당뇨병 쥐의 열전달 Nociceptive 본부 신속한 결정

본 절차의 전반적인 목적은 대조군 및 당뇨병 쥐의 열성 통각 임계값을 결정하는 것입니다. 첫 번째 단계는 동물을 점진적 가열판 및 진통 측정기에 배치하는 것입니다. 다음으로, 표면이 가열되는 동안 가열판의 온도를 점진적으로 높입니다.

동물에게서 혐오 행동이 나타나는지 관찰합니다. 이러한 행동이 관찰되면 가열을 중단하고 그 순간의 플레이트 온도를 기록합니다. 결과적으로 진통제를 투여받았거나 통증성 당뇨병성 신경병증을 앓고 있는 동물의 열성 통각 역치 변화를 확인할 수 있습니다.

일반적으로 초임계 온도로 설정되는 핫 플레이트와 같은 기존 방법과 비교하여 이 기술의 주요 장점은, 본 방법은 플레이트의 온도를 점진적으로 높여 열성 통각 역치를 정확하게 결정할 수 있다는 점입니다. 열성 통각 역치(TNT)는 증분 핫 플레이트 진통 측정기(IHpam)를 사용하여 결정합니다. 이 시스템의 구성 요소로는 플렉시글라스 관찰 챔버, 온도 조절 알루미늄 플레이트, 프로그래밍용 키패드, 그리고 장치의 원격 제어를 위한 풋 스위치가 포함됩니다.

데이터는 근처 컴퓨터에 설치된 맞춤형 소프트웨어를 사용하여 수집합니다. 또는 기기에 위치한 시리얼 포트를 사용하여 하드카피를 출력할 수 있습니다. 동물의 행동 가시성을 높이기 위해 플렉시글라스 챔버 뒤에 거울을 배치하십시오.

다음으로, 원하는 가열 속도와 초기 대기 온도 및 최종 차단 온도를 설정하십시오. 풋 스위치를 눌러 시스템을 시작하거나 중지합니다. 초기 대기 온도와 최종 차단 온도, 그리고 최종 온도에 도달하는 데 걸리는 시간이 기록되었는지 확인하십시오.

원하는 경우, 실험자는 본인에게 시스템을 테스트할 수 있습니다. 통증이 느껴지는 순간 금속판에서 손을 뗍니다. 지각 과정에서 피부에 손상을 주거나 이후에 불편함이 발생해서는 안 됩니다.

테스트가 진행될 벤치 위에 케이지를 배치하여 전날 밤부터 순응을 시작하십시오. 테스트 2시간 전에 IH pan을 켜서 동물들이 장비의 배경 소음에 익숙해지도록 하십시오.

이 단계에서 시스템은 앞서 살펴본 것과 같이 설정하고 테스트할 수 있습니다. 동물이 환경에 적응한 후, 따뜻한 표면 위에 있는 플렉시글라스 챔버에 쥐를 조심스럽게 넣으십시오. 동물이 몇 분 동안 챔버를 탐색하도록 둡니다.

테스트를 시작합니다. 동물이 시험을 시작하기에 적절한 상태가 되면, 풋 스위치를 눌러 플레이트 가열을 시작하십시오. 플레이트가 가열되는 동안 동물의 행동을 관찰하십시오.

일반적으로 이 방법에 익숙하지 않은 개인은 대량 공격 행동의 식별이 항상 간단하지 않고 연습이 필요하기 때문에 어려움을 겪을 수 있습니다. 공격 행동에는 두 뒷구멍의 핥기, 떨기 또는 들어 올리기가 포함되지 않습니다. 처음으로 관찰되는 행동은 네 개의 구멍을 핥는 것일 수 있으며, 이후 뒷구멍의 반응이 뒤따른다는 점에 유의하는 것이 유용합니다.

가장 강한 혐오 반응이 관찰되면, 풋 스위치를 눌러 실험을 종료하고 동물을 홈 케이지로 옮깁니다. 이 반응을 유발하는 온도를 대조군 동물의 열성 통각 역치 또는 TNT로 간주합니다. 장치를 세척한 후 다음 동물에 대해 테스트를 반복합니다.

정상 성체 쥐와 생쥐의 열성 통각 역치 값은 다음과 같습니다. 본 데이터는 4일의 테스트 기간 동안 쥐의 TNT(열성 통각 역치)에 변화가 없었음을 보여줍니다. 마찬가지로, 생쥐의 TNT는 연령대에 관계없이 일정하게 유지되었습니다.

이 예시에서는 젊은 성체 STZ 당뇨 쥐의 TN TS를 반복적으로 측정하였습니다. 당뇨 유도 2주 후부터 열성 통각 역치가 지속적으로 감소하는 것을 확인할 수 있습니다. 여기서는 진통 화합물의 급성 항통각 특성을 테스트하기 위해 IH pam을 사용하였습니다.

A 화합물은 대조군 동물에서 용매를 투여한 동물과 비교하여 가벼운 진통 효과를 나타냈습니다. 그러나 당뇨 동물에서는 용매 대조군과 비교하여 A 화합물을 투여했을 때 진통 효과가 더 뚜렷하게 나타났습니다. 이 절차를 수행할 때는 동물의 행동, 특히 동물의 수용체 인근에서 발생하는 행동을 지속적으로 관찰하는 것이 매우 중요합니다.