2021年5月9日
提出了一种快速且可靠的控制单个被捕获声学气泡形状振荡的技术,该技术基于两个气泡之间的聚并方法。这种稳态、对称性可控的气泡形状振荡可用于分析气泡界面附近产生的流体流动。
理解气泡引发的机械作用在许多工程和治疗应用中至关重要。控制气泡振荡及其周围诱导的流动仍然是一个具有挑战性的任务。所提出的技术能够控制声悬浮装置中单个被捕获气泡的形状振荡。
随后,诱导流动将被可视化,并与气泡动力学相关联。来自超声治疗应用实验室的学生 Estelle Mezianai 将演示该操作流程。首先通过放置振荡器的水箱,使激光的聚焦点位于水箱内部,从而在每次发射 5 至 10 毫焦激光脉冲时产生火花,以生成气泡。
打开超声换能器,并逐渐增加施加的电压,直至气泡不再垂直上升,而是向声压波腹方向偏转并被俘获。将背光照明设置为连续发光二极管光源,并启用高速相机以观察被俘获的气泡。为俘获气泡并记录其径向振荡,将帧尺寸设为128×128像素,采集速率为180千赫兹。
在0至8伏特的逐渐增加的施加换能器电压下,记录3至30毫秒内的气泡径向振荡。最后一次记录完成后,关闭超声换能器,并采集一幅背景图像用于后续分析。对于视频序列的后期处理,请运行VoltagePressure程序。
可执行文件。设定物理和实验参数,以及用于该系列记录的施加电压值。在气泡半径分析面板中,点击“加载参数”,然后选择包含所有视频序列和背景图像文件的文件夹。
对于每个视频文件,将绘制气泡半径在一个声学周期内的演变曲线,并叠加数值拟合结果。当所有视频处理完毕后,点击线性回归以对压力电压曲线进行线性拟合。数据将被保存到当前目录下的一个 txt 文件中。
为了诱导气泡聚并,打开超声换能器并施加足够高的电压,使相应的声压能够触发表面不稳定性,成核产生一个气泡,随后该气泡将迁移至其捕获位置。当被捕获的气泡仅表现出球形振荡时,产生一个新的激光火花。当新气泡到达捕获位置时,发生聚并。如果聚并后的气泡在火花产生后仅表现出球形振荡,则生成一个新的气泡。
但需注意,可能需要多次合并才能达到发生非球形形变的半径。当合并后的气泡出现非球形振荡时,记录约3至30毫秒的气泡振荡过程,并利用图像确定气泡形状振荡的模态数。为进行流体流动测量,将帧率设置为180千赫兹,帧尺寸设置为128×128像素,曝光时间为1微秒,以记录气泡界面的动力学行为。
为了记录染料示踪剂的运动,将帧尺寸设置为 1024 × 768 像素,帧速率为 600 赫兹,曝光时间为 1 毫秒。调整激光片的位置,使被照亮的粒子在相机中可见,并如示范所示成核并捕获一个气泡。进一步调整激光片的位置,使气泡后方出现阴影,并诱导气泡聚并,直至观察到稳定振荡的形状模式。
然后获取多个录像,交替记录气泡动力学和微流现象。进行图像处理与分析时,将包含捕获粒子运动的动态影像文件导入 ImageJ,点击图像、调整、亮度/对比度,然后选择自动。系统将自动生成优化后的图像,取代原始的暗背景。
为了显示最终的图案,点击图像、堆栈和Z投影,并为图像投影选择最大强度选项。系统将显示一幅输出图像,其中每个像素包含该堆栈中所有图像对应位置的最大值。此处展示的是气泡聚并的完整序列,由此可观察到随时间保持稳定、由对称性控制的非球形振荡现象。
两个球形振荡气泡的接近阶段在两者之间的液膜破裂时结束。融合发生后,会留下一个呈非球形振荡且具有复杂形状的单个气泡,这对应于任何动力系统受激发后振荡的瞬态过程。经过十余个到一百个声学周期后,振荡形态逐渐稳定,进入稳态振荡。
当气泡被捕获并表现出稳定的形状振荡时,可以捕捉到气泡附近荧光示踪粒子的运动。当发生形状振荡时,气泡界面附近会产生液体运动。通过在声学时间尺度上记录气泡界面的动力学行为,同时在较慢的时间尺度上记录粒子运动,可将微流模式与特定的形状模态数相关联。
如果气泡界面的动力学包含附加模式,则由于这些模式之间的多重相互作用会生成特定的流场模式,从而显著改变微流流动。为了安全地将流场模式与特定的形态振荡相关联,需注意必须交替捕捉气泡动力学行为和流体运动。这些发现可能在神经病理性应用中具有实际用途,例如用于转化介导的药物递送。
事实上,已知声学气泡会对细胞膜施加由流动引起的剪切应力,从而导致细胞膜通透性增加。
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本文介绍了一种用于控制和研究声悬浮室中单个微泡非球形振荡的方法。通过诱导并分析这些形态振荡,研究探讨了由此产生的流体流动(微流)及其与气泡动力学的相关性,这对于通过增强细胞膜通透性实现靶向药物和基因递送具有重要意义。
在声悬浮系统中控制非球形微泡的振荡,能够精确研究空化微流及其对生物屏障的力学效应。该技术对于生物制药研发具有战略意义,可通过以受控且局部化的方式增强细胞膜通透性,优化超声介导的药物和基因递送。该方法有助于在发现生物学与转化研究的交叉界面上,提升对作用机制进行去风险化预测的可信度。
该方法通过实现对微泡诱导的机械效应进行可控研究,连接了早期发现与转化研究,支持先导化合物的筛选及临床前模型的开发。