2012年8月22日
土壌送信蠕虫(STHs)による慢性感染症が発育し、成長期の子供に無駄に吸収不良を引き起こします。それゆえ、これらの感染症はまた、子どもたちの体力を減らすことが妥当である。ここでは、STHsと子供の体力を評価するため、20メートルシャトルランテストの診断のための二つの技術を可視化する。
以下の手法の目的は、このように伝播する蠕虫感染の状態を評価し、また、そのような蠕虫感染が学童の身体的適応能に影響を及ぼすかどうかを判定する試みを促進し、標準化することにあります。これは、一般的な土壌伝播性蠕虫、すなわち Ascaris lumbricoides、鉤虫(糞線虫 *Strongyloides stercoralis* および *Ancylostoma duodenale*、*Necator americanus*)の感染を診断するために、Kato-Katz法を用いることで達成されます。第二のステップとして、*Schistosoma* の診断に最も広く用いられている方法である Erman法が実施されます。
次に、子供たちの体力レベルを評価するために、20メートルシャトルランテストを実施します。上述の手法に基づき、Helmut感染児と非感染児の間の体力レベルの差異を示す結果が得られます。これらの手法を組み合わせることで、土壌伝播性のhelmet感染が感染者の体力に影響を与えるか、また、そのような感染による真の負担はどの程度かという重要な疑問に対する回答を得るのに役立ちます。
Cato-Catz法は、感染した被検者が排泄する糞便中の寄生虫卵の検出を容易にするために用いられます。まず、標準的なCato-CATTテンプレートを顕微鏡スライドの中央に配置します。テンプレートの中央には、手袋を着用した状態で41.7 milligramsの糞便を保持するための穴があります。
新鮮な糞便サンプルを2〜3 g、新聞紙またはアルミホイルの上にすくい取ります。次に、サンプルのふるい分けを行うため、糞便の上にワイヤーメッシュまたはプラスチックメッシュを押し当てます。小さなプラスチック製スパチュラを用いて、メッシュ上のふるい分けされた物質をかき出し、Cato Katテンプレートのパンチ穴を完全に満たします。
スパチュラで穴の中の内容物を平らにし、余分な糞便物質を取り除きます。次に、顕微鏡スライドに付着した糞便物質を乱さないように、テンプレートを垂直に引き上げます。テンプレートとスパチュラは、洗剤と水で洗浄した後、再利用が可能です。
次に、グリセリン・マラカイトグリーン溶液に24時間以上浸したセロハンを、顕微鏡スライド上の糞便検体の上に被せます。糞便を厚い塗抹状に広げるため、糞便検体が入ったスライドにきれいな顕微鏡スライドをそっと押し付け、スライドの幅よりもわずかに小さい直径の円内に検体を均等に分散させます。その後、スライドを直射日光の当たらない場所に置き、30〜60分間放置して透明化させます。
30〜60分後、スライドを取り出し、光学顕微鏡を用いて40〜100倍の倍率で厚層塗抹標本を系統的に検査します。卵の数を数え、種ごとに層別化します。次に、卵数に24を乗じて、感染の標準化された推定値を算出します。これは慣例的に、糞便1gあたりの卵数(EPG)として的に表されます。
erman法を実施するために、まずガラス漏斗を固定できるスタンドを準備します。ガラス漏斗を取り、その茎の部分にゴムチューブを取り付けます。クランプまたはスプリングクリップでチューブを閉じ、その後、漏斗をスタンドで支持します。
次に、円錐形のふるいまたは金網を漏斗に入れます。この網の上に医療用ガーゼを重ねます。その後、漏斗に水道水を満たし、手袋を着用した状態で装置から漏れがないことを確認します。
20 ~ 30 gの新鮮な糞便を医療用ガーゼの中央にすくい取り、完全に水に浸かっていることを確認し、必要に応じて水を足します。次に、医療用ガーゼをサンプルを覆うように折り畳ぎます。その後、漏斗に向けて下から2時間、人工光を照射します。
これは、Baermann法が、幼虫の正の走光性を利用して、照明を当てた糞便検体から幼虫を移動させるという原理に基づいているためです。2時間後、ゴムチューブのクリップをそっと外し、漏斗の最下層にある水を50 milliliters分、遠心分離管に排出します。次に、回収した水を600 ×gで5分間遠心分離します。
次に、沈殿物を乱さないように注意して上清を注ぎ出します。チューブ内に数滴残った液で再懸濁させ、その溶液を2滴マイクロスコープスライドにピペットで滴下します。光学顕微鏡を用いて、まず40倍の倍率で寄生虫の有無を確認し、続いて100倍から400倍の倍率で種を確認します。
OID stiresの第1段階幼虫は生存しており、シャトルランテストの準備のために顕微鏡下で活発に動き回ります。まず、20mの平坦な直線走行コースを測定し、コーンで距離を標記します。被験者の手首に心拍計を、胸囲にそれに対応する送信機を装着します。
