단일 세포 박테리아 상호 작용의 시각화

JoVE Encyclopedia of Experiments

Microbiology

0 조회수 • 2:28 분 • October 30th, 2025

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형광 표지된 운동성 박테리아와 표지되지 않은 비운동성 박테리아의 공동 배양으로 파종된 유리 커버슬립 접시로 시작합니다.

영양이 함유된 아가로스 패드가 들어 있는 접시를 가져다가 주변 실리콘 몰드를 조심스럽게 제거합니다.

접시를 기울이고 구부러진 주걱을 사용하여 패드 가장자리 아래로 밀어 넣습니다. 그런 다음 페트리 접시 뚜껑 위에 놓습니다.

패드를 바닥이 아래로 향하게 하여 박테리아 세포가 들어 있는 접시로 옮겨 박테리아 층과 고르게 접촉하도록 합니다.

패드를 부드럽게 눌러 기포를 제거합니다.

습도를 유지하기 위해 미리 적신 물티슈를 접시 가장자리 주위에 놓습니다.

도립 현미경으로 일정 기간 동안 박테리아의 행동을 추적합니다.

박테리아가 성장함에 따라 운동하지 않는 박테리아는 화학적 유인제를 방출합니다. 운동성 박테리아는 이러한 신호를 감지하고 비운동성 박테리아 콜로니를 향해 이동합니다.

시간이 지남에 따라 운동성 박테리아가 축적되어 비운동성 박테리아 콜로니에 침입하여 박테리아 상호 작용을 확인합니다.

패드가 건조되면 예열된 멸균 35mm 유리 커버슬립 접시의 바닥에 1마이크로리터의 공동 배양물을 고르게 피펫팅합니다.

멸균 핀셋을 사용하여 아가로스 몰드에서 실리콘 컷아웃을 제거하고 옆으로 기울인 다음 약간 구부러진 주걱을 아가로스 패드 가장자리 아래로 밀어 넣어 멸균 페트리 플레이트 뚜껑 위에 떨어뜨립니다.

패드 아래에 90도 각도의 주걱을 밀어 접종한 커버 슬립 위에 놓아 패드를 박테리아 세포가 있는 접시에 바닥이 아래로 향하도록 옮깁니다. 주걱을 사용하여 패드를 덮개 슬립과 같은 높이로 만들고 기포를 부드럽게 누릅니다.

젖은 물티슈에서 과도한 수분을 제거하고 접시 가장자리 주위에 놓고 패드에 닿지 않도록 합니다. 이제 샘플을 이미징할 준비가 되었습니다.

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마지막 업데이트: 22 8월 2026