Ameliyat Sonrası İleus Murin Modeli
12 Temmuz 2024
Bu çalışmada, intestinal manipülasyon ile oluşturulan postoperatif ileusun bir murin modeli tanımlanmıştır. Gastrointestinal geçiş fonksiyonu, patolojik değişiklikler ve immün hücre aktivasyonu ameliyattan 24 saat sonra değerlendirildi.
Çalışmamızın kapsamı bağırsak bağışıklığıdır. POI yaralanmalarının patofizyolojisini ve mekanizmasını yeni tedavilerin geliştirilmesi için göstermeye çalışıyoruz. Zorluklardan biri, farede tutarlı ve tekrarlanabilir deneysel POI modelleri oluşturmaktır.
Bu, deney grupları arasındaki değişkenliği en aza indirmek için cerrahi teknikler gibi değişkenlerin kontrol edilmesini ve hayvan bakımındaki protokollerin değerlendirilmesini içerir. Diğer bir zorluk, farelerde POI'nin altında yatan patofizyolojik mekanizmaları göstermektir. Protokolümüz, POİ'nin patofizyolojisini incelemek ve yeni anti-inflamatuar stratejileri değerlendirmek için minimum varyasyon ile tekrarlanabilir bir model oluşturmayı amaçlamaktadır.
Amacımız, fare modellerinde klinik öncesi bulgular arasındaki boşluğu doldurmak ve insanlarda klinik alaka düzeyi olduğunu ve böylece deneysel sonuçların POI için etkili tedavilere dönüşme potansiyelini arttırmaktır. Başlamak için, anestezi uygulanmış fareyi cerrahi platforma yerleştirin. Karın bölgesindeki tüyleri almak için elektrikli bir saç tıraş makinesi kullanın.
Ardından, karın bölgesindeki tüm gevşek tüyleri silmek için tuzlu suyla nemlendirilmiş bir pamuk top kullanın. Karnı ortaya çıkarmak için uzuvları tamamen uzatın ve temiz bir hava yolu sağlamak için farenin kafasını konumlandırın. Daha sonra% 75 alkole batırılmış bir pamuk top kullanarak, cerrahi alanın cildini iki kez dezenfekte edin.
Bundan sonra, karın bölgesindeki fazla alkolü çıkarmak için kuru steril bir tıbbi gazlı bez kullanın. Ardından, deriden bir kesi yapın. Cımbız kullanarak, karnın ortasındaki rektus abdominis kasını kaldırın ve medyan çizgi boyunca küçük bir kesi yapın.
Kesiğin üst kenarının sternumun ksifoid sürecinden altı ila sekiz milimetre ve alt kenarın dış genital organdan altı ila sekiz milimetre olduğundan emin olun. Daha sonra karın kesisinin her iki tarafına normal tuzlu su ile önceden nemlendirilmiş gazlı bez yerleştirin. Gazlı bezi, açığa çıkarmak için insizyonun üst ve alt kenarlarına hemostatik forseps ile sabitleyin.
Gazlı bezi düzgün bir şekilde sabitledikten sonra, iki tuzlu nemli pamuklu çubukla karın duvarının her iki tarafına hafifçe bastırın. Daha sonra iç kesiden küçük bir miktar bağırsak tüpünü sıkın ve açığa çıkarmak için gazlı bezin üzerine yerleştirin. Çekumu bulun.
Ve pankreasa dokunmaktan kaçınmak için mideden iki santimetre öncesine kadar tuzlu suyla nemlendirilmiş pamuklu çubuklarla bağırsağı çıkarın. Bağırsağı pankreatikoduodenal ligamanın proksimal ucundan ileoçekal bölgenin distal ucuna kadar uzatın. Daha sonra, küçük kanama noktaları ortaya çıkana kadar beş dakika boyunca proksimal ve distal tüm ince bağırsak boyunca tutarlı bir basınç uygulayın.
