اختبار الذيل تعليق

يعتبر اختبار تعليق الذيل اختباراً سلوكياً شائعاً يُستخدم للتنبؤ بفعالية مضادات الاكتئاب لمختلف التدخلات التجريبية. يوضح هذا الفيديو إجراءات هذا الاختبار. وقد تم التحقق من صحة اختبار تعليق الذيل للفئران (mouse)، ولا يُوصى به للقوارض الأكبر حجماً.

في اختبار تعليق الذيل، يتم تعليق الفئران من ذيولها. وتظل الفئران معلقة لمدة ست دقائق، حيث يتم تسجيل سلوكيات الحيوانات الخاضعة للتجربة خلال هذه الفترة.

في نهاية فترة الاختبار التي تستغرق ست دقائق، يتم إزالة الشريط من ذيل الخاضع للتجربة. وبعد اكتمال الاختبار، تُنقل التسجيلات المرئية إلى جهاز كمبيوتر أو شاشة فيديو. ولغرض التحليل، يقوم المراقب بقياس الوقت الذي يقضيه الفأر في المقاومة والمكافحة خلال جلسة الست دقائق كاملة.

تزيد المركبات ذات الخصائص المضادة للاكتئاب من مقدار الوقت الذي يقضيه الحيوان في المقاومة، وينعكس ذلك في قصر فترات عدم الحركة. فعلى سبيل المثال، ذكرنا سابقاً أن دواء الليثيوم المثبت للمزاج، والذي يُستخدم سريرياً كدواء مساعد مضاد للاكتئاب، قلل من وقت عدم الحركة في اختبار تعليق الذيل.

مرحباً، اسمي شون من مختبر الدكتور تود غولد في قسم الطب النفسي بكلية الطب في جامعة ميريلاند في بالتيمور. ومرحباً، أنا شانتيل من المختبر نفسه. سنقوم في هذا الفيديو بتوضيح كيفية إجراء وتقييم اختبار تعليق الذيل.

يُستخدم اختبار تعليق الذيل لتقييم الفعالية المحتملة لعلاجات مضادات الاكتئاب. لذا، دعونا ننتقل إلى المختبر لنبين لكم كيفية إجراء التجربة. وعلى الرغم من أن ذلك ليس شرطاً، فإننا نستخدم صندوق تعليق ذيل مصمماً خصيصاً لهذا الغرض.

بالنسبة لهذا الاختبار، ينقسم صندوق تعليق الذيل لدينا إلى أربعة أقسام، حيث يخصص كل قسم لفأر واحد. وتمنع الفواصل الفئران من رؤية بعضها البعض أثناء الاختبار.

ومع ذلك، يمكن استخدام رف أو أي هيكل آخر لتعليق الفئران. يتم اختيار أبعاد صندوق اختبار تعليق الذيل لمنع الفئران من الوصول إلى الحواف والتمسك بها. قبل البدء في التجربة، قم بقص قطع كافية من الشريط اللاصق وحدد الجزء الذي سيُستخدم للصق بالذيل.

سنستخدم في مختبرنا قطعاً من الشريط اللاصق بطول 17 سنتيمتر. يجب تحديد مسافة سنتيمترين من نهاية قطعة الشريط هذه، والتي ستُستخدم للصقها على الذيل. نقوم بوضع الذيل في منتصف هذا الجزء الذي يبلغ طوله سنتيمترين.

ضع صندوق اختبار تعليق الذيل وكاميرا الفيديو في مواقعهما. وقبل إدخال الحيوانات، يجب تنظيف الصندوق جيداً بمحلول تعقيم لتحييد الروائح المتبقية من العينات السابقة. نستخدم في مختبرنا صندوقين مختلفين لتعليق الذيل، متطابقين في جميع الجوانب باستثناء اللون.

بالنسبة للفئران المهقبة، يوفر الصندوق الرمادي الداكن تباينًا جيدًا لتسجيلات الفيديو. أما بالنسبة لسلالات الفئران ذات الألوان الداكنة، فإن الصندوق الأبيض يكون مناسبًا. ابدأ بتشغيل جهاز الضوضاء البيضاء.

يجب أن تعمل هذه العملية على حجب أي أصوات متقطعة. يتم إحضار الفئران إلى غرفة الإجراءات للتأقلم. كما يجب الحفاظ على ثبات الظروف في الغرفة، بحيث تكون خالية من الضوضاء، والتغيرات في مستويات الإضاءة، وأي اضطرابات أخرى محتملة.

تستمر هذه الفترة عمومًا لمدة ساعة واحدة على الأقل. وبمجرد انتهاء فترة التأقلم، يمكن البدء في الاختبار لمنع بعض سلالات الفئران من تسلق ذيولها. وخلال اختبار تعليق الذيل، نستخدم أسطوانات بلاستيكية نضعها فوق الذيول.

تستقر هذه الأسطوانات عند قاعدة الذيول أثناء الاختبار. نستخدم في مختبرنا أسطوانات بلاستيكية يبلغ طولها 4 cm، وقطرها 1 cm، وتزن 1.5 g. وفي حال استخدام الأسطوانات البلاستيكية لمنع التسلق، يجب وضعها على الذيول قبل وضع الشريط اللاصق.

نضع الشريط اللاصق على الطرف النهائي للذيل مع ترك مسافة تتراوح بين اثنين إلى ثلاثة مليمترات من الذيل خارج نطاق الشريط. يتم لصق الشريط على ذيول الفئران داخل أقفاصها الخاصة. استخدم الطرف المحدد من الشريط وتأكد من التصاق الشريط بالذيل ثم التصاقه بنفسه.

