نقل النووي في البويضات ماوس

نقوم بإجراء عملية النقل النووي (NU Nuclear transfer) لأن مجموعتنا البحثية مهتمة بإعادة البرمجة. وتعتبر هذه العملية مذهلة حيث يمكن إعادة برمجة النواة المتمايزة لتعود إلى الحالة الجنينية. وهذه هي الكواشف case SUM وHCCV، وهذا هو إنزيم الهيالورونيداز (hyaluronidase).

أولاً، أقوم بتجهيز طبق، والذي سيُنقل إلى الحاضنات ليتواءم مع CO2. هذه عبارة عن قطرات، عدة قطرات لـ Turing مغطاة بالزيت المعدني، وذلك لمعايرة جو CO2.

الآن قم بوضع قطرة من HCZB. ستُستخدم هذه القطرة لعملية الغسيل. تكون هذه الكمية كبيرة وتُغطى مرة أخرى بهذا الزيت المعدني.

هذا مرتفع، وهذا ينخفض مع الهيالورونيداز. هذا الجزء هنا عبارة عن قطرات HCCP فقط. هذه مخصصة للغسيل.

يُستخدم هذا لإزالة خلايا ulu من الجانب O. يتم تسخين هذه المرحلة لتبقى دافئة حتى أعود وأحضر عينات الزيت من الفئران وأغطي كل شيء بالزيت المعدني. هذه قطرات PVP لتنظيف الإبرة ولوضع الخلايا بداخلها، وهذا HCCB بالإضافة إلى Cyla B. وهنا سأقوم بإجراء العمليات.

حسناً، هذا هو لون الإبرة. ما أفعله الآن هو سحب إبرة. حسناً، لدي الآن إبرة جيدة جداً ورقيقة للغاية.

وهذا هو جهاز الصهر الدقيق (micro forge). يجب عليّ قطع الإبرة عند موضع معين للحصول على ماصة إمساك بالحجم المناسب. أقوم بتسخين الكرة الزجاجية، ثم أنزل بالإبرة لتنصهر وتلتصق بها، والآن أصبحت مكسورة.

أقوم بإبعاد هذا. كما ترى، فإن الإبرة المكسورة مثالية. الآن أنتقل إلى هنا، وأقوم برفع درجة الحرارة.

الآن ستتحول الكرة الزجاجية إلى اللون الأحمر وستنصهر، قم بدفع الكرة الزجاجية لتشكل منحنى. هذا كافٍ، سأقوم بإزالتها.

كما ترون، أقوم الآن بإدخال الإبرة. لقد انتهينا للتو من تجهيز ماصة التثبيت، لذا نقوم بتركيبها في هذا الرأس. والآن، نعيد إدخالها في المجهر.

ماصة دقيقة، وأنبوب شعري مُعبأ بالزئبق. قمت بتعبئته في هذه الرأس. قم بتعبئة هذا الأنبوب الشعري هنا بالزئبق.

يتم إدخاله إلى الداخل. ثبّت الإبرة هنا في هذا الرأس. اربطها بإحكام، ثم اسحبها للخلف.

سيؤدي التدوير في اتجاه عقارب الساعة هنا إلى دفع الزئبق إلى الأمام حتى تتمكن من رؤيته. والآن نضع الطرف في الزيت. أرأيت؟ والآن أقوم بتحريك الإبرة لأسفل للحصول على الرؤية.

قم بطرد بعض قطرات الزئبق ثم اسحب بعض الـ QVP. هذا جيد. وبعد ذلك، حركه للأعلى مرة أخرى.

أتوجه إلى HCCB وأتحرك للأسفل في الثقب. بالنسبة لرأسي، أتوجه إلى P، وهي ماصة الفئران. أحتاج إلى تحضير أنبوب شعري لإدخاله هنا. شكراً. تم بالفعل. جيد.

لذا، قم بتجهيز بعض الأنابيب الشعرية. حسناً. وفي الأنبوب. أنا لِي.

لقد أتيت من سويسرا وبدأت هذا العمل منذ عام واحد، حيث انضممت إلى مختبر K وبدأت في تعلم النقل النووي. إنه حقاً مكان رائع والعمل هنا متميز للغاية. وبالطبع، تعد هذه التجربة معقدة للغاية وقد تظهر العديد من المشكلات أثناء تنفيذها.

لذلك، عند البدء، قد تواجه مشكلات مثل تحلل العديد من الخلايا أثناء عملية التنوي أو أثناء النقل. أو قد تجد أنه على الرغم من نجاح عملية النقل، إلا أن الخلايا لا تنمو. ويمكن أن يكون هناك دائمًا أسباب عديدة لذلك.

أقصد أنه يمكنك البدء بنظام الزرع لجميع المواقع. لذا، يحتاج المرء دائماً إلى بعض الضوابط، مثل أجزاء من الضابط الجيني أو بعض الأجنة المخصبة لاختبار نظام الزرع والحاضنات. وبعد ذلك، تحتاج أيضاً إلى تحسين المهارات في استخدام المجهر.

لذا يتطلب الأمر الكثير من التدريب حتى تتمكن من تطعيم الجانب بشكل موثوق ثم النقل مرة أخرى. المسألة مجرد تدريب، وقد يستغرق الأمر بضعة أسابيع أو أشهر حتى تتقن هذه العملية. وبخلاف ذلك، تصبح العينة جاهزة للتجارب الطويلة.

لذا، من الجيد تخصيص يوم كامل لهذه العملية. ومن الأمور الصعبة في البداية أيضاً هي عملية السحب بالماصة، لذا يجب تجنب تكوين الفقاعات، والتحكم في العملية جيداً لضمان عدم فقدان الرؤية الواضحة، وخاصة أنك قد تتسبب في تلف المستعمرة؛ نظراً لأن الطبقة الخارجية من الـ sonar lucita تكون مفتوحة، فمن الممكن عند استخدام الماصة أن يتضرر ذلك المستعمرة مما يؤدي إلى تسربه من الـ sonar lucita.

لذا، يجب أيضاً توخي الحذر لتجنب وجود زيت في أنبوب الفم. وكذلك عدم السحب أو النفخ بقوة مفرطة، ولكن اكتساب هذه المهارة أمر سهل نسبياً.