Drosophila 求偶条件化：一种检测果蝇学习与记忆能力的方法

首先， 分离 单个 幼稚的， 或 未交配的， 果蝇 melanogastor 雄性 然后， 到 条件 的 雄性， 添加 a 女性 那 有 已经 交配的， 和 是 因此 非接受性 到 求偶行为 这 雄性 显示 典型的 求偶行为 行为 如此 作为 定向 朝向 她 随后 她 周围 轻敲 她 与 a 前肢， 和 延伸 和 振动的 他的 翅膀 到 产生 的 求偶行为 song 他 可能 也 尝试 舔舐 和 交配。 无 物质 的 努力， 的 女性 残留物 非接受性 和 的 雄性 经历 a 排斥反应 因此， 他 学习 不 到 法院 a 此前 交配 雌性

至 测试 的 雄性 记忆， 允许 他 到 休息， 和 然后 暴露 他 到 另一个 交配 女性 的 训练好的 男性 将 不 尝试 到 法院 这 果蝇 因为 他 保留 的 记忆 的 过去 排斥反应 在 的 示例 方案， 我们 将 参见 如何 果蝇 是 处理 在……期间 的 训练 和 测试 相 的 a 求偶行为 条件化 检测 用于 短- 和 长期 记忆 评估

- 开始 由 麻醉 全部 的 的 成虫 从 的 四日龄 交配 文件。 分离 的 性别， 和 转移 单个 已交配 雌性 进入 每个 的 的 12 孔 的 一 行 的 a 外壳 阻断 然后， 使用 一个 吸液器 和 无 麻醉， 移除 的 幼稚的 雄性 来自 他们的 首页 孔 和 转移 他们 进入 的 孔 含有 的 已交配 雌性 重复 这 过程 在 的 第二 行 到 设置 向上 12 更多 对

为了 测试 学习 或 短期 记忆， 执行 这 设置 在 黎明， 和 让 的 培训 周期 开始 用于 一 小时 至 测试 长期 记忆， 设置 向上 的 对 四 小时 之前 主观的 黎明， 和 让 的 训练 开始 在 用于 八 小时

为了建立学习与记忆， 关键在于 雄性个体未能交配； 因此在训练期间需定期检查配对情况， 以确保 雄性正被拒绝交配。 在训练过程中应周期性地观察配对状态， 确认 雄性未发生交配行为。 这一点至关重要， 因为 只有当雄性遭遇拒绝时， 才能有效诱导学习和记忆的形成。 因此， 需反复核查 每一对实验个体， 防止 交配发生。 若发现交配行为， 应及时记录并排除该组数据。 检查时应尽量减少干扰， 避免影响动物的自然行为表现。 通过持续监控， 可确保实验条件的一致性与可靠性。 总之， 训练阶段中雄性被雌性拒绝是实验成功的关键指标。 应严格遵循此标准操作流程。 在观察过程中， 注意识别拒绝行为的典型特征， 如踢打、逃避或拒不受纳。 这些行为表明学习过程正在发生。 一旦确认雄性持续遭受拒绝， 即可认为训练有效。 后续测试将验证其是否形成稳定的记忆。 整个过程需保持客观、准确与可重复。 最终实现对学习记忆机制的科学探究。

当 的 培训 周期 是 超过， 轻柔地 移除 的 雄性 从 的 孔 使用 一个 吸液器, 不 碳 二氧化物 麻醉 加载 的 雄性 进入 a 新 外壳 阻断 对于 的 学习 实验, 立即 测试 的 雄性 随后 的 训练， 无 a 休息 时期。 对于 的 短期 记忆 实验, 允许 的 雄性 一个 小时 的 休息 之前 开始 的 测试 阶段 对于 的 长期 记忆 实验, 休息 的 雄性 直到 的 随后 主观的 黎明

为了 准备 用于 的 测试 载物台 的 的 实验， 麻醉 已交配 雌性 和 转移 他们 至 a 新 正常 食物 小瓶 允许 在 最少 一个 小时 用于 的 果蝇 到 回收 从 的 麻醉 接下来， 准备 的 测试 设置 是 当然 到 有 的 视频 记录仪 准备就绪 到 记录 活性 在 的 求偶行为 竞技场

至 开始 的 测试， 使用 温和的 吸取 到 转移 a 测试 男性 从 的 外壳 阻断 到 的 求偶行为 竞技场 与 的 分隔板 关闭。 移动 的 进入 孔 之间 的 竞技场 直到 全部 18 竞技场 是 加载 与 单个 雄性 然后， 使用 的 相同 技术, 转移 个体 已交配 雌性 至 每个 的 的 18 区域， 但 至 的 相反 侧面 的 的 分隔符。 现在， 仔细地 翻转 的 求偶行为 竞技场, 和 位置 它 下 的 视频 相机 与 的 良好 开口 向下 朝向 的 白色 实验台 表面 然后， 移除 的 分隔板 和 开始 的 视频 记录 记录 在 最少 10 分钟 的 活性 当 的 实验 是 以上 移除 的 果蝇 从 的 竞技场 使用 a 真空 和 通风 的 求偶行为 腔室 用于 在 最少 10 分钟 之前 他们 是 重复使用。