3 Ocak 2008
Bu video makalede, istikrarlı ve denetlenebilir geometrileri odorant degradelerin inşaat sağlayan yeni bir yöntem açıklanmaktadır. Biz kısaca bu gradyanlar koku alma kusurları (tam ve kısmi anosmi) ekrana nasıl kullanılabileceğini göstermek ve daha ince kemotaksis davranış özelliklerini incelemek için.
Merhaba, benim adım Matt Lui. Rockefeller Üniversitesi'nde Leslie Sal'ın laboratuvarında doktora sonrası araştırmacıyım. Bugün sizlere, larval kemotaksisi incelemek için yürüttüğümüz deneyler hakkında bilgi vermek istiyorum.
İlgilendiğimiz problem oldukça basittir. Aslında bu düzenekte temsil edilmiştir. Bir grup Joseph Larvayı bu agar yüzeyine aktardım.
Bu ortam oldukça elverişsizdir ve hayvanlar açlık sınırına gelmişlerdir. Bu hayvanların bir şekilde en yakın besin kaynağını bulmaları gerekecektir; burada larvaları çekecek koku yayan bazı muzlar bulunmaktadır. Bu ortam kemotaksi davranışını incelemek için ideal değildir, bu nedenle yapılacak ilk iyileştirme muzun bir kimyasal ile değiştirilmesi olacaktır.
Bu kimyasal izobutil asetat olup muzda baskın olan aromalardan biridir. Bu nedenle yapay aromamız budur ve bunu kullanarak koku uyarımı üzerinde çok daha iyi bir kontrole sahip oluruz. Bir sonraki iyileştirme, kapalı bir ortam kullanmak ve diğer dağılımdaki dalgalanmaları bu şekilde önlemeye çalışmaktır.
Laboratuvarda uzun süredir kullandığımız analiz yöntemi şöyledir. Bu, tabanında agar yüzeyi bulunan bir Petri kabıdır. Agar, larvaları nemli tuttuğu için kemotaksi çalışmaları için idealdir.
Plakanın iki tarafında, Teflon'dan yapılmış diğer bir kapak bulacaksınız; şimdi yapacağımız işlem, bir tarafa izam asetat eklemek, diğer tarafa ise hiçbir şey eklememek olacaktır. Bu işlem tamamlandıktan sonraki fikir, petri kabını kapatmak, kokunun yayılması için bir süre beklemek ve ardından kabı açmaktır. Buraya bir hayvan yerleştiriyoruz ve hayvanın belirli bir süre boyunca hareket etmesine izin veriyoruz.
Bu analiz, kabın bir tarafına theodor eklenmesiyle, oldukça hızlı bir şekilde oluşturulan ve test süresince stabil kalacak bir gradyan olduğu varsayımına dayanmaktadır. Şu anki temel sorun, plakada bu gradyanın mevcut olduğunun hiç kanıtlanmamış olmasıdır. Theodor eklemesinden çok kısa bir süre sonra, theodorun plakada gradyanın çok sığ kalacağı şekilde homojen olarak dağıldığı veya gradyanın oluşması için birkaç dakikanın gerektiği pekâlâ mümkün olabilir.
Bu durum elbette öncelikle kullanılan teodorun buhar basıncına bağlı olacaktır. İkinci konu ise deney sırasında nelerin nicelendirildiği ile ilgilidir. Bir hayvanın buradan, X noktasından başladığını ve üç dakika sonra bu uç plakada, kırmızı X noktasında bulunduğunu varsayalım. Bu durumda iki olası yaklaşım mevcuttur.
Yapabileceğiniz bir şey, hayvanın yalnızca belirli bir süre, örneğin üç veya beş dakika sonraki son konumunu kaydetmektir. Bu durumda elde edeceğiniz tek bilgi başlangıç ve bitiş konumları olacaktır; ancak biz, hayvanın zaman içindeki davranışına ilişkin iyi bir çözünürlüğe sahip olmanın önemli olduğuna inanıyoruz. Örneğin, bir hayvan başlangıç konumundan bitiş konumuna burada olduğu gibi neredeyse hiç hareket etmeden gitmiş olabilir veya deneme sona ermeden önce zamanın önemli bir kısmında çevredeki bölgeyi ziyaret edip geri dönmüş olabilir.