この装置はテスト前後の心拍数を測定し、参加者が最大限の努力を払ったかどうかをモニターします。モニターを装着させた後、20mのラップに対応した事前録音済みのサウンドシグナルのペースに合わせて、コースを往復して走るよう子供に指示してください。走行速度は8.5 kilometers per hourから開始します。20m間隔を示すシグナルの頻度は、1分ごとに0.5 kilometers per hour相当ずつ自動的に増加し、参加者が新しい20m区間の走行を開始することを促します。
信号が鳴るたびに、次の信号が鳴るまでに走行を完了させます。2回連続して20 meterの間隔でペースに従えなかった場合は、その子を停止させてください。次に、最後の区間の走行速度を記録します。
参加者は、年齢、性別、および到達心拍数とともに、試験を完全に完了させます。テスト終了時に、この心拍数が児童の最大心拍数であることを確認してください。最大心拍数に達していない場合、児童が最大限の努力を尽くしていない可能性があるため、テストを繰り返す必要があります。
次に、以下の式を用いて、被験者の最大有酸素能力(VO₂ max)を推定します。VO₂ max = 31.025 + 3.238 × 速度(km/h) - 3.248 × 年齢(歳) + 0.1536 × 速度(km/h) × 年齢(歳)。以下の2つの画像は、*Ascaris lumbricoides*の卵を示しています。これらの卵は、長さが約45〜74 µm、幅が35〜50 µmで、厚い殻壁を持っており、ここでは受精した*A. lumbricoides*の卵として示されています。
アルブミン層の外観に注目してください。これにより、卵はゴールデンブラウンの外観を呈します。対照的に、ここでは未受精のアルブミノイド卵を示します。外被が存在しないこと、および卵が受精卵よりもわずかに細長く、大きいことに注目してください。
全体として、この画像は *Tricocephalus ranviridis* の卵を示しています。長さは約 50 µm、幅は約 22 µm で、楕円形であり、はっきりとした極栓(polar plugs)が見られます。対照的に、ここに示されている鉤虫の卵は、非常に薄い卵殻を持ち、卵の中心にある細胞の密集した塊の周囲に透明な環状の領域があります。
この画像には、S stir Corrales L 1期幼虫が示されています。全長は約180から380 micronsで、口腔腔が非常に短いのが特徴です。明瞭な生殖原基が観察でき、青色の矢印で強調されています。
赤色の矢印は、先端が鋭利な幼虫の尾部を示しています。身体的適応能を測定するために、20メートルシャトルランテストを実施しました。シャトルランテストの結果の解釈は、さまざまな方法で行うことができます。
年齢、性別、その他の関連し得る健康状態、社会経済的地位、および文化的習慣が同様である感染個体と非感染個体の間で、子供の身体的適応能を比較することができます。さらに、STH感染の強度と身体的適応能との間の用量反応関係を特定しようと試みることや、多種寄生レベルの違いと身体的適応能を比較することも可能です。例として、こちらのグラフは、T Tri Coriaに感染した子供が、T Tri Coiaに感染していない子供に比べて、身体的適応能が有意に低下していたことを示しています。
このビデオを視聴することで、カットカット法、ベアマウント法、および20mシャトルランテストの実施方法について十分に理解することができます。これらの手法は、ソイ・トランスミッター・ヘルメット感染が学童期の子供の体力に影響を与えるかどうかを評価するのに役立ちます。
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本研究では、土壌伝播性住血吸虫(STH)感染が学童の身体適応能に及ぼす影響を調査します。診断技術を用いて感染状況を評価し、20メートルシャトルランテストを通じて子供たちのフィットネスレベルを測定します。
土壌伝播寄生虫(STH)の感染状態およびそれが身体能力に及ぼす影響を評価することは、資源が限られた環境における公衆衛生上の負担を評価するための、疾患に関連したシステムを提供します。標準化された診断法および体力測定法を用いることで、寄生虫感染による有酸素能力の低下や生産性の低下を結びつける仮説について、メカニズムに基づくリスク排除が可能となります。これにより、感染強度と機能的アウトカムに関する定量的で再現性のあるデータを生成し、顧みられない病気の研究におけるターゲットの検証および表現型スクリーニングを支援します。
この手法は、土壌伝染性寄生虫(STH)感染の診断的確認と身体能力の機能的評価を統合したものであり、顧みられない感染症の初期探索から前臨床までのワークフローに位置付けられます。