أغسطس 30, 2016
للتحقيق في مناهج التصنيع البسيطة لاحتياجات الفحص المتعددة ، أنشأنا نظام قناة ممتص للسوائل مصنوع من مادة قطنية. تم استخدام هذا الجهاز لإنشاء منصة كشف متعددة ، وحل مشكلات التلوث التي تؤثر عادة على الأجهزة الطبية الحيوية القائمة على التدفق الجانبي ، لتحليل البول السريري للنتريت والبروتين الكلي واليوروبيلينوجين.
الهدف العام من هذا البروتوكول هو تصنيع جهاز تحليلي من مادة سهلة المصدر ، قطن ، لاستخدامها في التحليل الخاص بك. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن الجهاز سهل التصنيع. إنها منخفضة التكلفة للغاية ، ويمكن استخدامها لفحوصات متعددة ، وسريعة التجميع.
الطريقة التحليلية مع الجهاز حساسة للكشف عن تلوث العينة والتفاعل. سيظهر الإجراء Shang-Chi Lin ، الذي كان له دور فعال في ابتكار الطريقة. ابدأ بإعداد أجهزة شريط الاختبار.
أولا ، حدد الكراهية للماء لقطن التنظيف لشرائط الاختبار باستخدام قياس زاوية التلامس القياسي مع قطرات من الماء منزوع الأيونات. بعد ذلك ، ابدأ في تصنيع الجهاز التحليلي المصنوع من القطن عن طريق تقطيع قطن التنظيف إلى قطع 5.5 سم × سنتيمتر واحد. استخدم قاطع الورق.
الخطوة التالية هي حفر مجموعات من ثلاثة ثقوب قطرها 0.5 سم في ورقة من فيلم التصفيح. حفر الثقوب في صفوف بطول سنتيمتر واحد بين الثقوب. كل مجموعة من الثقوب تصنع شريط اختبار ، ويمكن وضع ما يصل إلى 36 شريطا على ورقة قياسية من فيلم التصفيح.
بعد ذلك ، ضع قطن التنظيف بين الصفيحة المحفورة بالثقب من فيلم التصفيح وورقة غير محفورة من فيلم التصفيح. بعد ذلك ، استخدم آلة تغليف قياسية لتعبئة الجهاز. الآن ، قم بقص أجهزة شريط الاختبار الفردية 5.5 × سنتيمتر واحد من التجميع.
لعمل منحنيات قياسية لثلاثة حلول اختبار ، هناك حاجة إلى 48 شريطا. في كل منطقة اختبار ، استخدم شفرة حادة لعمل قناة صغيرة من مركز كل منطقة اختبار إلى الطبقة المحبة للماء للجهاز الطولي. احرص على قطع منتصف الطريق فقط من خلال الجهاز.
الآن ، أدخل أقراص ورق كروماتوغرافيا قطرها نصف سنتيمتر في كل من الثقوب الثلاثة. يجب أن يحتوي فيلم التصفيح على شفة صغيرة يمكن وضع حواف الوسادة تحتها. للحصول على شريط تحليل البول ، قم بتغطية ضمادات فحص النتريت بمحلول مؤشر النتريت.
قم بتغطية وسادة فحص البروتين بمحلول مؤشر BSA. وقم بتغطية وسادة فحص urobilinogen بمؤشر urobilinogen. اترك الشرائط تجف تماما في درجات الحرارة المحيطة قبل المتابعة.
لكل معيار معد ، قم بغمس الطرف الامتصاصي للجهاز المعد في المحلول القياسي لمدة عشر ثوان. يجب أن يمتص كل شريط 200 إلى 300 ميكرولتر من المحلول. قم بإعداد ثلاثة شرائط اختبار لكل تركيز قياسي يتم اختباره.
انتظر عشر دقائق حتى يكتمل التفاعل اللوني في درجة حرارة الغرفة. الآن ، افحص الأجهزة لتحليل لون كل لوحة اختبار. استخدم ماسح ضوئي لسطح المكتب في وضع RGB وبمعدل 600 نقطة في البوصة.
قم بتحليل الصورة الممسوحة ضوئيا باستخدام البرامج القياسية مثل ImageJ. بعد فتح ملفات الصور الممسوحة ضوئيا ، حدد الصورة في أوامر القائمة وحدد النوع لتحويل صور RGB إلى تدرج رمادي 8 بت. بعد ذلك، استخدم الأداة البيضاوية في شريط الأدوات لتحديد المنطقة التحليلية للوحة الاختبار.
بعد ذلك، حدد تحليل في أوامر القائمة، وحدد قياس لتحليل كثافة اللون. من متوسط نتائج الشدة ، قم بعمل المنحنيات القياسية للمقايسات. في هذه الحالة ، قم بتركيب المنحنى القياسي لمقايسة النتريت باستخدام نموذج تربيعي ، وقم بملاءمة المنحنيات القياسية للبروتين الكلي واليوروبيلينوجين باستخدام نماذج الانحدار الخطي.
على الواجهة الكارهة للماء للجهاز المصنع ، تم قياس زاوية التلامس في القطن الخارجي 127 درجة ، إعطاء أو أخذ 5 درجات. باستخدام الأجهزة ، تم عمل منحنيات قياسية لتحديد حدود الاكتشافات لكل فحص. بالنسبة للنتريت ، كان حد الكشف 0.147 مللي مولار.
بالنسبة لألبومين مصل الأبقار ، محلول اختبار البروتين ، كان حد الكشف 3.7 ميكرومولار. بالنسبة لليوروبيلينوجين ، كان حد الكشف 4.9 ملليغرام لكل لتر. بعد مشاهدة هذا الفيديو ، يجب أن يكون لديك فهم جيد لكيفية تصنيع أجهزة تشخيص القطن مع مقاومة الماء للطبقة الخارجية التي تساعد على تجنب التلوث.
بمجرد إتقانها ، يمكن القيام بهذه التقنية في ساعة أو ساعتين ، إذا تم إجراؤها بشكل صحيح. أثناء محاولة هذا الإجراء ، من المهم تحديد مقاومة الماء للطبقة الخارجية من قطن التطهير عن طريق قياس زاوية الاتصال.
اعرض النص الكامل واحصل على الوصول إلى آلاف الفيديوهات العلمية
تقدم هذه الدراسة نظام قنوات ممتصة للسوائل مصنوع من مادة قطنية، مصمم لتطبيقات تحليلية متعددة. يعالج هذا الجهاز مشكلات التلوث الشائعة في الأجهزة الطبية الحيوية القائمة على التدفق الجانبي، لا سيما في تحليل البول السريري.
يوفر هذا الجهاز التحليلي القائم على القطن حلاً منخفض التكلفة وسريع النشر للكشف عن تحاليل متعددة في البيئات ذات الموارد المحدودة. ومن خلال الاستفادة من الخصائص الطبيعية الماصة والكارهة للماء لألياف السليلوز، تتيح المنصة إجراء مقايسات التدفق الجانبي المقاومة للتلوث للتحليل السريري للبول. وتدعم بساطتها وقابلية توسعها عمليات فحص المؤشرات الحيوية في مراحلها المبكرة وسير عمل تطوير المقايسات في مجال البحث والتطوير في الصناعات الدوائية الحيوية.
يتناسب هذا الجهاز مع سير العمل بدءاً من مراحل الاكتشاف المبكرة وصولاً إلى الدراسات قبل السريرية، من خلال توفير طريقة سريعة ومنخفضة التكلفة لقياس كمية المواد التحليلية في البول، مما يدعم اتخاذ قرارات المضي قدماً أو التوقف في مرحلة تحديد المركبات الواعدة.