9 באוגוסט 2012
שלבי ניתוח של הגדלת שלפוחית השתן מתוארים באמצעות 3-D פיגומים במודלים Murine וחולדה. כדי לבדוק את היעילות של תצורות ביולוגי לשימוש הגדלת שלפוחית השתן, טכניקות cystometry הן ער הרדים מוצגים.
מטרת הליך זה היא להעריך את השימוש בחומרי בנייה ביולוגיים (biomaterials) להרחבת שלפוחית השתן, באמצעות השגת נתונים פונקציונליים בציטומטריה. הדבר משיג תחילה על ידי קיבוע הפיגום (scaffold) לפגם שנוצר בשלפוחית השתן. השלב השני של ההליך הוא העברת צינור הציסטוסטומיה אל הבטן.
השלב השלישי הוא הנחת צינור הציסטוסטומיה אל תוך השלפוחית המורחבת וקיבועו על גב בעל החיים. השלב הסופי הוא ביצוע ציטומטריה להערכת השלפוחית המורחבת מנקודת מבט תפקודית. בסופו של דבר, התוצאות יכולות להראות שינויים בקיבולת השלפוחית ובגמישותה (compliance), בלחצי הריקון, בזמני מחזור התזונה ובנפחי השארית לאחר ריקון, וזאת באמצעות ציטומטריה במצב ערות.
ההשלכות של טכניקה זו הן רחבות ומתמשכות לטיפול באנומליות מולדות ונרכשות של שלפוחית השתן או השופכה, המובילות לירידה בקיבולת שלפוחית השתן, בגמישותה ובתפקודה הכללי. זאת מכיוון שביומטריאליים חדשניים המשמשים להרחבת שלפוחית השתן דורשים הערכה תפקודית. לאחר הכנת בעל החיים לניתוח בבטן, השתמש בסכין מנתחים כדי לבצע חתך בקו האמצע התחתון דרך העור.
באמצעות פינצטה עם שיניים, הרימו את שריר הרקטוס (rectus muscle) ושחררו את פניו האחוריים של השריר באמצעות מספריים עדינים מסוג mets ו-balm; גזרו את שאר השריר בקו האמצע לאורך כל החתך העורי. הוציאו את שלפוחית השתן דרך פצע החתך. לאחר מכן, הניחו תפר דרך הדופן האחורית של שלפוחית השתן ולאחר מכן דרך הדופן הקדמית שלה. הניחו תפריים נוספים באופן לטראלי על שלפוחית השתן; אין לקשור תפרים אלו.
כאשר התפרים מתוחים, לשלפוחית תהיה תצורה ריבועית בגודל של כסנטימטר רבוע, לאורך השלפוחית דרך הדופן הקדמית של השלפוחית, ממש מתחת לקודקוד השלפוחית לאורך קו האמצע. יש להיזהר שלא להפעיל מתיחות רבה מדי על תפרים אלה, שכן הם עלולים להימשך בקלות דרך רקמת השלפוחית. לשלב זה, מומלץ להשתמש בהגדלה באמצעות לולאה לצורך אנסטומוזיס של הפיגום. בעזרת מספריים עדינים, יש לקצץ את פיגום המשי לאזור המקורב של הפגם בשלפוחית.
התחילו בפינה אחת של הפיגום ותפרו אותו לשלפוחית השתן בתפר רציף. כדי ליצור אטום למים לאורך כל היקף הפגם, חשוב מאוד שהמנתח יבצע אנסטומוזה אטומה למים וללא מתח בין הפיגום לשלפוחית השתן. פעולה זו תבטיח את הכלית השתן בתוך שלפוחית השתן, שכן כל דליפה תוך-peritoneal תוביל ככל הנראה למות בעל החיים.
כמבחן, השתמש במחט היפודרמית בקוטר 30 gauge כדי למלא את שלפוחית השתן במים. אם נמצא דליפה, סגור אותה באמצעות תפר קטיע נוסף. לאחר מכן, החזר את השלפוחית המשוחזרת אל תוך הבטן לפני סגירת דופן הבטן.