Bu iki durumdan çıkaracağımız sonuçlar birbirinden oldukça farklıdır. Bir durumda hayvan uyarana yanıt vermemiş olabilirken, diğer durumda kesinlikle yanıt vermiştir. Elde etmeye çalıştığımız iki iyileştirme; birincisi, arenadaki diğer gradyanın şeklini ve stabilitesini kontrol etmektir.
İkinci olarak, hayvanın davranışlarını gerçek zamanlı olarak takip edin ve tüm bu bilgileri kaydedin. Bir sonraki sekansta Sylvia, seri dilüsyonu nasıl hazırladığımızı size sunacak. Benim adım S ti.
Materyal birimi için VAs laboratuvarında çalışan bir araştırma asistanıyım. Bugün size, hayvanları takip etmek için kullandığımız oda sistemi için malzemelerin nasıl hazırlanacağını göstereceğim. Oda sistemimizle ilgili temel konu, havada dağıtılmış koku kullanıyor olmamızdır.
Bu durum, örneğin kullandığımız agar plakaları düz değilse, deneyler arasında konsantrasyon dalgalanmaları meydana gelebileceği ve bunun da sisteme gürültü ekleyeceği anlamına gelir. Bu nedenle, sistemdeki gürültüyü azaltmaya yönelik size bazı küçük ipuçları göstereceğim. Koku seyreltmenizi hazırlamak için gerekli malzemeler; tercih edilen, ışığa duyarlı kokular kullandığınız durumlar için koyu renkli bir cam kavanoz ve ilgilendiğiniz kokudan bir alikottur.
Bu alikotu hazırlamak için cam pipetler ve uygun bir mekanik pipet pompası. Ardından, parafin yağı pipet uçları, standart bir otomatik pipet ve seyreltme için küçük vialler. Tekrar belirtmek gerekirse, bunların cam ve tercihen koyu renkli olması gerekir; son olarak, hassas ölçümler yapmak ve deneyler arasındaki varyasyonu azaltmak için bir terazi.
Kokular yüksek derecede uçucu olduğundan ve bazıları toksik olduğundan, bu işlemler bir çeker ocak içerisinde gerçekleştirilir. Bir koku seyreltmesi hazırlamanın ilk adımı, seyreltilecek kokudan alikotlar oluşturmaktır. Doğru seyreltmeler hazırlamak ve deneyler arasındaki varyasyonu minimize etmek için her şeyin tartılması gereklidir.
Etiketleme ile başlayarak, 1 M konsantrasyonunda etil bütirat hazırlayacağız. İlk olarak, parafin yağını hazırlayın. Parafin yağı çok viskoz olduğu için, pipet ucunu parafin yağına mümkün olduğunca az daldırmak, sadece hava kabarcığı oluşturmadan parafin yağını çekebilecek kadar daldırmak önemlidir.
Ardından, şişenin kenarındaki fazla parafin yağının silinmesi uygundur. Parafin yağı vizkoz olduğu için, yağın şişeye yavaşça akıtılması bir kez daha önem taşımaktadır. Parafin yağını şişeye pipetledikten sonra, pipet ucunun dibinde daha fazla yağ birikeceği için ucu hemen atmayın.
Seyreltme işlemine başlamadan önce, ekleyeceğiniz parafin yağının hacmini ve ağırlığını, aynı şekilde koku maddesinin de ağırlığını önceden belirlediğiniz bir hesaplama çizelgesi hazırlamanız faydalı olacaktır. Bu sayede, ihtiyacınız olan tüm parafin yağını ve koku maddesini terazi üzerinde kontrol edebilirsiniz. Gerekirse, doğru ağırlığa ulaşana kadar daha fazla parafin yağı ekleyip yeniden ölçüm yapınız.
