خلق الفئران التجريبية تمدد الأوعية الدموية الأبهري البطني مع إيلاستاز

تبدأ هذه العملية الجراحية المستخدمة لإنشاء تمدد الشريان الأورطي البطني بشق جراحي في خط منتصف البطن. يتم إزاحة محتويات البطن جانباً وربط جميع فروع الشريان الأورطي، ثم يتم ربط الجزأين القريب والبعيد من الشريان الأورطي.

يتم ثقب القلب بإبرة وإيصال كمية وافرة من الإيلاستاز عبر أنبوب بولي إيثيلين مدبب حرارياً. عند اكتمال عملية الإيصال، يتم إغلاق تصنيع الشريان الأبهر (AOR autotomy). ثم تُزال الرباطات، ويمتلئ الشريان الأبهر بالدم، ويُغلق التجويف البطني.

يُترك الفأر بعد ذلك للتعافي، وسيتمدد تمدد الأوعية الدموية بشكل كامل خلال 14 يومًا. مرحبًا، أنا جوليان أسما من مختبر الخلايا الجنينية في قسم طب القلب والأوعية الدموية بجامعة ستانفورد. سأعرض لكم اليوم إجراء حقن الإيلاستاز لاستحثاث تمدد الأوعية الدموية الأبهرية البطنية التجريبي الجديد.

نستخدم هذا الإجراء في مختبركم لدراسة الـ PEs للشريان البطني. لذا، لنبدأ العمل. لبدء تجاربكم، اختر الفأر المطلوب، على سبيل المثال فأراً من سلالة C 57 black six، وقم بتخديره باستخدام الإيزوفلوران المستنشق حتى يفقد الفأر وعيه. يرجى العلم أن سلالات الفئران المختلفة تتباين في معدل نمو تمدد الأوعية الدموية.

أخرج الفأر المخدر من الغرفة في محطة تحضير مضاءة بشكل كافٍ. قم بحلاقة الفراء من منطقة البطن من نهاية عظمة العجز إلى جذور الأرجل. استخدم كريم إزالة الشعر لإزالة الشعر الزائد.

قم بفرك الجلد العاري بـ 70%alcohol حتى تتم إزالة جميع الشعيرات من المنطقة المحلوقة. بعد ذلك، قم بفرك الجلد ثلاث مرات على الأقل باستخدام Betadine مع المسح بـ alcohol بين عمليات الفرك. الآن، ضع الفأر في وضعية الاستلقاء الظهري على مجال العملية للحفاظ على فقدان الفأر للوعي.

أثناء الجراحة، يتم وضع أنبوب على أنفه لضخ مادة iso fluorine بنفس معدل التدفق المستخدم لإحداث فقدان الوعي. يُحفظ elastase على الثلج ثم يُسحب داخل محقنة. بعد ذلك، يتم تثبيت المحقنة ووضعها بجانب مجال العمل الجراحي وتوصيل القسطرة بها.

من المهم أن تظل طرف القسطرة معقمة، ويتم ذلك بوضع الطرف في قارورة معقمة. وقبل البدء بفتح جسم الفأر، تأكد من استخدام تقنية تعقيم دقيقة. ابدأ بارتداء قفازات معقمة.

يجب تعقيم الأدوات الجراحية، والمقصات، وحوامل الإبر، والملاقط قبل العملية الجراحية. خصص لحظة لمراجعة تحضيراتك ومحاولة معالجة أي مصادر تلوث محتملة أخرى أثناء الجراحة. في حال اختلال التقنية المعقمة أثناء الإجراء، أعد تعقيم أداتك باستخدام جهاز التعقيم بالخرز الساخن.

بمجرد تحضير كل شيء، ابدأ الجراحة بعمل شق طولي في منتصف البطن داخل التجويف البطني. قم بإزاحة محتويات البطن إلى مساحة بطنية خالية أو اسحبها خارج البطن باستخدام شاش معقم للكشف عن الأبهر البطني. استخدم الآن الملقط لعزل الأبهر البطني بعناية من مستوى الوريد الكلوي الأيسر وصولاً إلى نقطة التفرع.

