用于远程高通量表型分析的小鼠眼球摘除术

本视频将演示小鼠的眼部结构以及摘除眼球的操作，即从眼窝中取出眼球。眼球的下界为下眼睑边缘。此处为内侧或鼻侧睑角。

后方为颞侧或外眦。上方为上睑缘。这是一个手术标本。

针头指向透明的角膜。我们可以看到晶状体略微突出于虹膜之外。虹膜位于此处，呈棕色，覆盖在晶状体上。

最重要的手术标志是这条白色线条，即角膜缘，穿刺切口将位于其后方。眼球的后半部分位于角膜缘后方，我们所指的是眼外肌的附着点。你可以看到此处肌肉紧贴眼球表面，以及填充眼眶的结缔组织，其中包括睑板腺（Arian gland）。

最后，这是通过钝性解剖获得的白色条状视神经。使用带有尖端的定制弯头敷料镊，首先将眼睑分开。这通常会使眼球向外突出。

用镊子小心地伸入眼眶并到达眼球后方，轻柔地在眼球后方挤压，但不要挤压眼球本身，并向前牵拉。此时应已夹住结缔组织而非眼球。若将眼球侧向翻转，便可看到伴随白色视神经的眶内组织。

这是第二次解剖，旨在再次展示操作过程：从眼角进入，将镊子推至眼球后方，夹住结缔组织，并向前牵拉，注意不要压迫眼球本身。再次可以看到，结缔组织位于白色视神经的长条状结构中。要制造穿刺伤口时，应通过一条眼外肌的附着点夹住眼球，并在角膜缘后方、靠近手持眼球的位置插入针头，以稳定眼球。

这将使固定剂进入眼球。如果穿刺位置距离你握持眼球的位置过远，眼球会非常不稳定，且难以在不压迫眼球或施加过度压力的情况下完成切口。你也可以抓住眼球后方的全部结缔组织。

某些固定剂不需要穿刺伤口。通常，我们将眼球置于一个5 cc的闪烁瓶中，加入至少3 cc的固定剂，以确保眼球完全浸没。对于灌注固定的动物，需要进行锐性解剖。

我们使用弯头卡利伯力镊和弯头韦斯科特剪刀。用卡利伯力镊夹住下眼睑。将剪刀紧贴眶骨插入，开始剪断结缔组织。

我们使用镊子远离眼球弯曲，并避免在操作中夹取组织。从一侧睑缘切迹到另一侧，下眼睑边缘的任何部位均可进行操作。当到达某一位置时，大部分结缔组织已被去除，此时可将剪刀滑入眼球后方，将眼球向外牵拉。

再看另一个示例，将剪刀插入眼眶，但这次是紧贴眶骨而非眼球，剪断周围的结缔组织。这将逐步松解眼球，眼球就像篮筐中的篮球。用镊子拉开眼睑，围绕眼球进行轻柔的短切口。

这里我们用Collibra钳夹住结缔组织或肌肉附着点，将眼球从眼眶结缔组织上完全剪下。眼球经适当固定后，若需运输，我们在样品管周围包裹一些Parafilm封口膜。

包装必须符合您所在大学及政府的相关规定。我们通常将样本放入带有少量棉花的容器中，以吸收可能渗出的液体，该容器必须严格密封。随后，将此运输容器放入气泡塑料袋中。

将其放入液体实验室运输包装中，并附上所有相关文件。