Mirando en la dinámica de las interacciones sociales: Juego de medición combates en ratas

El objetivo de este procedimiento es crear un entorno controlado que maximice la ocurrencia de comportamientos lúdicos y analizar la organización del comportamiento lúdico resultante. Esto se logra primero creando un entorno natural para la lucha lúdica, lo que implica que el comportamiento se realice en la oscuridad, así como proporcionar una arena de prueba con cama para ofrecer un entorno cómodo.

El segundo paso consiste en habituar pares de animales al aparato de prueba durante tres días consecutivos durante un período de 30 minutos. A continuación, el animal debe aislarse durante 24 horas antes de la evaluación de juegos de lucha. El último paso es probar cada par en la arena de juego durante 10 minutos.

En última instancia, el uso de estos sencillos pasos crea un contexto que facilita el juego y puede utilizarse para revelar diferencias debidas a manipulaciones experimentales. La principal ventaja de esta técnica, en comparación con otras como la grabación del comportamiento que ocurre naturalmente en una camada, es que se pueden recopilar grandes cantidades de datos en un corto período de tiempo, y las parejas de juego pueden ser estandarizadas. Aunque este método puede proporcionar información sobre las interacciones lúdicas, también puede aplicarse a otros sistemas, como otras especies o cepas modelo.

Los animales utilizados para las pruebas son destetados entre los días 21 y 23 posteriores al nacimiento, y dependiendo del diseño experimental, los animales pueden alojarse juntos después del destete en grupos de dos a cuatro en las combinaciones requeridas de machos y hembras. Las parejas que se alojan juntas también se habitúan juntas durante tres sesiones de 30 minutos directamente antes del inicio de las pruebas. Para ello, los animales se trasladan a la sala de pruebas oscurecida.

La habituación y la prueba se realizan durante el ciclo de luz del animal. Aunque las pruebas se llevan a cabo en una habitación oscura, mientras se evalúa la fase clara o la fase oscura del ciclo diario de la rata, nuestra experiencia indica que el juego aumenta cuando se realiza bajo condiciones de luz roja en comparación con condiciones de luz blanca. Aunque aquí elegimos realizar las pruebas en completa oscuridad, los animales se colocan en la caja de juego para la habituación.

El aparato de caja de juego consiste en una caja de plexiglás transparente que mide 50 centímetros por 50 centímetros por 50 centímetros, con una capa de uno a dos centímetros de aserrín estándar de mazorca de maíz. Tras la primera sesión de habituación, los sujetos se retiran de la caja de juego y se colocan juntos en su jaula de origen. Luego, el aserrín se descarta y el aparato de juego se limpia minuciosamente utilizando el antiséptico vercon o un equivalente.

Este es un agente superior para limpiar los olores de rata dejados por la pareja anterior, ya que no deja el olor fuerte y persistente de las toallitas o aerosoles alcohólicos. Luego se añade una cama nueva y comienza la sesión de habituación para la siguiente pareja. Este proceso se repite hasta que todas las parejas hayan completado tres sesiones de 30 minutos cada una.

Después del periodo de habituación, los pares se aíslan individualmente 24 horas antes de la prueba para maximizar las interacciones lúdicas. Períodos breves de aislamiento social aumentan la motivación para participar en juego social, sin tener un efecto similar en otros comportamientos sociales, como la investigación social. Aunque cualquier aislamiento produce este efecto, el impacto del aislamiento sobre el juego alcanza una asíntota alrededor de las 24 horas.

El día de la prueba, las ratas habituadas se transportan a la sala de pruebas oscurecida. Las parejas separadas se reúnen nuevamente al colocarlas en la caja de juego; asegúrese de que la videocámara colocada sobre el trípode esté correctamente posicionada en un ángulo de 45 grados mirando hacia abajo, en dirección a la caja de juego, y de que las cuatro esquinas de la caja sean visibles en la toma para obtener una vista completa del aparato. Comience a grabar en modo de visión nocturna y evalúe a la pareja durante 10 minutos. Aunque los ensayos de cinco minutos pueden detectar cambios en el comportamiento inducidos por el aislamiento, son demasiado breves para detectar diferencias sutiles debido a un efecto de techo.

