اختبار ماوس القسري السباحة

يُعد اختبار السباحة القسرية للفئران اختباراً شائعاً يُستخدم للتنبؤ بفعالية مضادات الاكتئاب. يوضح هذا الفيديو إجراءات نسخة اختبار السباحة القسرية المخصصة للفئران. تختلف نسخة الفئران عن النسخة المخصصة للجرذان، ولا ينبغي استخدامهما بشكل متبادل.

في اختبار السباحة القسري، يتم وضع الفئران في خزان مملوء بالماء. تظل الفأرة في الخزان لمدة ست دقائق، ويتم تسجيل سلوكيات الخاضع للاختبار خلال هذه المدة.

عند نهاية فترة الاختبار التي تستغرق ست دقائق، يتم إخراج الحيوان من الماء. وبعد اكتمال الاختبار، تُنقل التسجيلات المرئية إلى جهاز كمبيوتر أو شاشة فيديو. ولغرض التحليل، يقوم الفاحص بقياس الوقت الذي يقضيه الفأر في المقاومة خلال الدقائق الأربع الأخيرة من جلسة الست دقائق.

تزيد الأدوية المضادة للاكتئاب من مقدار الوقت الذي يقضيه الكائن في المقاومة، وهو ما ينعكس في تقصير فترات وقت عدم الحركة. مرحباً، اسمي شون من مختبر الدكتور Todd Gould في كلية الطب بجامعة Maryland.

مرحباً، أنا شانتيل من نفس المختبر. سنوضح لكم في هذا الفيديو كيفية إجراء وتقييم اختبار السباحة القسري في الفئران. يُستخدم اختبار السباحة القسري للفئران لتقييم الفعالية المحتملة للعلاجات المضادة للاكتئاب.

فلنبدأ الآن. نستخدم خزانات أسطوانية شفافة مصنوعة من مادة متينة، مثل البلكسي جلاس، ويتم اختيار أبعاد الخزان لمنع الفئران من الهروب ومن وصول أقدامها أو ذيولها إلى القاع. املأ الخزان بمياه الصنبور حتى المستوى المحدد والمؤشر عليه، ثم اضبط درجة حرارة الماء.

يجب أن تتراوح درجة الحرارة بين 23 و25 درجة Celsius. ويجب ترتيب خزانات المياه من أجل التصوير بالفيديو. وفي مختبرنا، نُجري اختبار السباحة القسرية مع أربعة إلى خمسة من الخاضعين للتجربة في المرة الواحدة بين الخزانات.

نقوم بوضع فواصل لمنع الخاضعين للتجربة من رؤية بعضهم البعض. وتوفر هذه الفواصل أيضاً تبايناً في الخلفية مع الفئران. وبالنسبة للفئران المهقبة، يوفر اللون الأسود تبايناً جيداً لتسجيلات الفيديو.

بالنسبة لسلالات الفئران ذات الألوان الداكنة، تعد الخلفية البيضاء أو الكريمية مناسبة. قبل البدء في التجربة، قم بتشغيل جهاز الضوضاء البيضاء، وتأكد من أن مستوى صوت الجهاز ليس مرتفعاً جداً.

يجب أن تقتصر وظيفتها على حجب أي ضوضاء متقطعة فقط. يتم إحضار الخاضعين للتجربة إلى غرفة التجربة. وبشكل عام، تستغرق فترة التأقلم هذه ساعة واحدة على الأقل.

يجب الحفاظ على ثبات الظروف في غرفة التجارب، وأن تكون خالية من الضوضاء، والتغيرات في مستويات الإضاءة، وأي اضطرابات أخرى محتملة. وبمجرد انتهاء فترة التعود، يمكن بدء الاختبار. ومن المهم تسجيل اسم الجلسة. أولاً، أمسك الفئران من ذيولها وضعها برفق داخل الحوض.