Bundan sonra, tüm ince bağırsakları dikkatlice karın boşluğuna geri yerleştirmek için önceden nemlendirilmiş pamuklu çubuklar kullanın. Ardından, normal bağırsak pozisyonunu sağlamak ve ameliyat sonrası tıkanıklığı veya burulmayı önlemek için karnı gazlı bez ve karın duvarı boyunca üç ila beş saniye boyunca nazikçe masaj yapın. Daha sonra, kaybedilen sıvıları yerine koymak ve karın dokusunu yağlamak için karın boşluğuna 100 mikrolitre salin enjekte edin.
Ardından gazlı bezi çıkarın ve karın insizyonunda iki katmanlı bir kapatma gerçekleştirin. Dikiş attıktan sonra, karın kesisinin yakınındaki alanı kuru ve kan, doku sıvısı veya normal tuzlu sudan temiz tutmak için kuru steril tıbbi gazlı bezle nazikçe silin. Ameliyattan sonra ayrılmayı önlemek için insizyonun üzerine ve çevresine az miktarda tıbbi insizyon yapıştırıcısı sürün.
Yapıştırıcı kuruduktan sonra, fareyi 37,5 santigrat derecede ısıtılmış bir battaniyenin üzerine koyun ve tamamen iyileşene kadar fareyi izleyin.
Genel Bakış
Bu çalışma, intestinal manipülasyon yoluyla oluşturulmuş bir postoperatif ileus (POI) fare modelini sunmaktadır. Araştırma, yeni tedaviler geliştirmek amacıyla intestinal bağışıklığın ve POI'nin patofizyolojisinin anlaşılmasına odaklanmaktadır.
Temel Çalışma Bileşenleri
Bilim Alanı
- Nörobilim
- Gastroenteroloji
- İmmünoloji
Arka Plan
- Postoperatif ileus, cerrahi sonrası sık görülen bir komplikasyondur.
- Farelerde tekrarlanabilir deneysel modeller oluşturmak zordur.
- Cerrahi tekniklerin ve hayvan bakım protokollerinin kontrol altında tutulması kritik önem taşır.
- POI'nin altında yatan mekanizmaları anlamak, tedavi geliştirme süreci için esastır.
Çalışmanın Amacı
- POI yaralanmalarının patofizyolojisini örneklendirmek.
- Yeni anti-inflamatuar stratejiler geliştirmek.
- POI çalışmalarında kullanılacak tutarlı bir model oluşturmak.
Kullanılan Yöntemler
- Farelerde POI indüklemek için intestinal manipülasyon.
- Gastrointestinal transit fonksiyonun değerlendirilmesi.
- Patolojik değişikliklerin değerlendirilmesi.
- Ameliyat sonrası 24. saatte immün hücre aktivasyonunun analizi.
Ana Sonuçlar
- POI için başarılı bir fare modelinin oluşturulması.
- Gastrointestinal transit fonksiyonundaki değişikliklerin belgelenmesi.
- POI ile ilişkili patolojik değişikliklerin tanımlanması.
- Cerrahi müdahale sonrası immün hücre aktivasyonunun gözlemlenmesi.
Sonuçlar
- Model, POI mekanizmalarının incelenmesi için bir platform sağlar.
- Yeni terapötik stratejilerin değerlendirilmesini kolaylaştırabilir.
- Bulguların etkilerini araştırmak için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır.
Sıkça Sorulan Sorular
Sektörel Uygulama ve Önem
Postoperatif ileusun (POI) tekrarlanabilir fare modelleri, cerrahi sonrası gastrointestinal disfonksiyonu hedefleyen anti-inflamatuar ve pro-motilite terapötiklerin erken keşif aşamasındaki risklerin azaltılması için gereklidir. Bu model, POI ile ilişkili nöronal, epitelyal ve immün yolların mekanistik sorgulamasını sağlayarak translasyonel ilerleme için öngörülebilir güven düzeyini destekler. Tutarlı deneysel çıktılar, portföy ayıklamasını ve gastrointestinal iyileşme için aday müdahalelerin önceliklendirilmesini kolaylaştırır.
