리어링을위한 최적화된 프로토콜 Fopius arisanus Tephritid 과일 Parasitoid 난다

FOIA Aus는 열대 지방 전역, 특히 이곳 하와이에서 심각한 경제적 해충인 과실파리를 공격하기 때문에 하와이에서 중요한 생물학적 방제 인자입니다. FOIA Aus의 장점은 해충의 알 단계에서 공격하여 초기 단계에서 곤충을 제어한다는 점입니다. 다음 영상들에서 실험실 환경에서 FOIA Aus를 어떻게 사육하는지 근접 촬영 영상을 확인하실 수 있습니다.

그리고 이 프로그램의 마지막 부분에서는, 이 특정 기생벌이 프랑스령 폴리네시아의 성공적인 방사 프로그램에 어떻게 활용되었는지에 대한 논의가 이어질 것입니다. 이제 호스트 초파리의 알에 기생할 준비가 된 성충 기생벌을 사용하여 프로토콜을 시작하겠습니다. 첫 번째 단계는 기생벌에게 제공할 초파리 알을 준비하는 것입니다.

다음으로, 초파리 유충이 부화하여 성장하고 번데기가 될 때까지 기다립니다. 초파리가 번데기 단계에 도달하면, 기생충을 농축하기 위해 크기별로 분류합니다. 마지막으로, 기생충이 우화하면 성숙할 때까지 사육합니다.

그 후 이들은 서로 만나 다시 새로운 과일 묶어에 알을 낳을 준비를 합니다. 초파리 알. 이것으로 주기(cycle)가 완료됩니다.

한 변의 길이가 약 10cm인 한천 블록을 만들어 초파리 알을 위한 기질을 준비합니다. 한천은 증류수 1L당 한천 가루 9g의 농도로 준비합니다.

평평한 표면에서 디쉬의 가장자리까지 액체 어거(auger)를 채우고, 최소 45분 동안 굳힙니다. 어거 블록이 완전히 굳으면, 각 어거 블록의 상단을 덮도록 티슈 페이퍼를 한 겹으로 붙입니다. 표면의 수분으로 인해 티슈가 어거에 쉽게 부착될 것입니다.

두 번째 롤링을 수행합니다. 초파리 알을 오거 블록의 조직으로 덮인 표면에 도포합니다. 현탁액 상태의 초파리 알 0.5 milliliter는 블록당 약 6,000개의 알을 생성합니다.

물에 적신 2.5 centimeter 너비의 붓을 사용하여 초파리 알을 조직 표면에 고르게 폅니다. 그 후 초파리 알을 기생벌 케이지의 바닥망 아래에 배치하여 기생벌이 산란할 수 있도록 하며, 망의 아랫부분을 가볍게 두드려 초파리 알을 방해할 수 있는 죽은 기생벌을 제거합니다. 초파리 알은 기생벌이 하룻밤 동안 산란할 수 있게 합니다.

초파리 알의 높은 비율이 기생되도록 하려면 약 21시간이면 충분합니다. 노출 시간이 더 길어지면 과잉 기생(Super parasitizing)의 위험이 있습니다. 기생충 노출 후 알을 배양하는 데 필요한 주요 구성 요소는 초파리 유충 배지, 유충 배지 용기 및 번데기 용기입니다.

준비된 기생 알이 포함된 3~3.5개의 오거 블록을 1.25L의 초파리 유충 먹이에 놓습니다. 알이 들어 있는 먹이 용기를 받침대 위에 놓고, 그 위에 1.5cm 깊이의 미세 입자 버미큘라이트 또는 세척 모래 층이 깔린 번데기 형성 용기를 덮습니다.

마스킹 테이프로 번데기 용기의 가장자리를 밀봉합니다. 유충이 기어 나와 아래의 질석으로 떨어질 수 있도록 먹이 용기의 상단과 번데기 용기 뚜껑 사이에 충분한 공간이 있는지 확인합니다. 번데기 용기를 27 °C, 상대 습도 80%의 실험실로 옮겨 일주일 동안 유지합니다.

일주일 후 처음 4일 동안 용기를 두꺼운 천으로 덮어줍니다. 번데기 형성 용기를 열고 유충 먹이를 제거합니다. foia Airis를 사육하기 위해 Bre Dorsals를 호스트 초파리로 사용합니다.

Asfa 및 sitis 속의 다른 종들도 잠재적인 숙주가 될 수 있습니다. 버미큘라이트에 넣지 않은 유충이 있는 경우, 하룻밤 동안 번데기가 되도록 둡니다. 버미큘라이트에서 번데기를 분리하려면 거친 체와 큰 용기를 사용하십시오.

다음으로, 손 체를 사용하여 opia를 포함하는 버미큘라이트 덩어리를 제거합니다. 기생하지 않은 초파리로부터 기생벌을 부분적으로 분리할 수 있습니다. 이전 연구를 바탕으로 직경 1.65에서 2.26 밀리미터 사이의 기생벌만 수집하며, 이보다 작은 기생벌은 대부분 크기가 미달하는 개체들입니다.

