نوفمبر 19, 2011
تقنية تشريح يوضح قلع العين الماوس لتثبيت الأنسجة لأداء phenotyping في شاشات عالية الإنتاجية.
سيوضح هذا الفيديو عين الفأر وعملية النوي أو إزالة مقلة العين من المحجر. يحد مقلة العين حافة الجفن السفلي. وهنا نرى المآق الإنسي أو الأنفي.
في الخلف تقع المآقي الصدغية أو الجانبية. وفي الأعلى يوجد حافة الجفن العلوي. وهذه عينة جراحية.
تشير الإبرة إلى القرنية الشفافة. ويمكننا رؤية جزء صغير من العدسة يبرز خلف القزحية. وتظهر القزحية هنا باللون البني وهي تغطي العدسة.
تعتبر هذه الخط الأبيض، أو الحوف، أهم علامة جراحية حيث سيتم إحداث جرح ثقبي خلفه مباشرة. يقع النصف الخلفي من المقلة خلف الحوف، ونحن نشير هنا إلى موقع اندغام العضلة. يمكنك رؤية العضلة وهي تستقر مقابل المقلة هنا، ثم النسيج الضام الذي يملأ المحجر ويشمل الغدة الدمعية.
وأخيراً، هذا هو الشريط الأبيض الطويل للعصب البصري الناتج عن التشريح غير الحاد. باستخدام ملقط ضمادات منحني، تم تعديله بطرف حاد، ابدأ بباعدة الجفون. يساعد هذا الإجراء على دفع العين للخارج وإبعادها.
استخدم الملقط بعناية للدخول إلى المحجر وخلف مقلة العين، ثم اضغطهما بلطف خلف المقلة دون الضغط عليها واسحبهما للأمام. يجب أن تكون قادراً على الإمساك بالنسيج الضام وليس بمقلة العين. إذا قمت بتدوير مقلة العين إلى الجانب، يمكنك رؤية نسيج المحجر جنباً إلى جنب مع العصب البصري الأبيض.
هذا تشريح ثانٍ لمجرد توضيح الأمر مرة أخرى، حيث يتم الدخول من المآق، ودفع الملقط خلف مقلة العين، والإمساك بالنسيج الضام، وسحبه للأمام دون الضغط على مقلة العين نفسها. ومرة أخرى، يمكنك رؤية النسيج الضام في الشريط الطويل الأبيض للعصب البصري. ولإحداث جرح ثاقب، أمسك مقلة العين من موضع اندغام العضلة وأدخل إبرة خلف الحوف مباشرة بجانب المكان الذي تمسك منه العين لتثبيتها.
سيسمح ذلك للمثبت بالدخول إلى العين. إذا أجريت الثقب بعيداً عن مكان إمساكك بالعين، ستكون مقلة العين غير مستقرة للغاية، وسيكون من الصعب جعل ذلك الجرح طويلاً دون ضغط العين أو تسليط ضغط غير مبرر. يمكنك أيضاً الإمساك بجميع الأنسجة الضامة الموجودة خلف مقلة العين مباشرة.
لا تتطلب بعض المثبتات إجراء جرح ثقبي. وبشكل عام، نضع العين في قارورة وميضية سعة 5 cc مع ما لا يقل عن 3 ccs من المثبت لضمان غمر العين تماماً. أما بالنسبة للحيوانات المثبتة عن طريق التروية، فإن التشريح الدقيق يكون ضرورياً.
نستخدم ملقط كاليبيري منحنيًا ومقص ويسكوت منحنيًا. أمسك الجفن السفلي باستخدام ملقط كاليبيري، ثم أدخل المقص مقابل العظم الحجاجي، وابدأ في قص النسيج الضام.
نستخدم المنحنى البعيد عن مقلة العين ونتجنب استخدامه في تحديد الحجم. يمكن العمل على أي جزء من العين على طول حافة الجفن السفلي من الزاوية الإنسية إلى الزاوية الوحشية. عند نقطة معينة، سيتم إزالة معظم النسيج الضام، وعندها يمكنك تمرير المقص خلف المقلة وسحبها بعيداً.
إليك مثال آخر، حيث يتم إدخال المقص في المحجر، ولكن مقابل العظم الحجاجي بدلاً من مقلة العين، مع قص الأنسجة الضامة. سيؤدي ذلك إلى البدء في تحرير مقلة العين، والتي تكون مثل كرة سلة داخل سلة. استخدم الملقط لإبعاد الجفون وإجراء شقوق قصيرة ولطيفة حول مقلة العين.
نقوم هنا بالإمساك بالنسيج الضام أو بموضع اندغام العضلة باستخدام ملقط Collibra، ونكمل عملية قطع مقلة العين وفصلها عن النسيج الضام للحجاج. بعد تثبيت مقل العيون بشكل مناسب، وفي حال الحاجة إلى نقلها، نضع بعض فيلم البارافين (para film) حول قارورة الحفظ.
يجب أن تكون التعبئة والتغليف وفقاً للوائح الجامعة والحكومة الخاصة بك. عادةً ما نضع هذه العينات في حاوية تحتوي على بعض القطن لامتصاص أي سائل، ويجب إغلاق هذه الحاوية بإحكام شديد. ثم توضع حاوية الشحن هذه داخل كيس من غلاف الفقاعات.
يُوضع هذا في عبوة شحن مخبرية للسوائل، إلى جانب أي وثائق مرفقة.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
يوضح هذا الفيديو تقنية استئصال عين الفأر، وهي عملية حاسمة لتثبيت الأنسجة في فحوصات التنميط الظاهري عالية الإنتاجية. تتضمن العملية إزالة مقلة العين من محجرها، مع تسليط الضوء على المعالم التشريحية لضمان الوضوح.
يتيح التنميط الظاهري عالي الإنتاجية عن بُعد لعيون الفئران الاستفادة الموزعة من الموارد الجينية وتسريع اكتشاف الارتباطات بين النمط الجيني والنمط الظاهري في نماذج أمراض العيون. وتعمل بروتوكولات استئصال العين ونقل الأنسجة الموحدة على تقليل العوائق الجغرافية والتشغيلية، مما يدعم الأبحاث قبل السريرية القابلة للتوسع والمتعددة المواقع. ويعزز هذا النهج إمكانية الوصول على نطاق المحفظة الكاملة إلى السلالات المعدلة وراثياً النادرة أو الموزعة جغرافياً من أجل التحقق من الأهداف في المراحل المبكرة والفحص المظهري.
يدمج بروتوكول استئصال النواة ونقل الأنسجة عن بُعد هذا في مرحلة الاكتشاف المبكر والتسلسل قبل السريري، مما يربط بين توليد النماذج الجينية وبين التنميط الظاهري والتحليل المركزي.