$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
ابدأ بسلك بلاتيني مجمع مطلي بالبيرفلورو ألكوكسي بطبقة بوليدوبامين.
انقع هذا المسبار في محلول يحتوي على أجسام مضادة خاصة بالببتيد المستهدفة ، والتي تشل حركة البوليدوبامين ، وتشكل مسبارا مناعيا.
اغسل المسبار المناعي وضعه في غرفة تدفق باستخدام قطب أرضي من كلوريد الفضة ، مما يؤدي إلى إنشاء دائرة.
أولا ، أدخل المخزن المؤقت وقم بتطبيق جهد لتنشيط المسبار المناعي ، مما يمكنه من العمل كبطارية أو مكثف ، وتخزين الطاقة كشحنة كهربائية.
سجل الإشارة الكهربائية لتوليد خط الأساس.
الآن ، قم بتعريض المستشعر الحيوي لمحلول يحتوي على الببتيدات المستهدفة.
ترتبط هذه الببتيدات بالأجسام المضادة الموجودة على المسبار ، مما يتسبب في تغيير في الشحنة المحلية والطاقة المخزنة في المستشعر الحيوي.
سجل الإشارة الكهربائية. تشير الزيادة في الإشارة إلى وجود الببتيد المستهدف ، بينما يرتبط حجم هذه الإشارة بتركيز الببتيد المستهدف.
أولا ، قم بقص سلك البلاتين المطلي بالبيرفلورو ألكوكسي بطول 25 سم. ثم ، باستخدام مشرط ، قم بتجريد ما يقرب من 5 ملليمترات من طلاء البيرفلوروألكوكسي من أحد طرفيه ، مع الحرص على عدم قطع السلك البلاتيني. الآن ، أدخل الطرف المجرد من السلك البلاتيني في دبوس موصل ذكر مطلي بالذهب بطول 1 ملم. بعد ذلك ، باستخدام كماشة الإبرة ، قم بتجعيد أسنان دبوس الموصل حول الطرف المجرد من السلك البلاتيني ، وقم بلحام السلك البلاتيني بدبوس الموصل المطلي بالذهب.
بعد ذلك ، قم بإعداد محلول الدوبامين عن طريق إضافة 50 ملليغرام من هيدروكلوريد الدوبامين في 50 مل من 10 ملليمولار PBS ، مع درجة الحموضة 6 ، واخلطها عن طريق التحريك. بعد إذابة الدوبامين تماما ، ضع طرف السلك البلاتيني في الوعاء الذي يحتوي على PBS المكمل بالدوبامين الطازج. قم بتوصيل قطب قرص كلوريد الفضة بالقناة الأرضية في مرحلة الرأس. بعد ذلك ، ضع قرص كلوريد الفضة في الوعاء الذي يحتوي على PBS المكمل بالدوبامين وسلك البلاتين.
قبل المضي قدما ، قم بتوصيل تحويلة سلكية بالقنوات المرجعية لمرحلة الرأس. افتح برنامج الحصول على البيانات التفاعلية ، وقم بتعيين بروتوكول جهد أمر الترسيب الكهربائي لسن المنشار عن طريق ضبط جهد البدء عند 0.6 فولت تحت الصفر ، والجهد النهائي إلى 0.65 فولت ، ومعدل المسح عند 0.04 فولت في الثانية ، ومدة الترسيب إلى 420 ثانية.
بعد الانتهاء من ترسيب البوليدوبامين ، قم بإزالة الحبيبات الأرضية المصنوعة من كلوريد الفضة وطرف السلك البلاتيني من الوعاء. ضع طرف السلك في أنبوب دقيق يحتوي على PBS بدرجة حموضة 7.4 لمدة 2 إلى 5 دقائق وتأكد من أن طرف السلك لا يلامس جوانب أو أسفل الأنبوب الصغير. بعد ذلك ، قم بإعداد محلول الجسم المضاد عن طريق الجمع بين الجسم المضاد المعني مع PBS البالغ الرقم الهيدروجيني 7.4 ، بنسبة 1 إلى 20 ، في وعاء بحجم مناسب.
بعد ذلك ، انقع الطرف المودع بالبولي دوبامين من القطب البلاتيني في محلول الجسم المضاد لمدة ساعتين في درجة حرارة الغرفة ، مع التأكد من تعليق طرف السلك البلاتيني في المحلول وعدم استرياح على السطح الداخلي للأنبوب الصغير. ضع الطرف الوظيفي للمسبار المناعي السعوي في غرفة التدفق ، مع الحرص على عدم إزعاج طرف القطب بأي شكل من الأشكال ، لأن القيام بذلك قد يؤدي إلى إتلاف الطرف الحسي للمسبار.
قبل الاختبار التجريبي الأول ، قم بإجراء تشغيل قياسي TBS لتكييف المسبار المناعي السعوي ، وبالنسبة لبروتوكول الجهد ، اضبط جهد الخطوة الموجبة على 110 مللي فولت ، واحتمال الخطوة السلبية إلى سالب 5 مللي فولت ، ومدة الخطوة 20 مللي ثانية ، ومدة الاستحواذ إلى 600 ثانية.
بعد ذلك ، قم بإنشاء محلول الببتيد محل الاهتمام ، باستخدام نفس TBS. للحفاظ على تكوين الصحف الفائق ، قم بإعداد نظام مشعب حيث يمكن تبديل الصحف الفائق بين TBS و TBS المكملة بالببتيد. استخدم معلمات TBS القياسية ، وقم بإعداد بروتوكول الحصول على بيانات استشعار الببتيد عن طريق ضبط مدة الاستحواذ على 360 ثانية.