Doğru ana yağ ağırlığını elde ettiğinizde, tek yapmanız gereken aynı prensipleri kullanarak koku maddesini eklemektir. Tamam. Burada, larvaların izleme için nasıl hazırlanacağını göstereceğim.
Genellikle altı günlük larvalar kullanıyoruz. Bunu yapmamızın nedeni, hem yazılımımız tarafından kolayca algılanabilecek kadar büyük olmaları hem de hala çok aktif olmalarıdır. Larvaların takipte kullanılmak için çok yaşlı olup olmadığını anlamak için sadece duvarlara tırmanan larvaların olup olmadığını kontrol etmeniz yeterlidir. Eğer duvarlara tırmanan larvalar varsa, çok yaşlanmışlar demektir ve özellikle aktif olmayacaklardır.
Larvaları hazırlamanın ilk adımı, onları %15 sukroz çözeltisine daldırmaktır. %15 sukroz kullanmamızın nedeni, larvaların bu çözeltide yüzmesi, besinin ise ya kısmen çözünmesi ya da dibe çökmesidir. Şişenizin veya vialinizin ağzından yaklaşık bir inçten biraz daha az mesafe kalacak kadar sukroz dökün.
Ardından bir spatula alın. Larvaların yukarı doğru yüzdüğünü görebilirsiniz; yemin içine doğru kazmış olan hayvanları yerinden çıkarmak için yemle hafifçe karıştırın, onları yemden ayırmak için biraz döndürün ve ardından birkaç dakika bekletin. Yem ve larvalar yeterince ayrıldığında, önceden etiketlenmiş bir Petri kabı alın ve onları kabın derin kısmına boşaltın.
Petri kabının kapağını saklayın; çünkü burayı suyla dolduracak ve takip edilen larvaları koyacağınız bir kap olarak kullanarak hangilerini takip ettiğinizi ve hangilerini etmediğinizi ayırabileceksiniz. Larvaları petri kabına döktükten sonra, sükroza adapte olmaları ve açlık durumuna ulaşmaları için 30 dakika beklemeniz gerekir. Bu, larvaların adapte olduğu bu 30 dakikalık süre sonunda takip düzeneği içerisinde daha iyi davranış sergileyecekleri anlamına gelir.
Sükroz aşaması, izleme için plakaları hazırlamak adına uygun bir zamandır. Bunlar 96 kuyucuklu plakaların kapaklarıdır. Bunları ayrı olarak satın alabilirsiniz; buradaki ise önceden ısıtılmış %3'lük agar çözeltisidir.
Larvaların kazmasını önlediği, ancak aynı zamanda üzerlerinde yürüyebilecekleri ve her plaka yüzeyinde nemli kalabilecekleri yeterli yoğunlukta olduğu için %3 kullanıyoruz. 25 ml agar pipetlemelisiniz. Jel içerisinde büyük hava kabarcıkları oluşmamasına dikkat etmek önemlidir.
Plakaların düz bir yüzeye yerleştirilmesi de önemlidir, aksi takdirde eğimli jeller oluşabilir ve bu durum larvaların davranışlarını etkileyebilir. Jeller donduktan sonra, üzerlerini kapatıp kurumalarını önlemek için streç filmle sararız. Bu işlem, plakaların birkaç gün boyunca takip için uygun durumda kalmasını sağlar.
Bu bölümde, size daha önce bahsettiğim petri kabı analizinden biraz farklı olan davranışsal analizimizi sunacağım. İhtiyacınız olanlar, 96 kuyucuklu plak kapakları ve agar tabakası içeren kapaklardır. Analizler, üst üste dizilmiş üç kapaktan oluşur.
İlk katman boştur ve yalnızca sistemi üzerinde bulunduğu yüzeyden izole etmek için kullanılır. İkinci katman Diego agro yüzeyi içerir. Hayvanlar bu yüzeye yerleştirilecektir ve şimdi size göstereceğim üzere, tabağa theodor ekliyoruz.
