记录急性海马脑片中的神经元场兴奋性突触后电位

将小鼠海马脑片置于充满人工脑脊液（aCSF）的浸没式记录室中。

使用固定网固定切片，以防止移动。

持续灌注含氧人工脑脊液以维持神经元活性。

安装参考电极以提供稳定的电压参考。

将刺激电极和记录电极与海马CA1区锥体细胞层平行并对齐放置。

施加电脉冲。

这些脉冲刺激神经元，导致电压门控离子通道开放，允许正离子内流，从而引发动作电位。

这些动作电位沿神经元传播，并诱导兴奋性神经递质释放到突触间隙中。

神经递质与突触后神经元上的特异性受体结合，导致正离子内流，从而引起膜电位的变化——即兴奋性突触后电位（EPSP）。

记录电极测量记录区域内一群神经元的兴奋性突触后电位——即场兴奋性突触后电位（field EPSP）。

将一小片镜头纸和固定在U形铂金丝上的尼龙网在浸入式切片室中预浸泡几分钟。之后，移除U形铂金丝。关闭循环，将切片放置在镜头纸上。然后立即将承载切片的网膜放在切片上方。

打开泵，让切片在不将物镜浸入ACSF的情况下平衡30分钟。在此期间，用ACSF填充记录电极，并将其安装到移液管持 holder 中。

接下来，将经过测试的环氧树脂绝缘钨刺激电极放入操纵器夹持器中，并将参考导线置于切片室中。在室中添加第二个参考电极，并将其连接至记录电极头级的参考插座。

在放大器控制软件中，单击零钳位模式框，然后双击输出增益列表框，选择增益为 100。双击高通滤波器列表框中的 bessel，选择 3 千赫兹，再双击低通滤波器列表框中的 AC，选择 0.1 赫兹。

在记录软件中，点击 Acquire Open Protocol。选择一个具备以下设置的方案：允许进行事件相关刺激，以每秒10至20千赫兹的采样率对放大后的电位进行50至100毫秒的数字化采集，并在开始片段记录10毫秒后自动触发电刺激隔离器。

将刺激电极和记录电极放置在与锥体细胞层平行且成一直线的位置。随后，点击 采集 编辑 协议，并在弹出窗口中选择 触发 选项卡。点击 触发 源 框，并选择 空格键 作为触发源。然后，点击 确定 按钮，并点击 记录 按钮以开始数据采集。

在刺激隔离器软件中，点击电压控制箱，输入零值，然后点击下载按钮。接着，点击记录软件窗口并按下空格键。重复此循环，依次输入从 1,000 到 8,000 的数值。将刺激强度与 FEPSP 斜率值进行关联，确定获得 FEPSP 斜率最大值 40% 所需的刺激强度。点击电压控制框并输入已确定的数值，然后点击下载按钮。

在记录软件中，单击停止按钮，然后单击采集菜单。在弹出窗口中点击编辑方案，并选择触发选项卡。随后，单击触发源框，并选择内部定时器作为触发源。单击确定按钮，然后单击记录按钮，以开始每60秒自动记录一次场电位。30至60分钟后，单击停止按钮。

在记录软件中，点击 采集 打开 协议，并选择与基线记录相同的协议。点击 确定 按钮，然后点击 记录。自动持续运行场电位记录 2 至 4 小时。完成后，点击 停止 按钮以终止记录。