원격 높은 처리량 Phenotyping에 마우스 눈 핵의 제거

이 영상에서는 마우스의 눈과 안구 적출, 즉 안와에서 안구를 제거하는 과정을 보여드립니다. 안구는 아래 눈꺼풀 가장자리에 의해 경계가 지어집니다. 이곳이 내측 또는 비측 안각입니다.

뒤쪽은 외안각입니다. 위쪽은 상안검연입니다. 여기 수술 검체가 있습니다.

바늘이 투명한 각막을 가리키고 있습니다. 홍채 너머로 수정자가 약간 튀어나온 것을 볼 수 있습니다. 갈색으로 보이는 이곳이 홍채이며, 수정자를 덮고 있습니다.

가장 중요한 수술적 지표는 이 흰색 선, 즉 각막연이며, 이 바로 뒤쪽에 천자창을 만들게 됩니다. 안구의 뒷부분은 각막연 뒤에 위치하며, 현재 근육 삽입 부위를 가리키고 있습니다. 여기서 안구에 밀착되어 있는 근육과, 안와를 채우고 있으며 눈물샘을 포함하는 결합 조직을 확인할 수 있습니다.

마지막으로, 이것은 둔성 박리를 통해 얻은 시신경의 흰색 긴 띠 형태입니다. 끝을 날카롭게 가공한 곡선형 드레싱 포셉을 사용하여 눈꺼풀을 벌리기 시작합니다. 이렇게 하면 안구가 외부로 돌출되어 분리되는 경향이 있습니다.

포셉을 조심스럽게 사용하여 안와 내부의 안구 뒤쪽으로 진입한 뒤, 안구를 압박하지 않도록 주의하며 뒤쪽에서 부드럽게 압축하고 앞으로 잡아당깁니다. 이때 안구가 아닌 결합 조직을 잡아야 합니다. 안구를 옆으로 돌리면 흰색의 시신경과 함께 안와 조직을 확인할 수 있습니다.

이는 다시 한번 보여드리기 위한 두 번째 해부 과정입니다. 내안각 부위로 진입하여 핀셋을 안구 뒤쪽으로 밀어 넣은 다음, 결합 조직을 잡아 안구 자체를 누르지 않으면서 앞으로 끌어당깁니다. 다시 보시면 길고 흰 시신경 형태의 결합 조직을 확인하실 수 있습니다. 천자상을 만들기 위해서는 근육 부착부를 통해 안구를 잡고, 안구를 고정하기 위해 잡고 있는 부위 바로 옆의 각막연 뒤쪽으로 바늘을 삽입하십시오.

이렇게 하면 고정액이 안구 내부로 들어갈 수 있습니다. 안구를 잡고 있는 지점에서 멀리 떨어진 곳에 천공을 만들면 안구가 매우 불안정해지며, 안구를 압박하거나 과도한 압력을 가하지 않으면서 상처를 충분한 길이로 만들기 어려워집니다. 또한 안구 바로 뒤의 모든 결합 조직을 잡을 수도 있습니다.

일부 고정제는 천자 상처를 낼 필요가 없습니다. 일반적으로, 안구가 완전히 잠길 수 있도록 최소 3 cc의 고정제가 들어 있는 5 cc 신틸레이션 바이알에 안구를 넣습니다. 관류 고정된 동물의 경우, 정밀한 박리가 필요합니다.

곡선형 calibri 포셉과 곡선형 wescott 가위를 사용합니다. calibri 포셉으로 하안검을 잡습니다. 안와골을 따라 가위를 삽입하여 결합 조직을 절개하기 시작합니다.

안구에서 멀어지는 곡선을 따라 절개하며 크기 조절 시 주의합니다. 한쪽 내안각에서 반대쪽 내안각까지 하안검 가장자리를 따라 안구의 어느 부위든 가능합니다. 어느 정도 진행되면 대부분의 결합 조직이 제거되며, 가위를 안구 뒤쪽으로 밀어 넣어 안구를 당겨 분리할 수 있습니다.

가위의 끝을 안와 내로 삽입하되, 안구가 아닌 안와골 쪽으로 밀어 넣어 결합 조직을 잘라내는 또 다른 예시입니다. 이렇게 하면 바구니 속의 농구공과 같은 상태인 안구가 자유로워지기 시작합니다. 포셉을 사용하여 눈꺼풀을 뒤로 젖히고, 안구 주변을 짧고 부드럽게 절개하십시오.

여기서는 Collibra를 사용하여 결합 조직이나 근육 삽입부를 잡고, 안구를 안와 결합 조직으로부터 완전히 절제합니다. 안구가 적절히 고정된 후, 운반이 필요한 경우에는 보관 바이알 주변을 파라필름으로 감쌉니다.

포장은 소속 대학 및 정부 규정을 준수해야 합니다. 일반적으로 이러한 샘플은 액체 누출을 방지하기 위해 솜을 넣은 용기에 담으며, 이 용기는 매우 단단히 밀봉해야 합니다. 그 후, 이 운송 용기를 에어캡 봉투에 넣습니다.

이를 관련 문서와 함께 액체 실험실 운송 팩에 넣습니다.