הזריק ביופיבקאין לשריר הרקטוס (rectus muscle) ולרקמה התת-עורית לצורך הרדמה מקומית וסגור את החתך. לאחר מכן, השתמש בתפר רציף כדי לקרב מחדש את שריר הרקטוס וסגור את העור בתפר רציף. לאחר ניקוי וייבוש של החתך, העבר את בעל החיים לכלוב חם ונקי להתאוששות מההרדמה.
לפני התחלת הפעולה, צרו עיגון בקצה צינור PE 50 באורך 10 סנטימטר כדי שלא יחליק אל מחוץ לשלפוחית. עשו זאת על ידי הרחבת קצה הצינור בחשיפה עדינה ללהבה. שנית, ודאו שהצינור אינו חסום.
הזריקו תמיסת מלח לקצה הלא מורחב וודאו שהיא זורמת. לאחר הכשרת בעל החיים לניתוח, ולפני חשיפת שלפוחית השתן, בצעו חתך של סנטימטר אחד בגב בין השכמות. באמצעות מספרי Metson balm, צרו מישור בין העור לשריר שמתחתיו.
לאחר מכן, הנח את קצות המספריים במישור ופתח אותם כדי ליצור מנהרה תת-עורית אל הבטן הוונטרלית. לאחר מכן, הפוך את בעל החיים. חשוף את שלפוחית השתן והחזר אותה אל הבטן.
בחזרה לחתך הגבי, מקם תפס קטן בתוך המנהרה תת-עורית. השתמש באצבעותיך כדי להגן על התוכן התוך-בטני, ולאחר מכן השתמש בקצות התפס כדי לחדור דרך דופן הבטן. כעת, תפוס את הקצה החלק של הפיתול המורחב בעזרת התפס ומשוך אותו חזרה דרך החתך הגבי.
אין למשוך את קצה העוגן המורחב מעבר לדופן הבטן כאשר הצינור עובר דרך החתך. בצעו תפר מסביב (purse string stitch) בצמרת השלפוחית. השאירו תפיסה (clamp) קטנה על הקצה החופשי של התפר, כדי שלא יימשך בטעות דרך התפר.
כמו כן, אין למתוח את התפר. כעת השתמשו במחט EU gauge 18 כדי לנקב את דופן השלפוחית במרכז תפר ה-purse string, במידה שתספיק להגיע לחלל השלפוחית (intraluminal). לאחר מכן, הכניסו את הפינצטה העדינה לפתח והרחיבו אותה בעדינות כדי להגדיל את החור.
הכנס את הקצה המורחב של הקטטר אל תוך הפגם בשלפוחית השתן עד שיהיה בתוך הלומן (חלל הצינור). הדק את תפר שקית התבלין (purse string suture) סביב הקטטר וקשור אותו. לאחר מכן, לפף את קצה התפר החופשי פעם אחת סביב הקטטר וקשור אותו.
כעת, בדקו את שלפוחית השתן על ידי הזרקה איטית של תמיסת סליין לתוכה דרך הצינור. אם יש זרימה מהשופכה, שאבו את הסליין כדי להמשיך את דחיסת השלפוחית. שחזרו את הפעולה. אם נמצאה דליפה, יש לתקן אותה באמצעות תפר, שכן דליפת שתן עלולה להוביל לתמותה.
סגור את החתך הבטני כפי שהודגם קודם לכן. לאחר מכן, המשך בסגירת החתך הגבי. ההליך לסגירת החתך הגבי שונה עבור חולדות ועכברים.
עבור חולדות, השתמשו במספריים כדי לחתוך את צינור הקטטר בגובה העור. לאחר מכן, הכניסו מחט בעלת קצה קהה במידה 22 לתוך הצינור. השתמשו בתפרים רציפים כדי לסגור את העור מעל הצינור, כאשר בסיס המחט נשאר בולט החוצה.