A los 15 minutos, los animales parecen fatigados por el juego vigoroso y, por consiguiente, ensayos de 10 minutos parecen ser un buen equilibrio entre la economía del protocolo y la capacidad de detectar efectos experimentales. Una vez transcurridos los 10 minutos, retire a los animales y luego limpie las cajas de juego antes de probar el siguiente par. Este video muestra una rata atacada empleando una defensa evasiva.

Aquí, el defensor puede caminar, correr, saltar o esquivar para alejarse, y al hacerlo, no solo mueve su nappe lejos de su atacante, sino que además termina orientado en dirección opuesta a su atacante. Cuando la rata situada más a la izquierda se acerca al nappe del otro, el receptor salta hacia adelante y alejándose del atacante. Una acción defensiva en la que la rata gira para enfrentar a su atacante puede ocurrir en dos tipos de AE de rotación.

En la primera, rota alrededor del eje longitudinal del cuerpo. Aquí está el hocico, aquí está el cuerpo, y el cuerpo gira alrededor de este eje. En este plano, en la otra forma, la rata gira para encarar, pero alrededor de un eje vertical, manteniendo el cuerpo horizontal mientras gira para enfrentar al otro animal.

Ahora también en esta rotación alrededor del eje longitudinal, existen dos formas distintas de esta acción particular. La rotación completa alrededor del eje longitudinal implica que la rata gire desde una posición erguida hasta quedar completamente en posición supina. Mientras la rata de la izquierda ataca la nuca, el receptor mueve la nuca hacia un lado al girar alrededor del eje longitudinal de su cuerpo y termina en una posición completamente supina.

Téngase en cuenta que el giro hacia la espalda es un movimiento continuo que dura de tres a cuatro cuadros. La rotación parcial alrededor del eje longitudinal implica que la rata gira sus cuatro cuartos, pero mantiene una o ambas patas traseras en contacto con el suelo. Mientras el agresor en la parte delantera alcanza la capa, el receptor gira sus cuatro cuartos hacia un lado, pero mantiene sus patas traseras en el suelo.

Esta orientación se mantiene mientras el atacante continúa alcanzando la nuca. La rotación horizontal alrededor del eje vertical requiere que el defensor mueva su grupa lejos del atacante mientras acerca su cabeza hacia él. Aquí, cuando el atacante desde atrás alcanza la nuca, el receptor gira alrededor de un eje vertical para enfrentar al atacante, manteniendo su espalda orientada hacia el cielo.

Inmediatamente después de una defensa por rotación vertical o una defensa por rotación longitudinal parcial, el animal defensor puede alzarse hacia su oponente y el animal atacante puede simplemente alzarse para encararlo, de modo que terminen convergiendo en esta posición erguida, lo que indica que, independientemente del lugar donde comenzaron los movimientos iniciales que dieron inicio a la defensa, pueden converger en el mismo resultado. El posible factor de confusión de centrarse en el resultado en lugar de en los movimientos iniciales se acentúa aún más cuando comparamos casos de rotación completa con rotación parcial alrededor del eje longitudinal. En este video, cuando el atacante intenta alcanzar la nuca, el individuo receptor rueda sobre su espalda y, de esta manera, protege la nuca como se muestra arriba.

Esta vista de esta maniobra resalta la acción defensiva fluida y rápida, que dura de dos a tres cuadros. Una rotación parcial alrededor del eje longitudinal también puede hacer, en ocasiones, que el animal defensor termine tumbado boca arriba, tal como ocurre con una rotación completa. Pero la forma en que llega a esa posición, en comparación con una rotación completa, es muy distinta: en una rotación completa, un animal ataca la nuca del otro, y este último gira suavemente y de manera continua hasta quedar boca arriba; en el caso de una rotación parcial, el animal se mueve para apartar la nuca, siendo atacado en ella, pero sin rotar más allá de ese punto.

Pero entonces el animal atacante puede seguir alcanzando y empujando mientras avanza, haciendo que el animal defensor gire progresivamente más y más hasta quedar boca arriba. En este caso, aunque el animal cae de espaldas tras una rotación parcial, es la acción de presión y el ataque continuo del animal ofensivo lo que lo lleva a esa posición, no porque el animal haya decidido rodar sobre su espalda. Este video muestra un ejemplo del defensor siendo forzado a adoptar la posición supina.

Mientras el atacante intenta agarrar la nuca, el receptor gira. Sus cuatro cuartos se mueven. Su nuca queda alejada del atacante.