Theodor'u her yüklediğinizde taze ve yeni bir kapak kullanmak önemlidir. Bu, bir deneyden diğerine herhangi bir kontaminasyon oluşmasını önlemek içindir. Ayrıca başka bir dilüsyon işlemine de ihtiyacınız olacaktır.
Normalde yükleme için boya kullanmıyoruz, ancak burada açıklama amacıyla kullanacağım. Bu, yüksek konsantrasyonlu bir boyadır. Diğeri ise çok seyreltilmiştir; amacım bir hat boyunca gradyan oluşturmak olacaktır.
Şu ifadeyi söyleyin ve konsantrasyonun soldan sağa doğru artmasını istiyoruz. Bunu başarmak için, kondansasyon halkasına artan konsantrasyonda yerleştirilmiş sıralı birkaç damlacık kullanacağım. En uç kısma yerleştirilecek olan en yüksek konsantrasyon ile başlıyorum.
Halkanın içine yaymak önemlidir. Şimdi, ilkine göre iki kat seyreltilmiş olan bir sonraki konsantrasyonla devam ediyorum ve onu bu halkaya yerleştiriyorum. Böylece, hayır, altı damlam var.
Birincisi, örneğin bir konsantrasyonu içerir. İkincisi 0,5 konsantrasyonundadır, yani birincinin yarısı kadardır. Üçüncüsü 0,25 konsantrasyonundadır ve bu şekilde devam eder.
Böylece hat boyunca bir geometrik seri elde etmiş olduk. Bir sonraki adım, bu kapağın AAL yüzeyinde ters çevrilmesini içerir ve artık yüzey gerilimi sayesinde tüm damlacıklar kapağın üst kısmında asılı kalır. Plakadaki tüm konsantrasyonu ölçmek için kızılötesi spektroskopiye dayalı bir teknik geliştiriyoruz.
Bu tekniği uygulayarak, burada deodorant hattı boyunca bir geometrik seri oluşturduğunuzda, burada gösterildiği gibi uzunluk boyunca üstel olarak artan bir teor konsantrasyonu elde ettiğimizi ve plakanın genişliği boyunca, kokulu madde hattının tam altında zirve yapan bir profile sahip olduğumuzu gösterebildik. Gradyanın gerçek geometrisi şu şekilde görünmektedir.
Havadaki teodor konsantrasyonunu düşündüğünüzde, iyi olan şey, gradyan geometrisinin en az 15 dakika boyunca stabil olduğunu gösterebilmiş olmamızdır. Üst kapak kapatıldıktan sonra, gradyanın oluşması için 30 saniye bekleriz. Ardından hayvanı arenaya yerleştiririz.
Hayvan, üçüncü ve dördüncü pozisyonlar arasındaki diğer uç hattının altına yerleştirilir; larvaları sükroz çözeltisinden agar yüzeyine aktarmak için küçük bir iğne kullanırız. Aktarım, bir larvanın iğne başına dolanmasıyla gerçekleştirilir. Kapağı hızla açarız ve larva agar yüzeyine bırakılır.
Ardından kapağı kapatıyoruz. Kapağın açık kaldığı süreyi minimuma indirmek önemlidir. Sonrasında, hayvan hareketlerini üç veya beş dakika boyunca kaydedersiniz.
Asıl kayıt gerçekleştirilir. Bu takip düzeneği ile bilgisayara bağlı bir kameramız bulunmaktadır. Hayvan hareketleri hakkındaki bilgileri toplamak ve bunları dijital bir dosya olarak saklamak için kullandığımız görüntü takip yazılımı Nordis firmasına ait Aton vision'dır.
Şimdi davranışsal deneye başlamak üzereyiz. Aro tabakalı kapağımız ve dilüsyonlarımız hazır.
