基于抗体功能化SERRS纳米探针成像:一种高灵敏度拉曼成像技术用于体内检测转移性卵巢癌

0 次观看3:17 分钟 • April 30th, 2023

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表面增强共振拉曼散射(SERRS)技术利用带有拉曼报告染料的分析物分子与入射光相互作用,产生非弹性光散射。

首先准备一种包含两种纳米探针的注射混合物——靶向纳米探针标记有特异性抗受体抗体,并携带一种独特的报告荧光染料;非靶向对照纳米探针则带有另一种不同的报告荧光染料。将该悬浮液注射到患有转移性卵巢癌的雌性小鼠腹腔内。给予足够时间,使纳米探针在腹腔内充分分布。

靶向抗受体抗体功能化的纳米探针可结合在卵巢癌细胞表面过表达的特定受体上,而非靶向纳米探针对内脏表面进行非特异性黏附。

处死小鼠,并将其仰卧固定在成像平台上。手术切开腹部并移除肠道,以暴露腹腔。在拉曼显微光谱仪下对小鼠进行成像。

在激光照射下,这两类纳米探针会使入射光以不同的方式散射,各自产生独特的光谱特征。通过处理光谱数据,确定纳米探针的相对丰度,从而将癌细胞与内脏背景组织区分开来。

进行纳米探针注射时,将两种类型的纳米探针离心,然后将沉淀重悬于新鲜MES缓冲液中,使其浓度为600皮摩尔。混合纳米颗粒后,将1毫升该溶液装入一支配有26号针头的1毫升注射器中(每只小鼠使用一支),通过腹腔注射将全部体积注入每只小鼠的腹部。随后,轻柔按摩小鼠腹部,以促进纳米颗粒在腹腔内的均匀分布。

至少25分钟后,将已处死的注射动物的四肢固定在手术平台上,使用有齿镊子和解剖剪去除皮肤以暴露腹膜。切开腹膜,将腹膜瓣固定在平台上,并用至少60毫升的PBS冲洗腹腔内部。随后,将平台转移至配备电动载物台的直立光学构型拉曼显微光谱仪中,在适当的成像参数下对腹部进行成像。

拉曼扫描的焦平面必须位于大多数内脏器官的表面,这一点至关重要。如果器官不在焦平面上,所获得的信号将无法使用。

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最后更新:22 八月 2026