Luego, el atacante continúa avanzando hacia adelante, alcanzando la nuca, y el defensor mantiene el contacto con al menos un pie trasero en el suelo durante 21 a 22 cuadros antes de finalizar en una posición completamente supina. Como la mayoría de los estudios se interesan por el efecto de manipulaciones particulares sobre la puntuación de un sujeto, el comportamiento se registra según la táctica defensiva intentada por el sujeto, en lugar del resultado final. Este juicio puede realizarse examinando los movimientos del defensor dentro de los primeros dos o tres cuadros del inicio de una acción defensiva.

Los ataques lúdicos pueden medirse cuando el hocico de una rata entra en contacto o se acerca a uno o dos centímetros de la nuca de su compañero. Mientras la rata de la derecha olfatea a la otra rata, va moviendo gradualmente el contacto del hocico desde la grupa hacia los hombros. Una vez cerca de la nuca, el receptor gira la cabeza para bloquear cualquier contacto adicional.

Téngase en cuenta que el animal de la derecha nunca realiza un movimiento dirigido hacia la pata del otro ratón, por lo que no se considera un ataque. Como se indicó anteriormente, la táctica defensiva del receptor puede clasificarse en los primeros cuadros tras un ataque. Este video muestra una sesión de juego prolongada.

El atacante alcanza la nuca. El receptor rueda sobre su espalda mientras el atacante continúa moviéndose hacia la nuca. El contacto con la nuca se interrumpe repetidamente, pero no hay interrupción en los movimientos de ataque y defensa que conducen a recuperar el contacto con la nuca.

Este video muestra ataques lúdicos separados en los que la rata de la izquierda ataca la nuca, y el receptor gira parcialmente hacia un costado. El atacante sigue la nuca, pero luego se aparta rompiendo el contacto. A continuación, salta hacia adelante, gira para encarar nuevamente y lanza un nuevo ataque.

En todos los casos, una nueva secuencia de puntuación comienza con un nuevo ataque. Las ratas pueden contraatacar una vez que se han defendido con éxito, como se observa aquí cuando la rata más cercana a la cámara se acerca a la otra. El receptor gira y ataca al nappe.

El defensor entonces bloquea el ataque, recupera su posición y realiza su propio ataque. Sin embargo, dado que los contraataques están altamente correlacionados con la frecuencia de ataques iniciados, las fases más complejas de estas interacciones no necesitan puntuarse a menos que exista una buena razón para hacerlo. Al puntuar el juego, se realiza un análisis secuencial.

¿Cuántos ataques realizan los sujetos? ¿Cuántos ataques son rechazados y cuándo se produce la defensa? ¿Cuál es la probabilidad de utilizar las diferentes tácticas de defensa?

La eliminación completa de la corteza puede dar lugar a ratas adultas que funcionan relativamente bien en entornos de laboratorio. Sin embargo, pueden pasarse por alto efectos conductuales más sutiles. El protocolo descrito en este video se utilizó para probar si los reflejos estaban reducidos en ratas sin corteza.

Se comparó el juego de lucha de ratas juveniles y adultas, corticadas al nacer, con controles tratados simuladamente. Puede observarse que el número de inmovilizaciones, rotaciones parciales y rotaciones completas difería entre animales intactos y decorticados. Tres ratas adultas, dos machos y una hembra estéril, se mantuvieron juntas durante un período de dos semanas.

Luego se sometió a los animales a pruebas de deterioro para determinar cuál de los machos en cada tríada era el subordinado. En algunas tríadas, se eliminó la corteza frontal orbitaria de los individuos subordinados, y en otras tríadas, los subordinados recibieron un tratamiento simulado. Esta gráfica muestra el cambio en la asimetría demostrada por las ratas macho subordinadas al jugar con el macho dominante de la colonia en comparación con la hembra de la colonia.

La medida muestra el porcentaje de diferencia al utilizar la rotación completa al interactuar con estos dos tipos de compañeros. Las lesiones de la corteza frontal orbitaria anulan la capacidad del subordinado de comportarse de manera diferencial con sus compañeros de jaula; los machos subordinados tratados con falso procedimiento, por el contrario, continúan mostrando una fuerte asimetría tras la cirugía, una vez dominada. Esta técnica puede completarse en una a dos horas por sesión de filmación.

Si se realiza correctamente, al intentar este procedimiento, es importante recordar ser constante con su metodología de codificación.