2012년 1월 29일
강제 수영 시험은 설치류 동물의 잠재적인 약은 효험을 평가하기위한 실험 방법으로 확인됩니다. 실험 동물은 물과 탈출 관련 이동성 행동의 탱크에 배치됩니다 계량입니다. 이 테스트의 마우스 버전에 대한 일반적인 절차가 설명되어 있습니다.
마우스 강제 수영 검사는 항우울제 효능을 예측하는 데 흔히 사용되는 검사입니다. 본 영상에서는 마우스 버전 강제 수영 검사의 절차를 보여줍니다. 마우스 버전은 랩(wrap) 버전과 다르므로 서로 혼용하여 사용해서는 안 됩니다.
강제 수영 검사에서 마우스는 물이 채워진 수조에 배치됩니다. 마우스는 6분 동안 수조에 머무릅니다. 이 시간 동안 피험체의 행동이 기록됩니다.
6분간의 테스트 기간이 끝나면 피험자를 물 밖으로 꺼냅니다. 테스트가 완료된 후, 시각적 기록물을 컴퓨터나 비디오 모니터로 전송합니다. 분석을 위해 관찰자는 6분간의 세션 중 마지막 4분 동안 마우스가 발버둥 치며 보낸 시간을 측정합니다.
항우울제는 투쟁하며 보내는 시간을 증가시킵니다. 이는 부동 시간이 짧아지는 것으로 나타납니다. 안녕하세요, 저는 메릴랜드 대학교 의과대학 Todd Gould 박사 연구실의 Sean입니다.
안녕하세요, 같은 실험실의 Chantelle입니다. 이 영상에서는 마우스 강제 수영 검사의 수행 방법과 점수 산정법을 보여드리겠습니다. 마우스 강제 수영 검사는 항우울제 치료의 잠재적 효능을 평가하는 데 사용됩니다.
이제 본격적으로 시작해 보겠습니다. 저희는 플렉시글라스와 같이 튼튼한 재질로 제작된 투명 원통형 수조를 사용합니다. 수조의 크기는 마우스가 탈출하거나 발이나 꼬리로 바닥에 닿는 것을 방지할 수 있는 크기로 선택합니다. 수조에 미리 정하고 표시해 둔 높이까지 수돗물을 채운 후, 수온을 조절합니다.
온도는 23°C에서 25°C 사이로 유지해야 합니다. 비디오 촬영을 위해 수조를 배치합니다. 본 실험실에서는 수조 사이에 4~5마리의 피험자를 두고 강제 수영 검사를 수행합니다.
피험자가 서로를 관찰하는 것을 방지하기 위해 칸막이를 설치합니다. 이 칸막이는 또한 마우스와 배경 간의 대비를 제공합니다. 알비노 마우스의 경우, 검은색이 비디오 녹화 시 좋은 대비를 제공합니다.
색이 어두운 마우스 계통의 경우, 흰색 또는 크림색 배경이 적합합니다. 실험을 시작하기 전, 화이트 노이즈 기계를 작동시키십시오. 소리가 너무 크지 않은지 확인하십시오.
간헐적인 소음만을 차단해야 합니다. 피험자들을 실험실로 안내하십시오. 적응 기간은 일반적으로 최소 1시간 이상이어야 합니다.
실험실의 환경은 소음, 조도 변화 및 기타 발생 가능한 방해 요소가 없는 일정한 상태로 유지되어야 합니다. 습관화 기간이 끝나면 테스트를 시작할 수 있습니다. 세션 이름을 기록하는 것이 중요합니다. 먼저, 마우스의 꼬리를 잡고 조심스럽게 탱크 안에 넣습니다.
동물이 수면에 닿았을 때 방향을 잡을 수 있도록 이 과정을 천천히 수행하는 것이 중요합니다. 6분간의 테스트 기간이 끝나면, 동물을 식별하는 과정을 비디오로 기록하고 녹화를 중단하십시오. 마우스를 투입한 순서대로 꺼내어 페이퍼 타월로 부드럽게 닦아 말린 후 케이지에 다시 넣으십시오.