Diego ilk kapakta takılı kaldı. theodor yüklemeden önce, her tüpün vortekslenmesi önemlidir. Seyreltmelerimizi, en düşük olanı solda ve en yüksek olanı burada sağda olacak şekilde kullanıyoruz.
Altı damlanın tamamı plakaya aynı anda yüklenecektir. Koku kaybını önlemek için burada çok kanallı bir pipet kullanmaktayız; her bir dilüsyon örneğinden 10 µL koku alınır ve kokular aynı anda yüklenir. Yükleme işleminden sonra, kapak agar yüzeyinin üzerine ters çevrilerek kapatılır.
Daha önce gösterdiğim gibi, gradyan son 30 saniye içinde plaka üzerinde oluşturuldu. Şimdi Diego yüzeyine bir hayvan yerleştireceğim. Hayvan yerleştirilir yerleştirilmez kayda başlıyorum.
Hayvan burada ve şu anda hareketi takip ediliyor. Gördüğünüz gibi, hayvan koku hattını takip ediyor ve gradyanın en yüksek konsantrasyon noktasına doğru ilerliyor. Konsantrasyonun soldan sağa doğru eksponansiyel bir biçimde arttığını unutmayın.
Gördüğünüz üzere, hareket yönü sürekli olarak düzeltilmektedir. Uyarıcıya göre hayvan, gradyanın en yüksek konsantrasyon noktasında ulaşmış durumdadır ve onu plakadan çıkarırız. Aynı bireyi doğrudan iki kez takip etmediğimizden emin olmak için hayvan başka bir plakaya aktarılır.
Yeni bir larva ekleyip yeni bir kayıt başlattıktan sonra, izleme işlemi için uyguladığımız kurallar şunlardır. Hayvan, plakanın en yüksek konsantrasyon satırına, yani şuradaki şu satıra ulaştığı anda izlemeyi durdururuz. Ayrıca, herhangi bir etkileşimden kaçınmak istediğimiz için, bir hayvan duvara çarptığında izleme işlemi kesintiye uğrar.
Ele aldığımız ilk soru oldukça basitti. Bilmek istediğimiz şey, bir hayvanın belirli bir konsantrasyondaki kokuyu alıp alamayacağıydı. Böyle bir testi gerçekleştirmek için tipik olarak, birkaç kaynak yerine tek bir koku kaynağı kullanırız.
Bu, sizin teodor uç damlacığındaki konsantrasyonu değiştirme konusunda bir serbestlik derecesine sahip olmanızı sağlar. Örneğin burada yüksek konsantrasyonlu bir damlacığınız, burada ise düşük konsantrasyonlu bir damlacığınız var. Tipik olarak yaptığımız şey, hayvanı teodor damlacığının hemen altındaki Diego yüzeyine yerleştirmek ve hayvanın damlacığın varlığını tespit edip edemediğini ve çevresinde kalıp kalmadığını gözlemlemektir.
Şimdi analizimizi daha ileri düzeyde kullanmak istiyorum. Elinizde belirli bir düzende tek bir damlacık olduğunu ve burada üst üste binmiş halde kaydedilmiş birkaç yörünge olduğunu hayal edin; burada bunlardan üç tane var. Bu yeşil izi oluşturan bir bireyiniz var.
Burada daha az merkezi olan turuncu bir iz ve kaynağın etrafında görünüşte daireler çizen bir hayvanı temsil eden pembe bir yörünge bulunmaktadır. Yörüngelerin detayları hakkında başlangıç aşamasında çok fazla bilgi olduğunu düşünüyoruz. Bu nedenle, yörüngeyi bir dizi konum olarak Matlab'e aktarıyoruz ve analizleri Matlab ile gerçekleştiriyoruz.
Burada, muhtemelen zamanın bir fonksiyonu olarak kaynağa olan mesafe yer almaktadır. Daha önce gösterilen üç yörüngeden; kaynağa çok yakın kalan yeşil yörünge ve önemli ölçüde daha fazla gürültü sergileyen turuncu yörünge bulunmaktadır.
