سريع تحديد العتبة Nociceptive الحرارية في الفئران المصابة بمرض السكر

الهدف العام من هذا الإجراء هو تحديد عتبة الاستقبال الحراري للألم في الجرذان السليمة والجرذان المصابة بداء السكري. تتمثل الخطوة الأولى في وضع الحيوان على جهاز الصفيحة الساخنة المتدرجة ومقياس التسكين. بعد ذلك، يتم رفع درجة حرارة الصفيحة الساخنة تدريجياً أثناء تسخين السطح.

يتم مراقبة الحيوان للتأكد من عدم ظهور سلوكيات هجومية. وعند ملاحظة هذا السلوك، يتم إيقاف التسخين وتسجيل درجة حرارة الصفيحة في تلك اللحظة. وفي النهاية، يمكن الحصول على نتائج تظهر التغيرات في عتبة استقبال الألم الحراري لدى الحيوانات التي عولجت بمسكنات الألم أو تلك التي تعاني من اعتلال الأعصاب السكري المؤلم.

تتمثل الميزة الرئيسية لهذه التقنية مقارنة بالطرق الحالية مثل الصفيحة الساخنة، والتي تُضبط عادةً عند درجة حرارة تتجاوز العتبة، في أن طرقنا تزيد من درجة حرارة الصفيحة تدريجياً، مما يسمح بالتحديد الدقيق لعتبة استقبال الألم الحراري. يتم تحديد عتبة استقبال الألم الحراري أو TNT باستخدام مقياس تسكين الألم بالصفيحة الساخنة المتزايدة، أو IH pam. وتشمل مكونات هذا النظام غرفة ملاحظة من البلكسي جلاس، وصفيحة ألومنيوم يتم التحكم في درجة حرارتها، ولوحة مفاتيح تُستخدم للبرمجة، ومفتاح قدم للتحكم عن بُعد في الوحدة.

تُجمع البيانات باستخدام برنامج مخصص على جهاز كمبيوتر قريب. وبدلاً من ذلك، يمكن طباعة نسخ ورقية باستخدام منفذ تسلسلي موجود في الوحدة. ضع مرآة خلف غرفة البلكسيجلاس لزيادة وضوح رؤية سلوك الحيوان.

بعد ذلك، قم بضبط معدلات التسخين المطلوبة، بالإضافة إلى درجات حرارة الاستعداد الأولية ودرجات حرارة القطع النهائية. اضغط على مفتاح القدم لبدء وتشغيل النظام. تأكد من تسجيل درجات حرارة الاستعداد الأولية ودرجات حرارة القطع النهائية، وكذلك الوقت المستغرق للوصول إلى درجة الحرارة النهائية.

إذا رغب الباحث في ذلك، يمكنه اختبار النظام على نفسه، وذلك بسحب اليد من الصفيحة المعدنية عند لحظة الشعور بالألم. يجب ألا يتسبب هذا الإدراك في إلحاق أي ضرر بالجلد، ولا أن يؤدي إلى أي انزعاج لاحق.

ابدأ عملية التأقلم في الليلة السابقة عن طريق وضع الأقفاص على المنضدة التي سيتم فيها الاختبار. وقبل الاختبار بساعتين، قم بتشغيل جهاز IH pan لتعريف الحيوانات بضوضاء الوحدة في الخلفية.

في هذه المرحلة، يمكن إعداد النظام واختباره كما رأينا سابقاً. بعد تأقلم الحيوانات مع البيئة، ضع جرذاً بلطف في غرفة البلكسيجلاس الموجودة فوق السطح الدافئ. اسمح للحيوان باستكشاف الغرفة لبضع دقائق.

ابدأ الاختبار. وبمجرد أن يبدو الحيوان مستقراً لبدء التجربة، اضغط على مفتاح القدم لبدء تسخين الصفيحة. راقب سلوك الحيوان أثناء تسخين الصفيحة.

بشكل عام، سيواجه الأشخاص الجدد في هذه الطريقة صعوبة لأن تحديد سلوك الهجوم الجماعي ليس سهلاً دائماً ويتطلب التدريب. لا يتميز السلوك غير الهجومي بلعق أو هز أو رفع أي من المسام الخلفية. ومن المفيد ملاحظة أن أول سلوك قد يُلاحظ هو لعق المسام الأربعة، يليه رد فعل من المسام الخلفية.

عند ملاحظة السلوك الأكثر حدة، اضغط على مفتاح القدم لإنهاء التجربة وإعادة الحيوان إلى قفصه. وتعتبر درجة الحرارة التي تثير هذا السلوك هي عتبة استقبال الألم الحراري أو TNT للحيوان الضابط. يتم بعد ذلك تنظيف الوحدة وتكرار الاختبار للحيوان التالي.

فيما يلي عتبات استقبال الألم الحرارية للجرذان والفئران البالغة السليمة. وتُظهر البيانات الواردة هنا أن عتبة استقبال الألم الحرارية (TNT) للجرذان لم تتغير عند اختبارها على مدى فترة زمنية مدتها أربعة أيام. وبالمثل، كانت عتبة استقبال الألم الحرارية (TNT) للفئران متسقة بين مختلف الأعمار.

في هذا المثال، تم قياس عتبات الاستجابة الحرارية (TN TS) بشكل متكرر في جرذان شابة مصابة بداء السكري المستحث بـ STZ. ويمكن ملاحظة انخفاض مستمر في عتبات الاستجابة الحرارية بدءاً من أسبوعين بعد تحريض داء السكري. وهنا، تم استخدام جهاز IH pam لاختبار الخصائص الحادة المضادة للألم للمركب المسكن.

أنتج المركب A تأثيراً مسكناً خفيفاً في الحيوانات الضابطة مقارنة بتلك التي تلقت الوسائط. ومع ذلك، كان التسكين أكثر وضوحاً في الحيوانات المصابة بداء السكري التي تلقت المركب مقارنة بمجموعات الضبط التي تلقت الوسائط. وأثناء محاولة تنفيذ هذا الإجراء، من المهم جداً تذكر مراقبة سلوك الحيوان باستمرار، وخاصة السلوكيات التي تحدث بالقرب من منطقة cept T للحيوان.