10 de enero de 2013
Basada en sondeos endomicroscopía láser confocal permite en tiempo real de la microscopía del tracto urinario humano durante la cistoscopia, proporcionando imágenes dinámicas, intravital de estados patológicos como el cáncer de vejiga con resolución celular. Endomicroscopía puede aumentar la precisión diagnóstica de la endoscopia estándar de luz blanca y proporcionar orientación intraoperatoria en la imagen para mejorar la resección quirúrgica.
El objetivo del siguiente experimento es demostrar la microscopía in vivo mediante microscopía endoscópica láser confocal con sonda en un paciente sometido a resección transuretral de un tumor de vejiga. Esto se logra primero mediante cistoscopia con luz blanca para visualizar todo el urotelio de la vejiga y observar cualquier lesión mucosa anormal o sospechosa. Como segundo paso, se instila un agente de contraste por vía intravesical, proporcionando el contraste de fluorescencia necesario para la visualización con el microscopio endoscópico láser confocal. En el tercer paso, se realiza la microscopía in vivo de cada área de interés y se registran las características microarquitectónicas celulares y vasculares del tejido.
Finalmente, los hallazgos de microscopía in vivo pueden compararse con el análisis histopatológico de las biopsias de las regiones de interés. El procedimiento será demostrado por el Dr. Joseph Leal, el cirujano urólogo, quien desarrolló la aplicación de la microscopía láser confocal por sonda para el tracto urinario en el quirófano. Una vez que el sujeto esté en posición litotómica, comience insertando un cistoscopio rígido a través de la uretra utilizando cistoscopia de luz blanca estándar para inspeccionar las regiones de la vejiga bajo luz blanca.
Marque las regiones de interés para la microscopía endoscópica láser confocal con un lazo de resección. Otras modalidades de imagen óptica macroscópica, como la cistoscopia fluorescente y la imagen con banda estrecha, pueden utilizarse en este paso para identificar áreas adicionales sospechosas; ahora inserte un catéter urinario estéril en la vejiga utilizando una jeringa de 60 mililitros. Con la punta de la jeringa, instile el agente de contraste diluido por gravedad.
A continuación, sujete con pinza el catéter urinario para retener el agente de contraste en el interior. Después de cinco minutos, drene el agente de la vejiga. Luego vierta de 240 a 300 mililitros de solución salina normal en la jeringa de 60 mililitros para lavar cualquier contraste residual de la vejiga antes de la inyección intravenosa de fluoresceína.
Extraiga un mililitro de fluoresceína en una jeringa. Conecte la jeringa al punto de acceso intravenoso e inyecte de 0,5 a un mililitro de fluoresceína por vía intravenosa como bolo, lavando la línea con solución salina normal. Después de inyectar el agente de contraste, retire una sonda estéril de microscopía endoscópica láser confocal del empaque y conéctela a la unidad de escaneo láser.
A continuación, caliente y calibre la sonda de imagen según las instrucciones del fabricante, y luego vuelva a insertar el cistoscopio rígido con una lente de cero grados en la vejiga. Ahora avance la sonda de imagen de microscopía endo confocal a lo largo del canal de trabajo del cistoscopio, con la punta ligeramente más allá del cistoscopio bajo luz blanca. Localice las regiones de interés marcadas previamente mientras la sonda de imagen escanea la región de interés.
Registre las imágenes para su análisis posterior. A continuación, utilice la mano del operador para manipular la imagen de microscopía endoscópica confocal. Sondee con contacto directo y rápido sobre las regiones de interés para realizar el corte óptico de dichas regiones.
Aumente y disminuya suavemente la presión sobre la sonda de imagen, manteniendo siempre el contacto directo, para alcanzar tumores ubicados en el interior de la vejiga. Utilice un codo AL estándar y un puente para facilitar la desviación de la sonda de imagen y lograr el contacto directo con la región de interés. Si se desea, obtenga biopsias por corte frío de cualquier región de interés correspondiente que haya sido escaneada mediante microscopía confocal por láser endoscópica.
Tras finalizar la obtención de imágenes, retire la sonda de microscopía confocal endoscópica del canal de trabajo. Al realizar este procedimiento, es importante recordar lavar el exceso de fluoresceína dentro de la vejiga antes de la obtención de imágenes y mantener un contacto de 90 grados entre la sonda y la superficie mucosa. Esta primera imagen corresponde a una cistoscopia representativa con luz blanca de un tumor papilar teñido por vía intravascular.
Observe la sonda de imagen de 2,6 milímetros visible en la parte inferior de la imagen. Estas dos imágenes son representativas de imágenes de microscopía confocal láser endoscópica obtenidas de dos tumores vesicales diferentes utilizando fluoresceína intravesical e intravenosa, respectivamente. Dado que las sondas de imagen pueden intercambiarse entre los diferentes tipos de cistoscopios, la microscopía confocal láser endoscópica puede combinarse con otras modalidades de imagen emergentes, lo que podría mejorar la precisión diagnóstica de cada tecnología por separado, incluida la cistoscopia fluorescente como se muestra aquí, y la imagen de banda estrecha como se muestra aquí.
Por lo tanto, este método podría proporcionar información sobre el cáncer de vejiga. Podría aplicarse a otros sistemas, como los carcinomas uroteliales del tracto superior, que pueden ser difíciles de diagnosticar en biopsia.
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Este estudio demuestra el uso de la endomicroscopía láser confocal con sonda para la obtención de imágenes en tiempo real del tracto urinario humano durante la cistoscopia. La técnica permite la visualización dinámica de tumores vesicales con resolución celular, lo que podría mejorar la precisión diagnóstica y la orientación quirúrgica.
La microscopía láser confocal por sonda permite la obtención de imágenes en tiempo real y de alta resolución de los tejidos del tracto urinario durante la cistoscopia, facilitando la detección temprana del cáncer de vejiga y guiando la resección quirúrgica. Esta tecnología aumenta la confianza diagnóstica al proporcionar una visualización a nivel celular que complementa el análisis histopatológico, reduciendo la incertidumbre en la caracterización de lesiones. Su integración con los flujos de trabajo endoscópicos estándar ofrece una vía traslacional para mejorar la estratificación de riesgos en el manejo del carcinoma urotelial.
El método se integra en el continuo de descubrimiento, desde la prueba inicial de hipótesis sobre dianas hasta la identificación de compuestos activos y la validación preclínica, mediante lecturas fenotípicas basadas en imágenes.