Biyofarma Ar-Ge'de Stratejik Uygulamalar
Erken Keşif ve Hedef Doğrulama
- POI patofizyolojisinin ve hedeflenebilir yolakların sistematik olarak incelenmesine olanak tanır.
- Bağırsak motilitesi ve inflamasyonu ile ilişkili aday hedeflerin fonksiyonel doğrulamasını destekler.
- Nöronal, epitelyal ve immün katkıları izole ederek POI için mekanistik risk azaltmayı kolaylaştırır.
- Yeni terapötik stratejilerin hipotez odaklı değerlendirmesi için bir platform sağlar.
Tarama ve Analiz Geliştirme
- Gastrointestinal transit ve doku patolojisinin kantitatif değerlendirmesi için standartlaştırılmış bir in vivo sistem sunar.
- İmmün hücre infiltrasyonunun ve epitelyal bariyer bütünlüğünün tekrarlanabilir ölçümüne olanak tanır.
- Hastalıkla ilişkili bir bağlamda anti-inflamatuar veya pro-motilite bileşiklerin taranması için assay geliştirilmesini destekler.
- Preklinik bileşik değerlendirmesinde çalışmalar arası karşılaştırılabilirlik ve ölçeklenebilirlik sağlar.
Translasyonel ve Preklinik Araştırmalar
- Preklinik bulguları klinik POI mekanizmalarıyla hizalayarak translasyonel sürekliliği artırır.
- İlgili in vivo modellerde etkinliği kanıtlanmış adayların risk ayarlı ilerlemesini sağlar.
- Gastrointestinal hasar ve iyileşme için biyobelirteç keşfini ve validasyonunu destekler.
- Murin modellerden elde edilen mekanistik içgörülerin insan terapötik geliştirmesine aktarılmasına köprü kurar.
Boru Hattı ve İş Akışı Entegrasyonu
Bu fare POI modeli, gastrointestinal terapötikler için hedef doğrulama, öncü bileşik belirleme ve translasyonel araştırmaları destekleyerek, keşiften preklinik aşamaya kadar olan sürece entegre olur.
- Keşif Biyolojisi: POI hipotez testi ve mekanistik açıklığa kavuşturulması için kontrollü bir sistem sağlar.
- Tarama: Bileşik değerlendirmesi için gastrointestinal transit ve immün aktivasyonun kantitatif okumalarını sunar.
- Analitik: Müdahale etkilerinin motilite ve doku patolojisi üzerindeki istatistiksel karşılaştırmasına olanak tanır.
- Translasyonel Araştırma: Preklinik etkinliğin POI'deki klinik son noktalarla uyumlandırılmasını kolaylaştırır.
- Kurumsal Yeniden Kullanım: POI'yi hedefleyen çeşitli terapötik modalitelerin iteratif testleri için yeniden kullanılabilir bir platform görevi görür.
Operasyonel ve Kurumsal Etki
- Bilimsel Değer: POI araştırmalarında öngörü güvenini artırır ve mekanistik belirsizliği azaltır.
- Operasyonel Değer: Deneysel prosedürleri standartlaştırır ve çalışmalar arasındaki tekrarlanabilirliği artırır.
- Stratejik Değer: Devam/tamamla (go/no-go) kararlarına temel oluşturur ve GI terapötik programları için kaynak tahsisini optimize eder.
- Portföy Etkisi: Riskle uyumlu önceliklendirmeyi ve translasyonel potansiyeli olan adayların ilerletilmesini destekler.
Uygulama Hususları
- Fare cerrahi teknikleri ve ameliyat sonrası bakım konusunda uzmanlık gerektirir.
- Floresans deteksiyonu, histoloji ve akış sitometrisi altyapısına erişim gerektirir.
- Ekipler arasında cerrahi ve değerlendirme protokollerinin titiz bir şekilde standartlaştırılmasını gerektirir.
- Farklı fare suşları veya deneysel son noktalar için adaptasyon gerektirebilir.
- Gruplar arası değişkenliği en aza indirmek için prosedürel değişkenlerin dikkatli bir şekilde kontrol edilmesi kritiktir.