탱크 내의 물은 재사용해서는 안 됩니다. 테스트가 완료되었으므로, 이제 Mass Force Swim 테스트의 행동 점수 산출 단계로 넘어가겠습니다. 평가하는 주요 변수는 실험 도중 동물이 부동 상태로 머무는 시간입니다.
일반적으로 마우스 강제 수영 검사에서는 총 6분의 세션 중 마지막 4분에 대해 점수를 매깁니다. 그 이유는 처리 여부와 관계없이 대부분의 마우스가 검사 초기 단계에서는 지속적으로 움직이기 때문입니다. 이러한 활동은 잠재적인 처리 효과를 가릴 수 있습니다.
이 비디오에서 볼 수 있듯이, 생쥐들은 테스트 초기 단계에서 매우 활발하게 움직입니다. 이러한 활동성은 각 생쥐의 측정 시간 중 처음 2분이 지나면 감소합니다. 이동성은 게임 패드로 제어되는 화면상의 스톱워치를 통해 측정됩니다.
다른 스톱워치로는 240초를 카운트다운합니다. 시간 내 이동성은 "신체 균형을 잡고 머리를 물 위로 유지하는 데 필요한 동작 외의 모든 움직임"으로 정의됩니다. 이제 시험의 샘플 채점 과정을 살펴보겠습니다.
혼동을 방지하기 위해 먼저 평가 대상이 아닌 다른 마우스들을 덮어줍니다. 마우스는 일반적으로 물에서 쉽게 뜬다. 하지만 신체의 균형을 잡고 머리를 물 위로 유지하기 위해 여전히 작은 움직임을 보입니다.
이러한 행동들은 탈출하려는 시도가 아니므로 이동성으로 점수화해서는 안 됩니다. 또한, 마우스가 한 차례 이동한 후, 기본적으로는 부동 상태일지라도 이전에 얻은 운동량의 결과로 물속에서 표류할 수 있는데, 이러한 움직임 역시 이동성으로 점수화해서는 안 됩니다. 이제 다음 영상으로 넘어가겠습니다.
이 비디오의 마우스는 화면에 표시된 것처럼 가동성과 부동성의 기간을 모두 나타내며, 관찰자는 가동성 시간을 기록합니다. 이론적으로는 부동성 시간을 직접 측정하는 것이 가능하지만, 움직임이 없는 상태보다는 활발한 움직임을 감지하고 측정하는 것이 더 쉽습니다. 전통적으로는 부동성 시간이 보고됩니다.
부동 시간은 240초에서 활동 시간을 빼서 결정합니다. 네 번째 수영 테스트의 점수를 매기는 작업에는 많은 훈련과 연습이 필요합니다. 높은 수준의 신뢰도를 확보하기 위해서는 내부 기준을 수립하고, 새로운 관찰자가 높은 수준의 신뢰도에 도달할 때까지 훈련시키는 것이 중요합니다.
본 영상에서는 마우스 강제 수영 검사법에 대해 설명합니다. 향후 진행하실 실험에 좋은 결과가 있기를 바랍니다.
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강제 수영 검사는 설치류에서 잠재적인 항우울 효능을 평가하기 위해 검증된 방법입니다. 이 검사는 생쥐를 수조에 넣고 탈출과 관련된 운동 행동을 정량화하는 방식으로 진행됩니다.
마우스 강제 수영 검사는 항우울제 효능을 평가하기 위해 널리 사용되는 전임상 행동 분석법으로, 탈출 관련 이동성에 대한 정량적 읽기 값을 제공하여 초기 발견 단계에서 표적 검증 및 기전적 리스크 감소를 지원합니다. 이 표준화된 절차는 우울증 유사 상태에 대한 화합물 효과의 재현 가능한 평가를 가능하게 하여, 항우울제 파이프라인 우선순위 결정 시 진행 또는 중단 여부를 판단하는 근거가 됩니다. 이 검사는 간단한 방법과 최소한의 장비 요구 사항 덕분에 발견 워크플로우 전반에 걸쳐 확장 가능한 구현이 용이합니다.
마우스 강제 수영 검사는 타겟 검증과 리드 물질 발굴을 연결하는 초기 단계의 행동 분석법으로 기능하며, 전임상 효능 연구로 진행하기 전 기전적 통찰을 제공합니다.