyü ayarlayarak arka planı aydınlatın. Ardından, ekranın üst kısmında bir milimetreye bir milimetrelik bir ilgi alanı oluşturmak için açılır menüdeki ROI oluştur komutunu kullanın.
İlgilenilen bölgeyi en net kılcal halkalara sahip konuma sürükleyin ve konumlandırın. İlgilenilen bölgenin, kılcal halkaların tepesi bölgenin en üstünde yer alacak şekilde yerleştirildiğinden emin olun. Protokolün bu adımının tekrarlanabilirliğinin ve standardizasyonunun anahtarı, bir milimetre karelik ilgi alanı kutusunun uygun şekilde yerleştirilmesidir.
Standardizasyonu korumak için iyi bir kural, kutuyu görüntünün kılcal halkalarının tepesine veya ucuna yerleştirmektir. Doğru bir şekilde konumlandırıldıktan sonra, ROI'ye tıklayın ve ardından görünen açılır menüden kırp'a tıklayın, ardından görüntüyü düzleştirin, böylece gelecekteki tüm görüntü ayarlamaları görüntüye eşit olarak uygulanacaktır. Ardından, kılcal damarların maksimum düzeyde görselleştirilmesi için görüntünün kontrastını 75'e yükseltin.
Ayrıca kılcal damarların kenarlarını yumuşatmak için görüntüyü benekleyin. Kılcal damarlar siyah ve arka plan beyaz olacak şekilde histogramı en uygun modele ayarlayarak görüntü kontrastını sonlandırın. Her görüntüde, program tarafından sayılacak nesneler olarak tanınacak hedef nesne özelliğini kullanarak iyi tanımlanmış bir kılcal damarın bir parçasını manuel olarak seçin.
Ardından, sayma algoritması tarafından göz ardı edilmesi gereken alanlara referans olarak arka plan özelliğini kullanarak arka planın küçük bir bölümünü seçin. Arka plan gürültüsünün kılcal damarlar olarak sayılmasını önlemek için sayılan nesnelerin minimum çapını beş piksele ayarlayın. Ardından, her bir birey için görüntüdeki tüm kılcal damarları anında saymak için sayma işlevini kullanın.
Daha güvenilir bir değerlendirme elde etmek için ortalamayı üç ila dört görüntü arasında sayın. Zaman kazanmak için, bir veya daha fazla görüntüde belirli bir işlem dizisini otomatik olarak gerçekleştirmek için bir makro oluşturun ve önce bu videoda gerçekleştirilen ve açıklanan adımlara ve işlemlere göre makroyu adlandırmak için makroyu kaydet'i seçin. Ardından, makro kayıt yaparken görüntü işleme adımlarını gerçekleştirin.
Makroyu gelecekteki resimlerde kullanırken, makroyu çalıştır'a tıklamanız yeterlidir ve program kaydedilen geliştirmeleri istenen görüntülere otomatik olarak uygulayacaktır. Kullanıcı girişi gerektiren tek adım, görüntünün nerede kırpılacağını seçmektir. Optimum şekilde işlenmiş bir görüntü 30 saniye içinde sayılabilir ve kılcal damarları arka plandan ve tek tek kılcal damarları birbirinden net bir şekilde ayırt eder.
Son geliştirilmiş görüntü burada gösterilmektedir. Bu görüntü için belirlenen toplam sayı, bir kez ustalaştıktan sonra milimetre kare başına 54 kılcal damardı. Bu teknik, 20 dakika içinde 12 görüntüyü ölçmek ve manipüle etmek için kullanılabilir.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Kapilleroskopi, mikrosirkülasyondaki kapillerlerin görüntülenmesi için kullanılan non-invaziv bir yöntemdir. Bu makale, standardize edilmiş bir algoritma kullanarak kapillerlerin kantitasyonuna yönelik güvenilir bir protokol sunmaktadır.
Bilgisayarlı tırnak yatağı kapillaroskopi kullanılarak kılcal damar yoğunluğunun standardize edilmiş nicelendirmesi, erken keşif ve translasyonel araştırmalarda tekrarlanabilir mikrovasküler değerlendirme için kritik bir ihtiyacı karşılamaktadır. Bu yöntem, sübjektiviteyi ve kullanıcı yorgunluğunu azaltarak, hastalık modelleme ve hedef doğrulama ile ilgili mikrodolaşımın güvenilir ve kantitatif değerlendirmesine olanak tanır. Yöntemin tekrarlanabilirliği ve verimliliği, kardiyovasküler ve metabolik hastalık araştırma süreçlerindeki temel kırılma noktalarında sağlam karar verme süreçlerini destekler.
Bu bilgisayarlı kapilleroskopi yöntemi, keşiften preklinik aşamaya kadar olan sürece entegre edilerek hem erken hipotez testlerini hem de translasyonel biyobelirteç uyumluluğunu desteklemektedir.