Fare Buzağılarına Tutarlı Masaj Benzeri Pertürbasyonların Uygulanması ve Bunun Sonucu Kas içi Basınç Değişikliklerinin İzlenmesi

Protokolümüz sistemlerde ve mekanizmalarda yararlı olabilir. Ve doğru bilgi fiziksel stres ve masaj etkisini gösterir. Yerel döngüsel tamamlama sistemimiz çok daha basittir.

Yerel ekleme için geleneksel yöntemler gerekli değildir. Diz eklemleri uzatılmış ve ayak bileği eklemleri plantar esnemiş ile supine pozisyonda ikili arka ekstremitelere cerrahi bant uygulayın. L4-5 omurga seviyesinde gövde üzerinde bir alüminyum tel yerleştirin ve spiral her dönüş arasında beş milimetre boşluklar ile arka ekstremiteetrafında bir spiral yapılandırma tel bobin.

Kablolamadan kaçma olasılığını en aza indirmek için, 90 derecelik bir kaçırma pozisyonunda kalça eklemlerini hareketsiz hale getirmek için tel konfigürasyonunu manuel olarak ayarlayın. Sonra tam iyileşme kadar izleme ile bu ev kafesi için fare dönün. İntramüsküler gastroknemius kas basıncını ölçmek için anestezili fareyi yatkın konuma getirin ve arka baldırın derisini tıraş edin, depilate edin ve yarı sterilize edin.

Dezenfekte deride iki milimetrelik bir kesi yapmak için bir neşter kullanın. Ve cilt yüzeyine 150 ila 170 derecelik bir açıyla gastroknemius kas içine 20 gauge indwelling iğne takın. Daha sonra, bir kılavuz olarak iğne plastik kılıf kullanarak, gastroknemius kas orta karın bir kan basıncı telemetre sensörü yerleştirin.

4-O naylon dikiş ile cilt içine. Daha sonra, bir dakika için baldır kas yerel silindirik sıkıştırma uygulamak için birkaç farklı silindirik birim ağırlıkları kullanın. Ve biyolojik sinyal analizi için uygun yazılımı kullanarak kas içi basıncı izleyin.

Lokal döngüsel sıkıştırma tedavisi için arka ekstremite kablolama anestezili fare kopma. Ve hayvanı yatkın bir konuma yerleştirin. Diz eklemleri uzatılır ve ayak bileği eklemleri yukarı bakacak şekilde plantar fleksör böylece arka ekstremiteayarlayın.

Ve dikey bir silindirik ağırlık birimi hareket, yastıklı bir yastık ile kaplı, bir hertz bir hertz üzerinde günde 30 dakika yedi gün boyunca. Sıkıştırma her günlük nöbetsonra kendi kafese hayvan dönmeden önce fare arka bacaklar rewire. Deneyin sonunda posterior baldır yüzeyini depilate ve tibiofibular kemik gastroknemius kaslarının ayrılmasını sağlamak için bir deri kesi yapmak.

Hızlı bir şekilde optimum kesme sıcaklığı bileşik çözeltisi hasat kas dokusu dondurmak. Ve cam slaytlar üzerinde gastroknemius kaslarının bölümleri elde etmek için bir kriyostat kullanın. İmmünohistokimyasal etiketleme için çözülme ve her slayt doku bölümleri etrafında bir halka çizmek için bir hidrofobik kalem kullanmadan önce oda sıcaklığında hava kurutma tarafından bölümleri dehydrate.

Daha sonra, slaytları nem odasına yerleştirin. Ve her iki tarafa engelleme tampon 100 mikrolitre ekleyin. Oda sıcaklığında 30 dakika sonra pbs-t iki 5 dakikalık yıkar ile slaytlar durulayın, oda sıcaklığında bir gecede ilgi birincil antikor 100 mikrolitre ile bölümleri etiketlemeden önce.

Ertesi sabah slaytları PBS-T'de 3 kez yıkama başına 5 dakika yıkayın. Ve numuneleri ışıktan korunan oda sıcaklığında 1 saat boyunca uygun bir ikincil antikorla etiketleyin. Kuluçka sonunda, gösterdiği gibi taze PBS-T slaytlar 3 kez yıkayın.

Ve çekirdekleri 100 mikrolitre DAPI ile karanlıkta oda sıcaklığında üç dakika boyunca lekeleyin. Daha sonra kaydırağı üç kez daha yıkayın. Ve uyumlu bir montaj ortamı ve kapak fişleri ile örnekleri monte.

Histomorfometrik analiz için slaytları floresan mikroskobun sahnesine yerleştirin ve örnekleri uygun filtrelerde 20-X öznel olarak görüntüleyin. Daha sonra, görüntü analizi yazılımında her bir minofiberin kesit alanını ölçer ve deneysel işaretleri ifade eden hücre sayısını sayın. Gastroknemius miyofinin kesit alanı arka ekstremite immobilizasyonu ile önemli ölçüde azalır.

Ayrıca, immünofloresan boyama analizi, immobilize arka ekstremitelerin gastroknemius kas dokularında MCP-1 ve TNF-alfa'yı ifade eden hücrelerin önemli ölçüde arttığını ortaya koymaktadır. Birlikte, pozitif F4/80 ile boyanmış hücrelerde artış ile, arka ekstremite immobilizasyonu baldır kas atrofisi kışkırtmak için görünür, lokal inflamatuar yanıtları içeren, makrofaj birikimi de dahil olmak üzere. Silindirik ünitenin ağırlığını değiştirerek test edilen birkaç farklı yerel konjonktürel sıkıştırma büyüklüğü arasında, 50 mililitrecicıkasküler basınç dalgalarına karşılık gelen sıkıştırma, miyofiber kesit bölgesinde immobilizasyonkaynaklı azalmayı en verimli şekilde hafifletmek ve gastroknemius kaslarında makrofaj birikimini artırmak için en verimli şekilde görünür.

7 gün boyunca günde 30 dakika boyunca 1 hertz uygulanan 66 gram lokal döngüsel sıkıştırma, gastroknemius kaslarının miyofiber kesit bölgesinde gözlenen immobilizasyon kaynaklı düşüşleri önemli ölçüde hafifletir. Daha fazla, lokal döngüsel sıkıştırma kısmen tempers immobilizasyon triceps surae kasların sözleşme kuvvetinde azalır. Buna ek olarak, lokal döngüsel sıkıştırma f4/80 pozitif artış tempers, TNF-alfa pozitif, ve MCP-1 immobilize arka ekstremitegastroknemius kas dokusunda bir pozitif hücreler.

Yaklaşımımız hastada kas artışı ve önleyici prosedür için potansiyel stratejimiz için bilimsel bir temel sağlayacaktır. Fare fiziksel hareketsizliğin sınırlı olduğunu buldu. Sistemimizi kullanarak, kasların çoğunda mekanik olmayan hastaların çoğunun hastada mekanik olmadığını değerlendirmeye başladık.

Bunu yapmak için ılımlı yerel endüstriyel bir şekilde mükemmel bir immobilizasyon kas atrofisi kaynaklı yapar.