כעת מקמו מכסה לקטטר ורידי (intravenous line cap) על המחט קהה הקצה והדביקו את קצה הקטטר לעור. לאחר מכן, נקו את אזור החתך והניחו לבעל החיים להתאושש בסביבה חמימה. בעכברים, יש לקבע את הקטטר באופן הבא: השאירו את הקטטר ארוך ואטמו את קצהו על ידי המסה בעזרת להבה.
גלגלו את קצה הפחית והשאירו אותו בכיס תת-עורי בגב בעל החיים. סגרו את העור מעל הפחית בתפר רציף. לפני ביצוע אנליזה ציטרית, המתינו לפחות חמישה עד שבעה ימי התאוששות לאחר הניתוח עבור חולדות או עכברים.
לאחר ההתאוששות ביום הצטומטריה. עבור עכברים, יש לפתוח תחילה את החתך הגבי רק תחת הרדמה ולהוציא את הצינור השזור מהכיס התת-עורי. לאחר הוצאת הצינור, סגרו חתך זה והמתינו עד שהעכבר יתעורר לחלוטין מההרדמה לפני ביצוע הצטומטריה; התחילו בהנחת בעלי החיים בכלובים מטבוליים התלויים מעל מאזניים.
כעת גשו לקטטרים שמעל הע在他的 (supra pubic) באמצעות מחט במידה 27 המחוברת באמצעות T-tube למתמר הלחץ ולמשאבת ההזרקה. התחילו בהזרקת תמיסת מלח פיזיולוגית. המתינו עד ליתייצבות רישום דפוס הריקון.
במהלך 10 עד 20 הדקות הבאות, לחץ השלפוחית יעלה תחילה, ולאחריו תתרחש השתנה. לאחר מכן, רשמו את מחזורי ההשתנה במשך 15 עד 120 דקות, או לפחות שלושה או ארבעה מחזורי השתנה במהלך הפרוצדורה. עקבו אחר כיפוף של הקטטר וסיבוכים אחרים.
ניתן לנתח את רישומי הבדיקה העורודינמית כדי להפיק פרמטרים כגון נפחי התרוקנות, ציות (compliance), לחצי התרוקנות שיאיים בזמן התכווצות, מרווח, זמן מחזור הטיבול ונפחי שארית לאחר התרוקנות. לאחר צפייה בסרטון זה, תהיה לכם הבנה טובה לגבי האופן שבו ניתן לבצע הרחבה של שלפוחית השתן באמצעות כל חומר ביומטרי. כמו כן, תדעו כיצד להעריך את התפקוד של שלפוחית שתן בכל מכרסם באמצעות ציטומטריה במצב ער ולא מורסן.
מאמר זה מתאר את השלבים הכירורגיים של הגדלת שלפוחית השתן באמצעות פיגומים בתלת-ממד (3-D scaffolds) במודלים של עכברים וחולדות. יעילותן של תצורות הביומטריאלים להגדלת שלפוחית השתן נבחנת באמצעות טכניקות של ציסטומטריה במצב ערה ובמצב הרדמה.
הערכה תפקודית של חומרים ביומטריים להרחבת שלפוחית השתן דורשת מודלים בעלי חיים סטנדרטיים ואנליזה ציסטומטרית להערכת הקיבולת, הגמישות (compliance) ודינמיקת הריקון. גישה זו מאפשרת הפחתת סיכונים פרה-קלינית של תכנוני פיגומים (scaffolds) על ידי קישור תכונות מבניות לתוצאות תפקודיות לפני ביצוע מחקרים בבעלי חיים גדולים או מחקרים קליניים. המתודולוגיה תומכת בתיקוף יעדים ברפואה רגנרטיבית אורולוגית על ידי אספקת מדדים כמותיים וניתנים לתרגום לצורך קבלת החלטות של go/no-go בתהליכי פיתוח של חומרים ביומטריים.
השיטה משתלבת ברצף הגילוי, החל מסריקה ראשונית של חומרים ביולוגיים, דרך זיהוי מועמדים מובילים ועד לתיקוף פרה-קליני, ומספקת נתונים תפקודיים המנחים את ההחלטות לגבי התקדמות התהליך.