التحقيق المستندة إلى Endomicroscopy الليزر متحد البؤر في المسالك البولية: تقنية

الهدف من التجربة التالية هو توضيح الفحص المجهري الحي (in vivo microscopy) باستخدام التنظير الداخلي الليزري البؤري القائم على المسبار في مريض يخضع لعملية استئصال ورم المثانة عبر الإحليل. ويتم تحقيق ذلك أولاً باستخدام تنظير المثانة بالضوء الأبيض لمعاينة الظهارة البولية للمثانة بالكامل وتحديد أي آفات مخاطية غير طبيعية أو مشتبه بها. وفي الخطوة الثانية، يتم حقن مادة تباين داخل المثانة لتوفير تباين الفلورة اللازم للتصوير باستخدام المنظار الداخلي الليزري البؤري، وفي الخطوة الثالثة يتم إجراء الفحص المجهري الحي لكل منطقة ذات أهمية، مع تدوين السمات البنيوية الخلوية والوعائية للأنسجة.

في نهاية المطاف، يمكن مقارنة نتائج المجهر الحي (in vivo) بالتحليل الهيستوباثولوجي للخزعات المأخوذة من المناطق محل الاهتمام. سيقوم الدكتور Joseph Leal، جراح المسالك البولية الذي طور تطبيق المجهر الليزري متحد البؤر عبر المنظار (pCLE) للمجاري البولية في غرفة العمليات، باستعراض هذا الإجراء. بعد وضع المريض في وضعية الاستلقاء الحجري (lithotomy position)، ابدأ بإدخال منظار مثانة صلب عبر الإحليل باستخدام تنظير المثانة التقليدي بالضوء الأبيض لمراقبة مناطق المثانة تحت الضوء الأبيض.

قم بتحديد المناطق ذات الأهمية للفحص بالمجهر الليزري الداخلي البؤري باستخدام حلقة استئصال. يمكن استخدام وسائط التصوير البصري العياني الأخرى، مثل تنظير المثانة الفلوري والتصوير بالنطاق الضيق في هذه الخطوة لتحديد مناطق اشتباه إضافية، ثم أدخل قسطرة بولية معقمة في المثانة باستخدام محقنة طرفية سعة 60 milliliter، وقم بتسريب عامل التباين المخفف عن طريق الجاذبية.

بعد ذلك، قم بسد القسطرة البولية لإبقاء المادة التباينية في مكانها. وبعد مرور خمس دقائق، قم بتفريغ المادة من المثانة. ثم صب من 240 إلى 300 milliliters من المحلول الملحي العادي في محقنة سعة 60 milliliter لغسل أي بقايا من المادة التباينية من المثانة تمهيداً للحقن الوريدي للفلوريسئين.

اسحب 1 mL من الفلوريسين في حقنة. قم بتوصيل الحقنة بنقطة الوصول الوريدية واحقن من 0.5 إلى 1 mL من الفلوريسين وريدياً كدفعة واحدة مع غسل الخط بمحلول ملحي طبيعي. بعد حقن المادة التباينية، أخرج مسبار تصوير مجهري ليزري بؤري داخلي معقم من العبوة وقم بتوصيله بوحدة مسح الليزر.

بعد ذلك، قم بتسخين مسبار التصوير ومعايرته وفقاً لتعليمات الشركة المصنعة، ثم أعد إدخال منظار المثانة الصلب المزود بعدسة صفرية الدرجة في المثانة. والآن، قم بتمرير مسبار التصوير بالمجهر confocal endo microscopy عبر قناة العمل في منظار المثانة بحيث يكون طرف المسبار خارج نطاق المنظار مباشرة تحت الضوء الأبيض. حدد مناطق الاهتمام التي تم تعليمها مسبقاً بينما يقوم مسبار التصوير بمسح منطقة الاهتمام.

سجل الصور من أجل التحليل المستقبلي. ثم استخدم يد المشغل للتحكم في تصوير المجهر CONFOCAL endo microscopy. قم بفحص مناطق الاهتمام من خلال التلامس المباشر والسريع لإجراء تقطيع بصري لتلك المناطق.

قم بزيادة وخفض الضغط برفق على مسبار التصوير مع الحفاظ على الاتصال المباشر للوصول إلى الأورام الموجودة في الجزء الداخلي من المثانة. استخدم كوع وجسر AL قياسيين لتسهيل انحراف مسبار التصوير من أجل الاتصال المباشر بالمنطقة المستهدفة. وإذا لزم الأمر، يتم أخذ خزعات باردة من أي مناطق مستهدفة مقابلة تم فحصها بواسطة التنظير الداخلي الليزري البؤري.

عند الانتهاء من التصوير، قم بإزالة مسبار التصوير المجهري الداخلي البؤري من القناة التشغيلية. أثناء تنفيذ هذا الإجراء، من المهم تذكر غسل الفلورسين الزائد من داخل المثانة قبل التصوير، والحفاظ على تلامس بزاوية 90 درجة بين المسبار والسطح المخاطي. هذه الصورة الأولى مأخوذة من تنظير مثانة تمثيلي بالضوء الأبيض لورم حليمي مصبوغ داخل الأوعية.

لاحظ مسبار التصوير بقطر 2.6 millimeter الظاهر في أسفل الصورة. تمثل هاتان الصورتان صور مجهر ليزر متحد البؤر داخلي (confocal laser endo microscopy) تم الحصول عليهما من ورمين مختلفين في المثانة باستخدام الفلوريسين عن طريق الحقن داخل المثانة والحقن الوريدي على التوالي. ونظرًا لإمكانية تبديل مسابير التصوير بين الأنواع المختلفة من مناظير المثانة، يمكن دمج المجهر الليزري متحد البؤر الداخلي مع أنماط تصوير ناشئة أخرى، مما قد يؤدي إلى تحسين الدقة التشخيصية لكل تقنية على حدة، بما في ذلك تنظير المثانة الفلوري كما هو موضح هنا، والتصوير بالنطاق الضيق كما هو موضح هنا.

وبالتالي، قد توفر هذه الطريقة رؤية معمقة حول سرطان المثانة. كما يمكن تطبيقها على أنظمة أخرى مثل سرطانات الخلايا الظهارية في المسالك البولية العلوية، والتي قد يصعب تشخيصها عن طريق الخزعة.