من المهم القيام بذلك ببطء حتى تتمكن الحيوانات من توجيه نفسها عند ملامسة سطح الماء. في نهاية فترة الاختبار التي تستغرق ست دقائق، قم بتسجيل عملية تحديد الحيوانات بالفيديو ثم أوقف التسجيل. أخرج الفئران بنفس الترتيب الذي بدأت به، وجففها بلطف باستخدام مناشف ورقية قبل إعادتها إلى القفص.

يجب عدم إعادة استخدام المياه الموجودة في الخزانات. والآن بعد أن انتهينا من الاختبار، لننتقل إلى تقييم السلوكيات في اختبار السباحة القسرية الجماعية (Mass Force Swim test). المتغير الرئيسي الذي يتم تقييمه هو مقدار الوقت الذي تظل فيه الحيوانات غير متحركة خلال التجربة.

بشكل عام في اختبار السباحة القسري للفئران، يتم تقييم الدقائق الأربع الأخيرة من الجلسة الإجمالية التي تستغرق ست دقائق. ويعود السبب في ذلك إلى أن معظم الفئران، بغض النظر عن العلاج، تظل نشطة باستمرار في المراحل المبكرة من الاختبار، وهذا النشاط يحجب أي تأثيرات محتملة للعلاج.

كما تلاحظ في هذا الفيديو، تكون الفئران نشطة للغاية خلال المراحل الأولية من الاختبار. وسينخفض هذا النشاط بعد مرور أول دقيقتين من الوقت الذي يقضيه كل فأر. يتم قياس الحركة بواسطة ساعة إيقاف تظهر على الشاشة ويتم التحكم فيها بواسطة لوحة تحكم.

تقوم ساعة التوقيت الأخرى بالعد التنازلي لـ 240 ثانية. وتُعرَّف حركية الوقت في الاختبار بأنها أي حركات بخلاف تلك الضرورية لموازنة الجسم وإبقاء الرأس فوق الماء. والآن، لنلقِ نظرة على نموذج لتقييم إحدى التجارب.

نقوم أولاً بتغطية الفئران الأخرى التي لا تخضع للتقييم لمنع حدوث أي ارتباك. تطفو الفئران عموماً في الماء بسهولة، ومع ذلك، فإنها تظل تظهر حركات بسيطة لموازنة أجسامها والحفاظ على رؤوسها فوق مستوى الماء.

لا تُعد هذه السلوكيات محاولة للهرب ولا ينبغي تسجيلها على أنها حركة. كما أنه بعد نوبة واحدة من الحركة، وبالرغم من أن الفئران تكون غير متحركة أساساً، إلا أنها قد تنجرف في الماء نتيجة الزخم الذي اكتسبته سابقاً، وهذه التحركات أيضاً لا ينبغي تسجيلها على أنها حركة. لننتقل الآن إلى مقطع فيديو آخر.

يُظهر الفأر في هذا الفيديو فترات من الحركة وعدم الحركة كما هو موضح على الشاشة، وسيقوم المراقب بتسجيل وقت الحركة. وبينما يكون من الممكن نظرياً قياس وقت عدم الحركة مباشرة، إلا أنه من الأسهل رصد وقياس الحركات النشطة بدلاً من رصد غياب مثل هذه الحركات. وجرت العادة على تسجيل وقت عدم الحركة في التقارير.

يتم تحديد وقت عدم الحركة عن طريق طرح وقت الحركة من 240 ثانية. يتطلب تسجيل نقاط اختبار السباحة الرابع الكثير من التدريب والممارسة. ومن أجل الوصول إلى مستويات عالية من الموثوقية، من المهم وضع معيار حي داخلي وتدريب كل مراقب جديد حتى يصل إلى مستويات عالية من الموثوقية.

في هذا الفيديو، نشرح نسخة اختبار السباحة القسرية المخصصة للفئران. نتمنى لكم التوفيق في تجاربكم المستقبلية.