Farelerde Minimal İnvaziv Enine Aort Konstrüksiyon

Bu prosedürün genel amacı, yapay ventilasyon gerektirmeyen basit bir cerrahi işlemle transvers aortik arkı daraltarak sol ventrikül hipertrofisini indüklemektir. Bu yöntem; miyokardiyal yeniden şekillenme, kardiyak hipertrofi, apoptoz ve fibrozis ile sol ventrikül basınç yüklenme durumları hakkında kardiyoloji alanındaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu tekniğin temel avantajı, ventilatör ve trakeal entübasyon ihtiyacını ortadan kaldırırken standart transvers aortik daraltmanın temel özelliklerini korumasıdır.

Prosedüre başlamadan önce, iki ila dört adet 30 gauge iğnenin uçlarını kıvırmak için bir iğne tutucu kullanın ve iğneleri ayrı pamuklu aplikatörlere monte edin. Ardından, 27 gauge bir iğnenin ucunu körelletin ve iğne tutucuyu kullanarak ucunu 90 derece bükün. Daha sonra, 0,4 mm'lik bir ara parçası oluşturmak için ucu sert bir yüzey üzerinde düzeltin.

Ayak parmağı sıkıştırmasına yanıt verilmediği gözlemlenerek uygun sedasyon seviyesi onaylandıktan sonra, hayvanın gözlerine pomad uygulayın ve fareyi 37 degrees Celsius sıcaklığındaki bir ısıtma pedine sırt üstü pozisyonda yerleştirin. Uzuvları cerrahi bantla ısıtma pedine sabitleyin. Ardından, cildi ardışık olarak üç kez alkol ve povidon-iyodin çözeltili mendillerle dezenfekte edin ve hayvanın üzerine operasyon alanı açık bırakılmış steril bir örtü serin.

Ligasyon prosedürüne başlamak için, boyun ve göğsün orta hattındaki deriyi açmak için steril bir bistüri kullanın. Ardından, bir diseksiyon mikroskobu altında, bağ dokularını nazikçe ayırmak ve tiroid bezini başa doğru çekmek için küt uçlu makas kullanın. Kavisli iğneleri kullanarak, trakea üzerindeki kas tabakasını orta hatta, hayvanın her iki yanına doğru ayırın ve sternumu ikinci kaburgaya kadar yaklaşık beş milimetre boyunca kesmek için küt uçlu makasları kullanın.

İnsizyonu kavisli pensle açın ve timus loblarını alt göğüs duvarından ayırmak için kavisli bir iğne kullanın. Bu aşamada transvers aortik ark ve iki karotis arteri net bir şekilde görülecektir. Kavisli iğneyi arkın altına yerleştirin ve ucuyla damar duvarı ile diğer taraftaki bağ dokusu arasında bir perforasyon oluşturun.

İğneyi kullanarak aortik arkın altına 6-0 monofilaman sütür yerleştirin ve önceden hazırlanan ara parçayı döngünün içine yerleştirin. Sütürü çift düğümle sabitleyin ve ara parçayı nazikçe çıkarın. Düğümün başarıyla sıkıştığını onayladıktan sonra sütür uçlarını kesin ve göğüs duvarını basit ayrı dikiş tekniğiyle 6-0 ipek sütür kullanarak kapatın; ardından cildi 6-0 monofilaman sütür ile sürekli dikiş tekniğiyle kapatın.

Ardından, sütür bölgesine povidon-iyot çözeltisi uygulayın ve hayvanı iyileşme ve ameliyat sonrası izleme için önceden ısıtılmış bir kafese yerleştirin. Bir hafta sonra, deney hayvanının patilerine elektrot jeli uygulayın ve elektrotlarla birlikte 37 °C'ye ısıtılmış bir ısıtma pedine bantlayın. Sonrasında, farenin göğüs bölgesine ultrason jeli uygulayın ve yüksek frekanslı bir ultrason sisteminde B-modunu seçin.

40 megahertz'lik bir MS550D probu kullanarak sol ventrikülü belirleyin. Ardından, M-modunda, sistolik ve diyastolik duvar kalınlığını ölçün. Dallanma noktasından önce sol ortak karotis arterini belirlemek için B-moduna dönün ve akışı değerlendirmek için darbeli dalga ve renkli doppler kullanın; görüntüleri uygun şekilde daha sonraki analizler için kaydedin.

Fare sol yan pozisyona (left decubitus) gelecek şekilde hayvan tutma platformunu en sola doğru eğin ve probu, başa paralel olan konuma göre 30 derecelik bir açıyla parasternal pozisyona yerleştirin. Aortik arkı bulmak için x ve y torklarını ayarlayın ve darlık bölgesini daha görünür kılmak için renkli doppler modunu kullanarak darlığın yerini belirleyin. Pulsatili dalga ve renkli doppler kullanarak, kanın aortik arktan ayrılan iki karotis arter arasından aktığı noktadaki pik akım hızını ölçün.

Ardından, hayvanın tamamen iyileşene kadar izleme altında, yüzüstü pozisyonda bir ısıtıcı ped üzerinde dinlenmesine izin verin. Minimal invaziv transvers aort darlığı veya MTAC, ligasyon uygulanan farelerde belirgin şekilde görünür daralmış bir transvers aort ve darlık bölgesinden geçen artmış bir pik akış hızı ile sol ventrikül basınç aşırı yüklenmesini güvenilir bir şekilde oluşturur. Karşılaştırmalı olarak, sham operasyon uygulanan hayvanda belirgin bir darlık görülmez ve pik akış hızı normaldir.

Ligasyonun bir sonucu olarak, sağ karotis arterinde akış hızı önemli ölçüde artar ve asendan aort ile kalpte basınç birikerek sol ventrikül hipertrofisine yol açar; bu durum sol ortak karotis arterindeki akışı önemli ölçüde azaltır. Buna karşın, sham operasyonu yapılan farede sağ ve sol karotis arterlerinde neredeyse aynı kan akışı gözlemlenir. Ortaya çıkan hipertrofi ile ilişkili parametreler, MTAC ligasyonu yapılan farelerin belirgin şekilde büyümüş ve deforme olmuş kalplerinde ve bunların azalmış genel sağkalım oranlarında kolaylıkla gözlemlenebilir.

Bu değişiklikler, ligasyon uygulanmamış hayvanlarla karşılaştırıldığında, MTAC farelerinde artan kalp kası hücresi boyutu ve fibrozis dahil olmak üzere hücresel düzeyde daha belirgin şekilde gözlemlenmektedir. Uzmanlaşıldığında, bu teknik uygun şekilde gerçekleştirildiği takdirde beş ila on dakika içinde tamamlanabilir. Bu prosedür uygulanırken, damarlara zarar vermemeye dikkat etmek önemlidir.

Bu videoyu izledikten sonra, yapay ventilasyon gerektirmeyen basit bir cerrahi prosedür kullanarak, transvers aort ark konstriksiyonu yoluyla sol ventriküler hipertrofinin nasıl indükleneceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.