بمجرد وضع الشريط، قم بتثبيت كل فأر على جدران القفص لمنع تشابك الشريط الملحق بالحيوانات المختلفة. أتمم هذه العملية بسرعة، وإلا ستتعرض الفئران لإجهاد غير ضروري.

يجب بدء التسجيل قبل تعليق الحيوانات. يتم تعليق الحيوانات بوضع الطرف الحر للشريط على قضيب التعليق بترتيب متوازن بين مجموعات العلاج وبطريقة لا تعيق رؤية الكاميرا. ونظراً لأن الفئران تُعلق واحدة تلو الأخرى، فإن كل حيوان يبدأ الاختبار في وقت مختلف قليلاً.

تأكد من بدء تسجيل نقاط كل فأر بالضبط عند بداية فترة تعليقه. من المهم عدم حجب رؤية الكاميرا؛ وبما أن جلسة تعليق الذيل بأكملها سيتم تسجيل نقاطها، فإن حجب رؤية الكاميرا قد يؤدي إلى فقدان البيانات.

تأكد من أن جميع نهايات الأشرطة متعامدة مع قضيب التعليق وبنفس طول الارتخاء. ابدأ تشغيل المؤقت لكل خاضع للاختبار. تستغرق عملية اختبار تعليق الذيل ست دقائق.

بمجرد انقضاء فترة الاختبار البالغة ست دقائق، قم بإزالة الشريط اللاصق من نهاية كل ذيل وأعد الفئران إلى قفصها الأصلي. وفي نهاية الاختبار، يجب تسجيل معلومات الخاضعين للتجربة عبر الفيديو. وبعد إعادة الفئران إلى غرفة المستعمرة، يجب تنظيف صندوق الاختبار جيداً ومسحه بمحلول تعقيم.

بعد أن انتهينا من الاختبار، سنناقش الآن كيفية تسجيل السلوكيات. المتغير الوحيد الذي يتم تقييمه عادةً عند تسجيل اختبار تعليق الذيل هو الوقت الذي تظل فيه الحيوانات ساكنة. وللحصول على وقت السكون، سنقوم بقياس الوقت الذي تكون فيه الفئران متحركة ونطرحه من وقت الاختبار البالغ ست دقائق. سنقوم بتسجيل الدقائق الست كاملة من الاختبار.

نقوم أولاً بتغطية الفئران التي لا تخضع للتقييم للسماح للمراقب بالتركيز على حيوان واحد فقط خلال الوقت المخصص لكل فأر. يتم قياس الحركة بواسطة ساعة إيقاف تظهر على الشاشة ويتم التحكم فيها بواسطة جهاز تحكم بالألعاب. هنا، كما ترون، توجد ساعتا إيقاف منفصلتان على الشاشة يتم التحكم فيهما في آن واحد.

تقوم ساعة التوقيت الأولى بالعد التنازلي بدءاً من 360 ثانية لتشير إلى مدة الاختبار للمراقب. بينما تقيس ساعة التوقيت الثانية الوقت الذي يظل فيه الأشخاص الخاضعون للتجربة في حالة حركة. وكما قد تلاحظ، فإن ساعة التوقيت الأولى تغطي ساعة التوقيت الثانية، بحيث لا تظهر للمراقب سوى الأجزاء من الألف من الثانية.

بهذه الطريقة، سيتمكن المراقب من رؤية ما إذا كانت ساعة التوقيت تعمل، ولكنه لن يتمكن من رؤية إجمالي وقت الحركة حتى يتم الانتهاء من تسجيل النتائج. نقوم بذلك لمنع انحياز المراقب من التأثير على النتائج. تظهر الفئران، خاصة في بداية الجلسة، سلوكيات مرتبطة بالهروب.

تشمل هذه السلوكيات محاولة الوصول إلى جدران الجهاز وقضيب التعليق، وهزات قوية للجسم، وحركات للأطراف تشبه الجري. تشكل هذه الحركات بوضوح حالة من الحركية. ومع ذلك، تصبح الحركات أكثر دقة مع تقدم الاختبار.

في مختبرنا، لا نحتسب الحركات الصغيرة المقتصرة على القوائم الأمامية، دون أي حركة في القوائم الخلفية، على أنها قدرة على الحركة. بالإضافة إلى ذلك، لا تُعتبر الأرجحات الشبيهة بالبندول، والناتجة عن اكتساب الزخم خلال نوبات الحركة السابقة، قدرة على الحركة. لننتقل الآن إلى رؤية كيفية تسجيل النقاط في جلسة اختبار تعليق الذيل فعلية.

يتم عادةً تسجيل وقت عدم الحركة، وليس وقت الحركة. ويمكن حساب وقت عدم الحركة عن طريق طرح إجمالي وقت الحركة من وقت الاختبار البالغ 360 ثانية. التسجيل. يتطلب اختبار تعليق الذيل التدريب والممارسة.

من المهم وضع معيار داخلي للمختبر وتدريب المراقبين الجدد حتى يصلوا إلى مستوى عالٍ من الموثوقية. ونوضح في هذه الورقة كيفية تنفيذ اختبار تعليق الذيل وتقييم نتائجه. تمنياتنا لكم بالتوفيق في تجاربكم المستقبلية.