Ardından, hayvanın optimal konsantrasyona karşılık geldiği varsayılan bir mesafede kalmak için kaynaktan uzaklaştığını gösteren bu mor yörünge görülmektedir. Burada, koku alamayan hayvanların 10 yörüngesinin gösterimini görüyorsunuz. Bunlar mutantlar veya koku alamayan üç B mutantlarıdır.
Ve gördüğünüz gibi, tüm bu yörüngeler hayvanların koku kaynağını tespit edemediklerini ve oradan ayrıldıklarını göstermektedir. Şimdi tam tersine, burada beyaz fareler için ardışık 10 yörünge kaydettik. Bu hayvanlar elbette koku alabildikleri için, gördüğünüz üzere hepsinin deodorant kaynağının hemen altında toplandıklarını görebilirsiniz.
Az önce sunulan 20 yörünge, aslında hayvanların kimlikleri bilinmeden elde edilmiştir. Bu durum, analizimizin etkinliğini ve güvenilirliğini kanıtlamaktadır. Bazı Mutantların üstel bir gradyan kullanarak burada koku alıp alamadıklarını belirlemek için birkaç iz oluşturuyoruz ve hayvanların diğer uçtaki stimülüsü ne kadar iyi takip edebildiklerine dair bir fikir edinmek istiyoruz.
Şimdi size ayrı ayrı kaydedilmiş 15 yörüngeyi göstereceğim ve gördüğünüz üzere hayvanlar, diğer uçtaki çizginin altındaki stimülüsü takip etme konusunda mükemmel bir iş çıkarıyorlar. Şimdi basit bir kontrol ile devam etmek istiyoruz. Üstel gradyan içindeki hayvanların çizgiyi takip etme sebebi, konsantrasyonu fark etmeksizin herhangi bir stimülüsün bulunması ve hayvanların sadece düz gitmiş olması olabilir.
Dolayısıyla, aslında konsantrasyonu veya konsantrasyonla ilgili bir şeyi hesapladıklarını ve hareketlerini yönlendirmek için bundan yararlandıklarını göstermek amacıyla, şu an bir çatıya yakın olan bu geometriye sahibiz. Larva her zamanki gibi buraya yerleştirilir ve beklediğimiz şey, hat boyunca ilerlemeleri, ardından bu noktadan sonra konsantrasyonun düştüğünü tespit ederek geri dönmeleridir. Bu testi beş hayvanla gerçekleştirdik.
Yörüngeleri topladık ve şimdi bunları bu slayt üzerinde üst üste binmiş şekilde gösteriyoruz. Gördüğünüz üzere, hayvanlar buradan başlayıp hat boyunca ilerlemiş, ardından en yüksek konsantrasyona karşılık gelen bölgeyi keşfetmiş ve esas olarak orada kalmışlardır. Bu durum, tek kaynaklı analiz kullanarak diğer konsantrasyonları gerçek zamanlı olarak hesaplayabildiklerini güçlü bir şekilde göstermektedir.
Temelde tek bir büyük soruyu yanıtlayabildik. Bir hayvan, çok kaynaklı bir cihaz kullanarak belirli bir konsantrasyondaki bir kokuyu tespit edebilir mi? Gradyanın şeklini değiştirme ve bir hayvanın bu bilgiden yararlanıp yararlanamayacağını belirleme konusunda daha fazla esnekliğe sahibiz.
Bu fikri basit bir deney yaparak örneklendirmek istiyorum. Şimdiye kadar kurduğumuz gradyanlarda, lens boyunca eksponansiyel bir şekle sahiptik. Şimdi soru şu; konsantrasyonun lens boyunca lineer olarak artmasını sağlayarak hücreleri daha fazla zorlarsak, hala diğer uç çizgiyi bulabilirler mi?
Bu grafik iki gradyan türünü temsil etmektedir. Mor renkte eksponansiyel gradyanı, yeşil renkte ise lineer gradyanı test ettik. Bu lineer gradyandır ve paren yağını seyreltmek için kullanılan isam asetatın farklı konsantrasyonlarını yazacağım.