في الحالة المعروضة، يوجد فرع واحد يقع فوق موقع ربط الأبهر، وبالتالي لا يحتاج إلى ربط. إذا كانت هناك فروع أبهريّة بين موقعي الربط الأبهري البعيد والقريب، فقم بربط هذه الفروع على مسافة سنتيمتر واحد من نقطة التفرع باستخدام غرز ذاتية من عيار 10. في الأجزاء القريبة والبعيدة من الأبهر، ضع رباطات حريرية مؤقتة عيار 6.0 لإيقاف تدفق الدم.

قم الآن بإجراء عملية بتر عند نقطة التفرع. ابدأ بثقب التفرع باستخدام إبرة قياس 30. يمكن إدخال أنبوب بولي إيثيلين مدبب حرارياً من خلال عملية البتر الذاتي في منطقة AOR وتأمينه باستخدام عقدة.

استخدم الملقط لإدخال الأنبوب في الأبهر بعناية ورفق. احذر من إزالة الطبقة البطانية باستخدام ضغط قدره 100 milliliters. قام الزئبق بتروية الأبهر باستخدام elastase من كيس محلول ملحي معلق على ارتفاع 136 centimeters.

تأكد من عدم وجود هواء في الأنبوب، وإلا لن يكون الضغط دقيقاً. يحتوي المحلول الملحي على 4.5 وحدات لكل ملليلتر من النوع الأول من إنزيم الإيلاستاز البنكرياسي الخنزيري (porcine pancreatic elastase)، ويجب أن يملأ الشريان الأبهر في غضون 5 إلى 15 دقيقة.

خلال عملية التروية، يتوسع الأبهر عادةً إلى حوالي 140% من قطره الأصلي. وعند الانتهاء، قم بإزالة نظام التروية وإغلاق الشق الطولي في الأبهر باستخدام خيط جراحي مقاس 10 aught لتجنب التضيق. وبعد إغلاق الشق، يجب أيضاً إزالة الرباط القاصي.

إذا كان النزيف من الفتحة التي تم إصلاحها ضئيلاً أو غير موجود، يتم إزالة الرباط الداني. أما في حالة حدوث نزيف، فتوضع رباطات مؤقتة إضافية من نوع 6.0 soak عند الجزأين الداني والقاصي من الأبهر، وتضاف غرزة واحدة أخرى لإغلاق الفتحة ذاتياً وبشكل كامل. سيمتلئ الأبهر المتسع بالدم فور إزالة الرباط الداني.

بمجرد الانتهاء من الإجراء الخاص بالشريان الأورطي، أعد الأمعاء إلى تجويف البطن. إذا كانت الأمعاء قد سُحبت للخارج، فإنها ستنزلق للداخل ككتلة واحدة، ولا داعي للقلق بشأن ترتيبها الهندسي. مع استعادة جميع الأعضاء لمواقعها، يمكن الآن إغلاق الجرح الخارجي على طبقتين باستخدام ست غرز من النايلون والبوليبيروبيلين.

قم الآن بتزويد الفأر بمخدر موضعي، مثل قطرة واحدة من ICAN بتركيز 0.25% لكل سنتيمتر من الشق الجراحي. أعطِ أيضاً جرعة واحدة من مضاد الالتهاب Carin بمقدار 5 mg/kg عن طريق الحقن تحت الجلد. وبذلك تكون الجراحة قد اكتملت، ويجب وضع الفأر في منطقة دافئة حتى يستعيد وعيه.

عادةً ما يحدث الإفاقة في غضون 15 دقيقة. وعندما يستعيد الفأر وعيه، يتم إعادته إلى قفص فردي ومراقبته بشكل دوري طوال فترة تعافيه. بعد الإجراء، يتوسع الشريان الأبهر عادةً ليصل إلى حوالي 140 إلى 160% من قطره الأصلي.

يُلاحظ هذا التوسع الأولي مع استقرار حتى اليوم السابع. ويحدث توسع ثانوي سريع بين اليوم السابع واليوم 14. وفي اليوم 14، يمكن ملاحظة تمدد الأوعية الدموية في الشريان الأورطي تحت الكلوي.

لقد عرضتُ لكم للتو كيفية تحفيز تمدد الشريان الأورطي البطني باستخدام الإيلاستاز في الفئران. عند إجراء هذه العملية، من المهم تجنب تكوين أي جلطات دموية داخل الشريان الأورطي البطني. وهذا كل شيء.

شكرًا لكم على المشاهدة، مع تمنياتنا لكم بالتوفيق في تجربتكم.