더 큰 aria에는 주로 파리가 포함되어 있습니다. 번데기를 크기별로 분류하기 위해 다양한 방법을 사용할 수 있습니다. 여기서는 수집된 기생 aria를 위해 맞춤형 크기 분류기를 사용하는 기계적 방법을 설명하겠습니다.

크기가 커질수록 암컷의 비율이 증가합니다. 기계식 크기 분류기의 상단 깔때기에 피쉬(puy)를 넣습니다. 진동 피더가 이들을 30도 각도로 약간 벌어진 한 쌍의 롤링 바 상단으로 이동시킵니다. 개체들은 개별적으로 슬롯 배열로 떨어지며, 이 슬롯들은 깔때기를 통해 10개의 별도 용기로 배출됩니다.

1.65 millimeters에서 2.26 millimeters 크기 범위의 번데기를 우화 케이지에 넣고, 기생된 번데기에서 대부분의 파리가 우화할 때까지 7일 더 유지합니다. 다음으로, 팬을 사용하여 빈 파리 외피와 여전히 살아있는 기생벌이 들어 있는 외피를 분리합니다. Opia Aus 군집을 유지하려면 각 변의 길이가 약 25 centimeters이며 전면 유리를 제거할 수 있는 기생벌 유지 케이지를 사용하십시오.

케이지의 상단과 두 측면에는 1mm² 크기의 망이 설치되어 있습니다. 케이지 뒷면은 고무 시트로 덮여 있으며, 접근을 위해 9cm 크기의 구멍이 뚫려 있습니다. 케이지 바닥에는 컷아웃이 있으며, 내부에는 1~2mm² 크기의 망으로 덮여 있습니다.

과일 초파리 알을 기생충의 상위에 배치할 수 있도록 두 개의 오거 블록을 넣기에 충분한 크기여야 합니다. 사육 케이지의 전면 유리 하단 4분의 1 지점에는 기생충이 케이지 앞면에 밀집되는 것을 최소화하기 위해 색이 들어간 부분이 있어야 합니다. 선택한 배지를 약 11g씩 지름 약 9cm의 플라스틱 용기에 담습니다.

이렇게 하면 케이지당 약 600에서 700마리의 기생충이 생성될 것입니다. 크기 선택을 통해 약 60%의 암컷을 확보해야 합니다. 용기에 스크린 뚜껑을 부착하십시오. 뚜껑은 2 제곱 밀리미터의 망으로 덮여 있어야 하며, 이는 우화 후 초파리가 용기를 떠날 수 있게 하면서도 남은 초파리들은 내부에 가둘 수 있게 합니다.

기생충을 24°C, 상대 습도 약 45%, 12:12 광주기와 적절한 환기 조건에서 유지하며, 일주일에 최소 3회 이상 케이지 상단에 원심분리된 꿀을 줄무늬 모양으로 도포합니다. 또는 가용한 꿀이 말랐을 때마다 손가락 끝을 사용하여 좁은 줄무늬 형태로 원심분리된 꿀을 도포하십시오. 줄무늬가 너무 두꺼우면 꿀이 케이지 내부로 떨어질 수 있으며, 너무 얇으면 꿀이 빠르게 말라 자주 도포해야 함에 유의하십시오. 기생충에게 수분을 공급하기 위해 가로세로 10cm, 깊이 4cm의 오거 블록을 케이지 상단에 배치합니다.

이 블록들은 일주일에 두 번 교체해야 합니다. 2001년에 우리는 오리엔탈 초파리가 당시 모든 열대 과일에 믿기 힘들 정도의 피해를 주고 있었기에, 이 상황을 완화하기 위해 프렌치 폴리네시아에 생물학적 방제법을 도입할 수 있을지 확인하기 위한 소규모 시드 그랜트를 지원받았습니다. 이곳 하와이의 연구소에서 우리는 10회분의 발송을 진행했습니다.

따라서 이러한 각 운송분은 보통 약 10만 마리의 Fopcua axios에 달했으며, 실제로는 그보다 훨씬 더 많았지만, 기생벌이 들어있는 오리엔탈 초파리 퍽(PPE)을 운송한 다음 이를 부화시켰습니다. 이에 따라 저희는 타히티에 작은 실험실을 마련하여 이들을 수령하고 Fopcua axios를 부화시켰습니다. 그 결과, 약 1년의 기간 동안 거의 100만 마리의 Fopcua axios를 방사했습니다.

전반적으로, 이는 하와이 외 지역에서 가장 성공적인 사례입니다. FOIA Aus가 하와이에서 처음 방출되었을 때, 이는 태평양 전역에서 초파리의 생물학적 방제에 관한 최고의 사례가 되었습니다. 지난 10년 동안 전 세계적으로 Bactrocera Dorsalis 복합종의 엄청난 확산이 있었습니다.

따라서 Bactrocera Carbo가 남미의 수리남으로 확산되었으며, 현재는 브라질 북부에도 퍼져 있습니다. 또한 Bacter Inance라고 불리는 또 다른 종이 아프리카 전역으로 확산되어 온갖 피해를 주고 있습니다. 그리고 bacter papaya 또한 확산되었습니다.

따라서 이러한 성공으로 이제 남미, 아프리카 및 아시아의 다른 지역에 이러한 FOIA Aus를 보급할 기회가 열렸습니다.