温度梯度实验：一种检测温度偏好的方法 果蝇 幼虫

- 为了 测试 的 温度 偏好 的 果蝇 幼虫， 创建 a 温度 梯度 由 加热 一 侧面 的 一个 铝 检测 平板 和 冷却 的 其他。 铝 具有 高 热的 电导率，含义 的 热 是 转移 高效地， 创建 a 稳定的 线性的 温度 梯度 之后 的 系统 具有 平衡的， 记录 的 温度 跨越 的 培养皿 在 相同大小的 温度 区域， 然后 加载 的 中心 的 的 培养皿 与 清洁 幼虫

用遮盖物 覆盖 整个 系统 以 消除 强光 的 干扰 并 开始 实验 的 运行。幼虫 会 沿 温度 梯度 分布，避开 过 热 或 过 冷 的 不 适 区 域，并 在 适 宜 温度区域定居。该 行为 称 为 趋温性。为 评估 幼虫 的 温度 偏好，记录 每 个 温 度 区 域 内 的个体数量。

在 示例 方案 中，我们 将 了解 如何 建立 一个 介于 18 至 28 摄氏度 之间 的 单向 温度 梯度 ， 以及 在 检测 过程 中 如何 处理 幼虫。

- 为了 准备 a 单向的 梯度， 首先， 创建 a 湿润 环境 环境 用于 的 检测 放置 二 铝 区块 连接的 到 分离 水 浴液 开启 湿润 纸张 毛巾 10 厘米 分开。 这 水 浴液 需要 至 是 预热的 向上 在 进展 接下来， 制备 100 毫升 的 1% 琼脂糖 和 添加 25 毫升 到 每个 检测 培养皿 开启 a 水平 表面。 一旦 的 琼脂糖 有 固化的， 轻柔地 揉搓 的 表面 与 a 三聚氰胺 海绵 到 制作 的 表面 轻微地 粗糙的

然后， 到 促进 高效 温度 转移， 填充 任何 缺口 之间 的 铝 区块 在 的 检测 平板 与 水 递送 从 a 喷雾 瓶 现在， 位置 的 检测 平板 开启 的 铝 块 和 制备 当然 那 的 界线划分 是 2 厘米 从 或者 边缘 到 精确地 匹配 的 边缘 的 的 铝 块

接下来， 喷雾 a 薄膜 的 水 到……上 的 表面 的 的 培养皿 因此 的 凝胶 执行 不 干燥 出 接下来， 覆盖 的 系统 与 a 纸板 盒子 至 减少 蒸发 和 帮助 稳定 的 温度 的 的 凝胶 表面。 等待 用于 5 到 10 分钟 到 允许 的 温度 到 平衡。 然后， 检查 的 表面 温度 在 的 培养皿 在 在 最少 12 位置 到 确保 那 那里 是 一个 即使 温度 始终 给予 或 取 2 度 摄氏度 然后， 替换 的 盒子 盖子 直到 的 检测 是 执行。

首先， 移除 的 纸板 盒子 结束 的 凝胶 和 迅速地 检查 的 凝胶 表面 温度 如果 的 表面 是 干燥的 喷雾 a 小 量 的 水 在 的 表面 如果 的 凝胶 是 良好， 然后 加载 100 到 200 幼虫 在 的 中心 的 每个 培养皿 使用 a 小 画笔 然后， 位置 a 盖子 结束 每个 检测 培养皿 到 陷阱 的 幼虫 和 盖子 的 设置 与 a 纸板 盒子 到 防止 光 暴露 的 检测 是 现在 在 进展

之后 10 到 30 分钟 移除 的 纸板 盒子 和 的 微孔板 盖子 然后， 摄影 的 培养皿 从 上方 到 记录 的 位置 的 的 幼虫 放置 的 盒子 上方 的 相机 到 避免 反射 开启 的 表面 的 的 凝胶 至 清洁 上 的 平板， 吸出 全部 的 幼虫 无论何处 他们 可能 有 分散的。

现在， 使用图像分析软件 计算 每 个区域 内 幼虫 的 百分比 分布 。根据 检测 板 上 的 刻度线 ， 每 2 厘米 划 一 条 线 ， 并 统计 每 个 区域 内 幼虫 的 数量 。 在 每个区域

- 当 计数, 忽略 幼虫 分布的 在 区域 0.5 厘米 来自 每个 边缘 凝胶 厚度 和 温度 条件 是 不 均匀的 近端 边缘