Bu bir aritmetik seridir. Oluşacak doğrusal bir gradyanımız var ve gördüğünüz üzere, uç noktaların konsantrasyonunun yine 0,5 olduğu ancak 0,03'e kadar yükseldiği buradaki eksponansiyel gradyanla karşılaştırıldığında eğim oldukça sığdır. Soru şudur: Naviler böyle sığ bir gradyanla karşılaştıklarında kemotaksi gerçekleştirebilirler mi?
Burada, eksponansiyel gradyan ve lineer gradyan için altı damlada kullanılan asetatın gerçek konsantrasyonları görülmektedir. Gördüğünüz üzere, lineer gradyan için her iki durumda da en yüksek konsantrasyonlar aynı olsa da, buradaki en düşük konsantrasyon oldukça yüksektir. Deneyi lineer gradyan ile gerçekleştiriyoruz ve burada vahşi tip hayvanlara ait 15 trajektör temsil edilmektedir; bu hayvanların lineer gradyanı tespit edebildikleri ve bu sinyali deodorant hattı boyunca takip edebildikleri oldukça açıktır.
Bu nedenle sanırım anlatmak istediğimiz nokta netleşti. Burada bitirmeden önce, bu takip düzeneğinin gelecekteki yönelimleri hakkında kısaca konuşmak istiyorum. Bu takip düzeneği, örneğin larvalardaki karmaşık davranışların daha geniş bir alanda ve daha uzun bir süre boyunca gözlemlenmesi gibi birçok ilginç çalışma yapmanıza olanak tanısa da, bazı sınırlamaları bulunmaktadır.
Örneğin, plakanızın boyutuyla sınırlısınız, bu da takip sürenizi ve gözlemleyebileceğiniz karmaşık davranışları kısıtlamaktadır. Bu nedenle, ya plakanın daha büyük olduğu ya da plaka sınırlarıyla hiç kısıtlanmadığınız bir sistem geliştirmek faydalı olacaktır. Bir diğer sorun ise mevcut yazılımımızla aynı anda birden fazla hayvanı takip etmenin zor olmasıdır, bu nedenle popülasyon davranışlarını gerçek zamanlı olarak gözlemlemek mümkün değildir.
Bu düzenek aracılığıyla test edemediğimiz davranışın bir diğer ilginç yönü ise larvaların uzaydaki gerçek üç boyutlu hareketleridir. Hayvanları takip ederken, örneğin bir koku damlacığına ulaştıklarında, başlarını kaldırabildiklerini veya konsantrasyondaki değişiklikleri tespit etmeye çalışarak başlarını çevreye doğru sallayabildiklerini göreceksiniz. Mevcut özel düzeneğimizle bu şu an için mümkün olmayabilir, bu nedenle bunu yapmamıza olanak tanıyacak bir sistem geliştirmek faydalı olacaktır.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu video makalesi, stabil ve kontrol edilebilir koku gradyanları oluşturmak için yeni bir yöntem sunmaktadır. Bu gradyanlar, koku alma kusurlarının taranmasını ve kemotaksis davranışının araştırılmasını kolaylaştırır.
Bu yöntem, koku gradyanı geometrisi üzerinde hassas kontrol sağlayarak koku alma davranış analizlerindeki temel bir kısıtlamayı gidermektedir. Uyaran koşullarını stabilize ederek, model organizmalarda duyusal girdinin davranışsal çıktı ile ilişkilendirilmesinin güvenilirliğini artırır. Bu durum, koku alma fonksiyonunun fenotipik bir okuma olduğu nörobilim keşif süreçlerinde, hedef doğrulama çalışmalarındaki risklerin azaltılmasını destekler.
Bu yöntem, koku yanıtının hedef etkileşimi veya yolak modülasyonu için fenotipik bir vekil olarak hizmet ettiği erken keşif iş akışlarına uygundur.